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速度而变动。柱长和保留时间是正比的,柱长加倍,分离所需的时间亦加倍。最好是通过提 高柱填充剂的效能来达到,近年来高效液相色谱发展快,主要是在高效能填充剂方面有很大 进 图5一3表示不同因子对色谱的影响。图中(a)分离不良,两峰距离太近:(b)加大 值后,提高了选择性,两峰分开:(c)在a的基础上,加大N提高柱效,使峰变窄,峰尖位 置不变,但两峰可以分离:《小增大K”值,分离度好,但保留时间征长,峰拖尾后普带 密。因此利用式(5一11)使给定的分离最佳化时,首先调整K·值,使K在2一5之间.诺 带不太宽 分离的时间亦合适,其次是选择N,以提高柱效 如分离仍有问题,则可改变 使其具有更大的选择性。 (a) () (e3 ta) 图5-3色语分离最佳化条件 () 一分离不直;《b)知大,提高选择性;(©) 加大N,垫高柱袋;(@)增大K,改春分离 三、装置 高效液相色进仪的设计与所采用的分离原理无关,可以购买完整的仪器,亦可以购买单 独的部件组装成适用的仪器,典型的液相色谱仪由以下部件组成,贮液器、梯度装置、输液 泵、进样器、色谱柱、检测器,温控部件和记录仪等,其流程图,见图5一4。 贮液8 进在■ 担温箝 梯皮较置 收集器 图5-4高效液相色谱仪流程图 (一)贮存容器 某些商品贮液器配备有流动相脱气的装置,装有加热器,温度调节器和磁力搅拌器,流 动相的脱气是非常重要的,因为溶剂中溶解的空气在低压部件如检测器里会逸出气泡来,气 泡的出现会使检测器的噪声加大。常用的除气方法有三形 1)加热 :2)抽真空法:3)超声 波处理,有时为防止某种溶剂被氧化,可在贮液容器中充满氮气或氨气。 在气相色谱中,用高压气瓶来提供一定压力和流速的气体:波相色谱是用泵来完成。流 速度而变动。柱长和保留时间是正比的,柱长加倍,分离所需的时间亦加倍。最好是通过提 高柱填充剂的效能来达到,近年来高效液相色谱发展快,主要是在高效能填充剂方面有很大 进展。 图 5-3 表示不同因子对色谱的影响。图中(a)分离不良,两峰距离太近;(b)加大 a 值后,提高了选择性,两峰分开;(c)在 a 的基础上,加大 N 提高柱效,使峰变窄,峰尖位 置不变,但两峰可以分离;(d)增大 K’值,分离度好,但保留时间延长,峰拖尾后谱带变 宽。因此利用式(5—11)使给定的分离最佳化时,首先调整 K’值,使 K’在 2—5 之间,诺 带不太宽,分离的时间亦合适,其次是选择 N,以提高柱效,如分离仍有问题,则可改变 a 使其具有更大的选择性。 三、装置 高效液相色谱仪的设计与所采用的分离原理无关,可以购买完整的仪器,亦可以购买单 独的部件组装成适用的仪器,典型的液相色谱仪由以下部件组成,贮液器、梯度装置、输液 泵、进样器、色谱柱、检测器,温控部件和记录仪等,其流程图,见图 5—4。 (一)贮存容器 某些商品贮液器配备有流动相脱气的装置,装有加热器,温度调节器和磁力搅拌器,流 动相的脱气是非常重要的,因为溶剂中溶解的空气在低压部件如检测器里会逸出气泡来,气 泡的出现会使检测器的噪声加大。常用的除气方法有三种:1)加热法;2)抽真空法:3)超声 波处理,有时为防止某种溶剂被氧化,可在贮液容器中充满氮气或氦气。 (二)输 液 泵 在气相色谱中,用高压气瓶来提供一定压力和流速的气体;波相色谱是用泵来完成。流
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