磷胶及a萘胺 每管加磺胶试剂2mL,a-素胺试剂2mL,然后静置30min 520nm比色，吸光值(A) 回门曲线 +可用华标纸制作杯准线 3.取上述材料4份，每份50片，称重后分别放入4个50mL三角瓶中，其中1个为 空白，3个用于懈活性测定，分别记为重复1、2、3。 4.在空白瓶中先加1mL30%三氯乙酸，然后在每个三角瓶中加入0.1mol·LpH7.5 磷酸缓冲液5mL、蒸馏水5mL(内源基质法)。如1果是外源基质法，则将蒸馏水换为5mL 0.2 mol-LKNO 5.将三角瓶骨于真空干燥器中抽气全样品完全沉入溶液中（约10mi血）。 6.取出三角瓶，30℃避光30min:之后在重复中也分别加入1mL30%的二氯乙酸以 终止反应，摇均。 7.吸取2mL(若反应液浓度太大，可吸取1mL加1mL水)反应液于10mL试管中 加磺胺试剂2mL,a-萘胶试剂2mL,静常30mim:比色，记下吸光值(A) 空白 重复2 重复3 羊重 吸光值(A) 8.从标准曲线中检出NO产含量(ug·mL),以每h每克鲜重产生的NO,g数表示 悔活性，计算方法。 Cas-Ca) 酶活性(NO,Hg.gFW.h)= FW×t 式中：C为根据回归曲线计算的NO;g数：V,为反应液总体积(mL):V为测定时 取样体积(mL):W为鲜重(g):1为反应时间(h)。计算时，先分别计算3个重复的结 果，耳算平均值，为所求结果。 实验10叶绿体色素的提取分离 【原理】 叶绿体色素是植物吸收太阳光能进行光合作用的重要物质，主要山叶绿素a、叶绿素： 胡萝卜素和叶黄素组成。叶绿体色素不溶于水，能溶于有机溶剂，且各种色素的脂溶性 同，故可利用乙醇或丙酮提取，用个同的有机溶剂萃取或用色谱法进行分离。色请法中最 简便的是纸层析法。当溶剂不断地从纸上流过时山于混合物中各成分在两相（流动相和固定 用间具有小同的分配系数，所以它们的移动速度不同，因而使各种色素的湿合物分离， ·9·