实验五植物液泡的活体染色与观察 【实验目的】 掌握植物液泡活体染色的原理和技术 【实验原理】 活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着色，但又无毒害的一种染色方法。由于碱 性染料的胶粒表面带有阳离子，酸性染料的胶粒表面带有阴离子，而被染部分本身具有阳离 子或阴离子，因此它们彼此之间发生吸引作用，染料就被堆积下来，可以显示出活细胞内的 某种天然结构存在的真实性，面不影响细胞的生命活动和产生任何物理、化学变化以引致细 胞的死亡。 活体染色可分为体内活染和体外活染两种类型。体内活染是将染料溶液以胶体状态注入 动植物体内，染料的颗粒固定、聚集在细胞内的特殊部位，达到被识别观察的目的。体外活 染又称为超活染色，该方法从活的动、植物体内分离出部分细胞或组织，以染料溶液侵染， 染料被选择性地定位在活细胞的某种结构上而显色。活体染色技术可用来研究生活状态下的 细胞结构和生理、病理状态。 液泡(vacuole))是植物细胞质中的泡状结构，是植物细胞中特有的细胞器，在成熟的活 的植物细胞中经常都有一个大的充满液体的中央液泡，可占据整个细胞体积的90%，是在细 胞生长和发有过程中由小的液泡融合而成的。液泡的表面有液泡膜，液泡内有细跑液，含有 无机盐、氨基酸、糖类以及各种色素等代谢物，甚至还含有有毒化合物，并处于高渗状态。 因此，它对细胞内的环境起若着重要的调节作用，可以使细胞保持一定的渗透压，保持膨张的 状态。 中性红(neutral red)是一种弱碱性plH指示剂，变 色范围在pH6.48.0之间（由红变黄）。植物的活细胞 能大量吸收中性红并向液泡中转移，由于液泡一般 情况下呈酸性反应，进入液泡的中性红可解离出大 量阳离子而呈现樱桃红色，原生质和细胞壁一般不 着色：死细胞由于原生质变性凝固，液泡失去功能。 用中性红染色时，中性红不能进入液泡，中性红的 阳离子反而与带有一定负电荷的原生质及细胞核结 合，而使原生质与细胞核染色。因此，中性红是液 泡的特殊染色剂，只将液泡染成红色，在细胞处于 图5液泡的中性红染色 生活状态时，细胞质和细胞核不被中性红染色。 【材料、器具与试剂】 (一)材料：洋葱鳞茎，小麦根尖，玉米根尖，大豆根尖。 (二)器具：普通光学显微镜、恒温水浴锅，天平，解剖盘、剪刀、镊子、解剖刀、吸管 载玻片、盖玻片、擦镜纸、吸水纸，量筒，烧杯。实验五 植物液泡的活体染色与观察 【实验目的】 掌握植物液泡活体染色的原理和技术。 【实验原理】 活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着色，但又无毒害的一种染色方法。由于碱 性染料的胶粒表面带有阳离子，酸性染料的胶粒表面带有阴离子，而被染部分本身具有阳离 子或阴离子，因此它们彼此之间发生吸引作用，染料就被堆积下来，可以显示出活细胞内的 某种天然结构存在的真实性，而不影响细胞的生命活动和产生任何物理、化学变化以引致细 胞的死亡。 活体染色可分为体内活染和体外活染两种类型。体内活染是将染料溶液以胶体状态注入 动植物体内，染料的颗粒固定、聚集在细胞内的特殊部位，达到被识别观察的目的。体外活 染又称为超活染色，该方法从活的动、植物体内分离出部分细胞或组织，以染料溶液侵染， 染料被选择性地定位在活细胞的某种结构上而显色。活体染色技术可用来研究生活状态下的 细胞结构和生理、病理状态。 液泡(vacuole) 是植物细胞质中的泡状结构，是植物细胞中特有的细胞器，在成熟的活 的植物细胞中经常都有一个大的充满液体的中央液泡，可占据整个细胞体积的90％，是在细 胞生长和发育过程中由小的液泡融合而成的。液泡的表面有液泡膜，液泡内有细胞液，含有 无机盐、氨基酸、糖类以及各种色素等代谢物，甚至还含有有毒化合物，并处于高渗状态。 因此，它对细胞内的环境起着重要的调节作用，可以使细胞保持一定的渗透压，保持膨胀的 状态。 中性红(neutral red)是一种弱碱性pH指示剂，变 色范围在pH6.4~8.0之间(由红变黄)。植物的活细胞 能大量吸收中性红并向液泡中转移，由于液泡一般 情况下呈酸性反应，进入液泡的中性红可解离出大 量阳离子而呈现樱桃红色，原生质和细胞壁一般不 着色；死细胞由于原生质变性凝固，液泡失去功能， 用中性红染色时，中性红不能进入液泡，中性红的 阳离子反而与带有一定负电荷的原生质及细胞核结 合，而使原生质与细胞核染色。因此，中性红是液 泡的特殊染色剂，只将液泡染成红色，在细胞处于 生活状态时，细胞质和细胞核不被中性红染色。 图 5 液泡的中性红染色 【材料、器具与试剂】 （一）材料：洋葱鳞茎，小麦根尖，玉米根尖，大豆根尖。 （二）器具：普通光学显微镜、恒温水浴锅，天平，解剖盘、剪刀、镊子、解剖刀、吸管、 载玻片、盖玻片、擦镜纸、吸水纸，量筒，烧杯。 12