动相输送、选择泵系统时应满足以下要求：1)输液压力高，早期液相色谱的进柱压为60 70kg/©m，现在液相色谱采用高速高效分离所需的小颗粒和小直径的色谱校，则要求进柱 压大到300 500kg/cm2.2)要求高压下通过性子的液流是连续而无脉动， 流动相的流面 的变动不应超过2%，输送的流量范围：分析型为0一10ml/min,制备型为50一100ml mi。3)能耐流动相的腐蚀。4)泵的密封性要好，死体积小，以便于迅速更换溶剂和梯度洗 脱。能满足上述要求的有机械恒流泵和气体恒压泵，液相色谱中最常用的是机械往复泵。恒 定的无脉冲的高压泵能保证流量恒定和准确，获得稳定的基线和保留值重现性好，沃特斯 1erS)使用的是双泵头往复式柱塞泵， 输出流 精度士0.1%，流量的准确度为士1%，最 高压力6000psi(相当于420kg/cm2),流速调节范围为0.1一9.9ml/mim,适于高精度的液 谱分析工作，该泵配有压力传感器，可从压力表显示压力，并有压力安全选择器，设定压力 极限值，压力超过时报警并自动停泵。 二递度洗时 气相色谱分析是为了改善分离和缩短分析周期 采用程序升温控制：而在液相色增中 使用梯度洗脱。所谓梯度洗脱足在 个色谱分析周期里不断改变流动相的化学组分，使一些 复杂混合物的分析能做到：1)提高分辨能力：2)峰形得到改善：3)缩短分析周期。 梯度洗脱可分为低压梯度（外梯度）和高压梯度（内梯度）。低压梯度是在常压下将不同极 性的溶剂按预先设定的比例在泵前混合，再由高压泵输入色谱桂，高压梯度装置是用高压泵 分别将两种或三种不同极性的溶剂输入混合器，经充分混合后输入色谱柱。梯度洗服装置的 溶剂混合器应具有体积小 无死区 清洗方便和混 才能获得重复的梯度曲 经梯度洗脱后的色增柱必须回复到起始的溶剂条件，然后再进行下一次分析，如果梯度变什 在10%一15%以内，直接泵入起始浓度的移动相即可。如梯度变化很大，则逐步改变溶剂 组分，不可在100%甲醇的柱子中直接泵入20%甲醉/水，压力和流速的突然变化可引起什 床的损坏。在流动相为有机溶剂/水/盐类的体系中，必须保证盐类在整个梯度程序中完全 容解，如使用0.005mol/L庚磺酸钠，它可完全溶 甲醇：水=2：8中，但不能溶于甲醇 水=8：2中，一旦盐类发生了不溶的沉淀，会损坏色谱柱，而且不能再生 (四)进样系统 把样品引进色谱锭有两个基本方法，即注射器法和进样阀法。进样过程往往会影响分离 效果，当注入样品后，由扩散而导致峰形展宽：而在高压状态下讲杆，难度较大：还要求讲 样时不影响输液系统的压力和流速，也不出现漏液等现象。目前高效液相色谱仪多采用定显 进样阀法 阀内装有环形定量管，样品溶液在常压下 靠注射器注入贮样管 并把管中的溶剂 顶出，再靠转动阀门，在保持高压不停流状态下将样品送入流路系统，其优点是进样时不受 色谱系统压力的限制，可在常压下进样，进样量由定量进样阀调整，进样时不会发生漏液或 堵塞进样口的现象，结果重现性好，话于按装自动进样器，由微处理机控制程序，可连续自 动讲几十个样品 (五)色谱柱 色谱柱是高效液谱仪的心脏部分。柱内填充填料的种类不同，性能也不同，通常采用不 锈钢直形住，内径为2一4mm,长度为15一30cm,柱子加长能改善分离，但要提高柱入口 处的压力，且加长分析时间。近年米高效填充剂的出现，实现了分离的高速和高效，经典的 液相色谱填充剂：1)颗粒大，直径一般在100m以上：2)粒度不均匀，3)设有一定形状：4 经不住高压。高效液柏色谱填充剂：1)颗粒小， 直径为10一30m,最小为3 :2)粒 度均匀：3)一般为球形：4)能在高压下工作。近年来采用直径3一5m的填抖制成 -5cr 长的高效短柱，适于快速分析。此外，有用弹性聚四氟乙烯材料制成的径向加压柱，靠径向 加压器使填料呈均匀规则排列可改善柱效，保留值的重现性好，在一般常规分析中亦可应用。 样品中如有吸附性的组分，会影响色谱柱的使用寿命，除了应在进色谱柱前抽提或过迪动相输送、选择泵系统时应满足以下要求：1)输液压力高，早期液相色谱的进柱压为 60 一 70 kg／cm2，现在液相色谱采用高速高效分离所需的小颗粒和小直径的色谱校，则要求进柱 压大到 300 一 500 kg／cm2。2)要求高压下通过性子的液流是连续而无脉动，流动相的流量 的变动不应超过 2％，输送的流量范围：分析型为 0－10 ml／min，制备型为 50—100ml／ min。3)能耐流动相的腐蚀。4)泵的密封性要好，死体积小，以便于迅速更换溶剂和梯度洗 脱。能满足上述要求的有机械恒流泵和气体恒压泵，液相色谱中最常用的是机械往复泵。恒 定的无脉冲的高压泵能保证流量恒定和准确，获得稳定的基线和保留值重现性好，沃特斯 (Waters)使用的是双泵头往复式柱塞泵，输出流量精度±0.1％，流量的准确度为±1％，最 高压力 6000psi(相当于 420kg／cm2)，流速调节范围为 0.1—9.9ml／min，适于高精度的液 谱分析工作，该泵配有压力传感器，可从压力表显示压力，并有压力安全选择器，设定压力 极限值，压力超过时报警并自动停泵。 (三)梯度洗脱 气相色谱分析是为了改善分离和缩短分析周期，采用程序升温控制；而在液相色谱中， 使用梯度洗脱。所谓梯度洗脱足在一个色谱分析周期里不断改变流动相的化学组分，使一些 复杂混合物的分析能做到：1)提高分辨能力；2)峰形得到改善；3)缩短分析周期。 梯度洗脱可分为低压梯度(外梯度)和高压梯度(内梯度)。低压梯度是在常压下将不同极 性的溶剂按预先设定的比例在泵前混合，再由高压泵输入色谱桂，高压梯度装置是用高压泵 分别将两种或三种不同极性的溶剂输入混合器，经充分混合后输入色谱柱。梯度洗服装置的 溶剂混合器应具有体积小，无死区、清洗方便和混合效率性能，才能获得重复的梯度曲线。 经梯度洗脱后的色谱柱必须回复到起始的溶剂条件，然后再进行下一次分析，如果梯度变化 在 10％一 15％以内，直接泵入起始浓度的移动相即可。如梯度变化很大，则逐步改变溶剂 组分，不可在 l00％甲醇的柱子中直接泵入 20％甲醉／水，压力和流速的突然变化可引起什 床的损坏。在流动相为有机溶剂／水／盐类的体系中，必须保证盐类在整个梯度程序中完全 溶解，如使用 0.005mol／L 庚磺酸钠，它可完全溶于甲醇∶水＝2∶8 中，但不能溶于甲醇∶ 水＝8∶2 中，一旦盐类发生了不溶的沉淀，会损坏色谱柱，而且不能再生。 （四）进样系统 把样品引进色谱锭有两个基本方法，即注射器法和进样阀法。进样过程往往会影响分离 效果，当注入样品后，由扩散而导致峰形展宽；而在高压状态下进杆，难度较大；还要求进 样时不影响输液系统的压力和流速，也不出现漏液等现象。目前高效液相色谱仪多采用定量 进样阀法，阀内装有环形定量管，样品溶液在常压下靠注射器注入贮样管，并把管中的溶剂 顶出，再靠转动阀门，在保持高压不停流状态下将样品送入流路系统，其优点是进样时不受 色谱系统压力的限制，可在常压下进样，进样量由定量进样阀调整，进样时不会发生漏液或 堵塞进样口的现象，结果重现性好，适于按装自动进样器，由微处理机控制程序，可连续自 动进几十个样品。 (五)色 谱 柱 色谱柱是高效液谱仪的心脏部分。柱内填充填料的种类不同，性能也不同，通常采用不 锈钢直形住，内径为 2—4mm，长度为 15—30 cm，柱子加长能改善分离，但要提高柱入口 处的压力，且加长分析时间。近年来高效填充剂的出现，实现了分离的高速和高效，经典的 液相色谱填充剂：1)颗粒大，直径一般在 l00 µm 以上；2)粒度不均匀，3)没有一定形状；4) 经不住高压。高效液柏色谱填充剂：1)颗粒小，直径为 10 一 30 µm，最小为 3—5µm；2)粒 度均匀；3)一般为球形；4)能在高压下工作。近年来采用直径 3—5µm 的填抖制成 3—5cm 长的高效短柱，适于快速分析。此外，有用弹性聚四氟乙烯材料制成的径向加压柱，靠径向 加压器使填料呈均匀规则排列可改善柱效，保留值的重现性好，在一般常规分析中亦可应用。 样品中如有吸附性的组分，会影响色谱柱的使用寿命，除了应在进色谱柱前抽提或过滤