(5)实验心得体会,对本实验意见评价 主要参考书 1.武大、复旦合编:微生物学,高教出版杜(二版),1998 2.范秀云等:微生物学实验,高教出版社 3.中科院数学所数理统计组编:正交试验法。人民教育出版社,1975 4.上海市食品工业公司编:酵母生产技术知识,1984 5.[日]氨基酸。核酸集谈会编,嶷克旭等译:核酸发酵。轻工业出版社,1987 6.林绿君·袁惠民:啤酒酵母和微生物管理。轻工业出版社990 第二部分RNA的制备和核苷酸的离子交换层析分离 实验原理 核酸是生物体的重要组成物质,是生物遗传的物质基础。它在生物体的生长、发育、繁 殖、遗传变异等基本生命过程中起着重要的作用。核酸是由许多单核苷酸构成的多聚物。单 核苷酸是由磷酸、核糖和碱基所组成。依据其核糖的结构不同,可将核酸分为核糖核酸(R NA)和脱氧核糖核酸(DNA)。从50年代开始,大量硏究表明,核酸及其降解物、衍 生物具有良好的治疗作用,因而迅速发展成为一大类生物药物一核酸类药物。 核糖核酸(RNA)广泛存在动物、植物和微生物之中。本实验选用稀碱法,从酵母中 制备RNA:即用氢氧化钠溶液,使细胞壁变性,以改变细胞壁通透性,使核酸从细胞内释 放出来,再用酸中和,然后除去菌体,将pH凋至RNA的等电点(P12.5)。使RNA沉 淀下来,干燥,即得RNA成品 核苷酸的分离纯化采用离子交换层析法。离子交换作用一般指在固相和液相之间发生的 可逆的离子交换反应,它可用于分离各种可解离的物质。通常离子交换剂是在一种高分子的 不溶性母体上引人若干大量功能基团。这样人工合成的离子交换剂具有各种各样的性能。作 为不溶性母体的高分子有树脂、纤维素、葡聚糖、琼脂糖或无机聚合物等,引人的功能基团 可以是酸性基团,如强酸型的含有磺酸基(一SO3H)、中强酸型的含有磷酸基(-POs H2)、弱酸型的含有羧基(一COOH)或酚羟基(一OH)。也可以是碱性基团,如强 碱型的含季铵[一N’(CH3)3]、弱碱型的含叔胺[一N’(CH3)2]、仲胺(一NHC H3)、伯胺(一NH2)等。（５）实验心得体会，对本实验意见评价。 主要参考书 ｌ．武大、复旦合编：微生物学，高教出版杜（二版），ｌ９９８ ２．范秀云等：微生物学实验，高教出版社 ３．中科院数学所数理统计组编：正交试验法。人民教育出版社，１９７５ ４．上海市食品工业公司编：酵母生产技术知识，ｌ９８４ ５．［日］氨基酸。核酸集谈会编，嶷克旭等译：核酸发酵。轻工业出版社，ｌ９８７ ６．林绿君·袁惠民：啤酒酵母和微生物管理。轻工业出版社ｌ９９０ 第二部分 ＲＮＡ的制备和核苷酸的离子交换层析分离 实验原理 核酸是生物体的重要组成物质，是生物遗传的物质基础。它在生物体的生长、发育、繁 殖、遗传变异等基本生命过程中起着重要的作用。核酸是由许多单核苷酸构成的多聚物。单 核苷酸是由磷酸、核糖和碱基所组成。依据其核糖的结构不同，可将核酸分为核糖核酸（Ｒ ＮＡ）和脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）。从５０年代开始，大量研究表明，核酸及其降解物、衍 生物具有良好的治疗作用，因而迅速发展成为一大类生物药物一核酸类药物。 核糖核酸（ＲＮＡ）广泛存在动物、植物和微生物之中。本实验选用稀碱法，从酵母中 制备ＲＮＡ：即用氢氧化钠溶液，使细胞壁变性，以改变细胞壁通透性，使核酸从细胞内释 放出来，再用酸中和，然后除去菌体，将ｐＨ凋至ＲＮＡ的等电点（Ｐ12.5）。使ＲＮＡ沉 淀下来，干燥，即得ＲＮＡ成品。 核苷酸的分离纯化采用离子交换层析法。离子交换作用一般指在固相和液相之间发生的 可逆的离子交换反应，它可用于分离各种可解离的物质。通常离子交换剂是在一种高分子的 不溶性母体上引人若干大量功能基团。这样人工合成的离子交换剂具有各种各样的性能。作 为不溶性母体的高分子有树脂、纤维素、葡聚糖、琼脂糖或无机聚合物等，引人的功能基团 可以是酸性基团，如强酸型的含有磺酸基（－ＳＯ3Ｈ）、中强酸型的含有磷酸基（－ＰＯ３ Ｈ２）、弱酸型的含有羧基（－ＣＯＯＨ）或酚羟基（－ＯＨ）。也可以是碱性基团，如强 碱型的含季铵［－Ｎ+（ＣＨ3）3］、弱碱型的含叔胺［－Ｎ+（ＣＨ3）2］、仲胺（－ＮＨＣ Ｈ3）、伯胺（－ＮＨ2）等