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素,秋水仙碱和空白对照的含20毫升的1%蛋白胨溶液100毫升锥形瓶中各加入1毫升脱 纤毛细胞。每隔10分钟分别从瓶中取样,观察其反应是否发生改变 8、从生长于17℃的四膜虫悬液制备新鲜脱纤毛的细胞,在分别加入亚胺环己酮,新霉 素,秋水仙碱和空白对照的含20毫升的1%蛋白胨溶液100毫升锥形瓶中各加入1毫升脱 纤毛细胞。每隔10分钟分别从瓶中取样,观察其反应是否发生改变。 9、从生长于25℃的浓缩四膜虫悬液制备一些新鲜的脱纤毛细胞。对下列各个瓶中分别 加入1ml脱纤毛细胞: (i)蛋白胨+10μg/ml亚胺环己酮 (i)蛋白胨+50μg/ml新霉素 (ⅲi)蛋白胨+2mg/ml秋水仙碱 (ⅳv)只含蛋白胨作为对照 每隔10分钟从瓶中取样。让实验进行尽可能长的时间,以便观察其反应是否发生改变。 记录结果 实验结果以能动性(%)对时间(min)作图表示: (1)生长于25℃和17℃的四膜虫 (2)抑制物对纤毛再生的效应 讨论 作为这一实验的引伸,还可以应用更多的抑制物来表明,是否需要生成新的信息性分 子,细胞周期中的不同时相是否起重要作用?对抑制物的观察可以时可逆的,因为经过一个 时间阶段后,细胞可以克服由于秋水仙碱引起的组装阻断。这些实验着眼于纤毛的再生系统, 在这些系统中很容易辨认出重点。这些实验还为诸如纤毛和鞭毛等微管结构的合成和组装提 供资料。 六、实验提示与注意事项 1梨形四膜虫的纯培养可培养于1%蛋白胨(1%蛋白胨:0.25%酵母浸膏),培养液用 15磅时2高压灭菌15分钟。在接种培养物和整个培养过程中需用无菌技术,但在课堂实验 时无需应用无菌采样技术。为了获得实验所需数量的培养物,含250m蛋白胨的500ml锥 形瓶在25℃可培养1-2天,而在17℃需2-3天。这一体积的培养物可用来接种25瓶新的 250ml培养物。10 素,秋水仙碱和空白对照的含 20 毫升的 1%蛋白胨溶液 100 毫升锥形瓶中各加入 1 毫升脱 纤毛细胞。每隔 10 分钟分别从瓶中取样,观察其反应是否发生改变。 8、 从生长于 17℃的四膜虫悬液制备新鲜脱纤毛的细胞,在分别加入亚胺环己酮,新霉 素,秋水仙碱和空白对照的含 20 毫升的 1%蛋白胨溶液 100 毫升锥形瓶中各加入 1 毫升脱 纤毛细胞。每隔 10 分钟分别从瓶中取样,观察其反应是否发生改变。 9、 从生长于 25℃的浓缩四膜虫悬液制备一些新鲜的脱纤毛细胞。对下列各个瓶中分别 加入 1ml 脱纤毛细胞: (i)蛋白胨+10µg/ml 亚胺环己酮 (ii)蛋白胨+50µg/ml 新霉素 (iii)蛋白胨+2mg/ml 秋水仙碱 (iv)只含蛋白胨作为对照 每隔 10 分钟从瓶中取样。让实验进行尽可能长的时间,以便观察其反应是否发生改变。 记录结果 实验结果以能动性(%)对时间(min)作图表示: (1)生长于 25℃和 17℃的四膜虫; (2)抑制物对纤毛再生的效应。 讨论 作为这一实验的引伸,还可以应用更多的抑制物来表明,是否需要生成新的信息性分 子,细胞周期中的不同时相是否起重要作用?对抑制物的观察可以时可逆的,因为经过一个 时间阶段后,细胞可以克服由于秋水仙碱引起的组装阻断。这些实验着眼于纤毛的再生系统, 在这些系统中很容易辨认出重点。这些实验还为诸如纤毛和鞭毛等微管结构的合成和组装提 供资料。 六、实验提示与注意事项 1.梨形四膜虫的纯培养可培养于 1%蛋白胨(1%蛋白胨;0.25%酵母浸膏),培养液用 15 磅/时 2 高压灭菌 15 分钟。在接种培养物和整个培养过程中需用无菌技术,但在课堂实验 时无需应用无菌采样技术。为了获得实验所需数量的培养物,含 250ml 蛋白胨的 500ml 锥 形瓶在 25℃可培养 1-2 天,而在 17℃需 2-3 天。这一体积的培养物可用来接种 25 瓶新的 250ml 培养物
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