第三节总皂苷的测定方法(分光光度法) 本方法适用于功能性食品中总皂苷的测定。 本方法人参皂苷Re的最低检出量为2pgmL 方法提要 样品中总皂苷经提取、PT一大孔吸附树脂柱预分离后,在酸性条件下,香草醛与人参皂苷生成有色 化合物,以人参皂苷Re为对照品,于560nm处比色测定 二、仪器 1.722分光光度计 2PT一大孔吸附树脂柱(河北省津杨滤材厂) 3.超声波振荡器。 试剂 1.甲醇(分析纯) 2.乙醇(分析纯) 3.人参皂苷Re标准品(中国药品生物制品检定所)。 4-5%香草醛溶液:称取5g香草醛,加冰乙酸溶解并定容至0omL 5高氯酸(分析纯) 6冰乙酸(分析纯)。 7.人参皂苷Re标准溶液:精确称取人参皂苷Re标准品20.0mg,用甲醇溶解并定容至10mL,即每lmL 含人参皂苷Re20mg 8重蒸水 四、测定步骤 1样品处理 (1)固体样品 称取10g左右样品于100mL烧杯中,加入20~4mL85%乙醇,超声波振荡30min,再定容至s0mL, 摇匀,放置,吸取上清液l.0mL挥干后以水溶解残渣,进行柱分离 (2)液体样品 含乙醇的酒类样品:准确吸取1.mL样品放于蒸发皿中,蒸干,用水溶解残渣,用此液进行柱层析 非乙醇类液体样品:准确吸取l.σmL样品(如浓度高或颜色深,需稀释一定体积后再取l.OmL)直接进行 柱分离。 2.柱层析 以PI一大孔吸附树脂柱进行层析分离,准确吸取上述已处理好的样品溶液10mL上柱,用15mL水 洗柱,以洗去糖分等水溶性杂质,弃去洗脱液,再用20mL85%乙醇洗脱总皂苷,收集洗脱液于蒸发皿中, 于水浴上蒸干,以此作显色用 3显色9 第三节 总皂苷的测定方法（分光光度法） 本方法适用于功能性食品中总皂苷的测定。 本方法人参皂苷 Re 的最低检出量为 2μg/mL。 一、方法提要 样品中总皂苷经提取、PT—大孔吸附树脂柱预分离后，在酸性条件下，香草醛与人参皂苷生成有色 化合物，以人参皂苷 Re 为对照品，于 560nm 处比色测定。 二、仪器 1.722 分光光度计。 2.PT—大孔吸附树脂柱（河北省津杨滤材厂）。 3.超声波振荡器。 三、试剂 1.甲醇（分析纯）。 2.乙醇（分析纯）。 3.人参皂苷 Re 标准品（中国药品生物制品检定所）。 4.5％香草醛溶液：称取 5g 香草醛，加冰乙酸溶解并定容至 l00mL。 5.高氯酸（分析纯）。 6.冰乙酸（分析纯）。 7.人参皂苷 Re 标准溶液：精确称取人参皂苷 Re 标准品 20.0mg，用甲醇溶解并定容至 10mL，即每 1mL 含人参皂苷 Re2.0mg。 8.重蒸水。 四、测定步骤 1.样品处理： （1）固体样品 称取 1.0g 左右样品于 100mL 烧杯中，加入 20～40mL 85%乙醇，超声波振荡 30min，再定容至 50mL， 摇匀，放置，吸取上清液 1.0mL 挥干后以水溶解残渣，进行柱分离。 （2）液体样品 含乙醇的酒类样品：准确吸取 1.0mL 样品放于蒸发皿中，蒸干，用水溶解残渣，用此液进行柱层析； 非乙醇类液体样品：准确吸取 1.0mL 样品（如浓度高或颜色深，需稀释一定体积后再取 1.0mL）直接进行 柱分离。 2.柱层析 以 PT—大孔吸附树脂柱进行层析分离，准确吸取上述已处理好的样品溶液 1.0mL 上柱，用 15mL 水 洗柱，以洗去糖分等水溶性杂质，弃去洗脱液，再用 20mL85%乙醇洗脱总皂苷，收集洗脱液于蒸发皿中， 于水浴上蒸干，以此作显色用。 3 显色