【材料】 1.材料培养的枯草杆菌( Bacillus subtilis) 2.染色液和试剂5%孔雀绿水溶液、0.5%蕃红水溶液 3.器材小试管、接种环、擦镜纸、镊子、显微镜等 【方法】 Schaeffer与 Fulton氏染色法 1.涂片:按常规方法将待检细菌制成一薄的涂片。 2.晾干固定:待涂片晾干后在酒精灯火焰上通过2-3次。 3.染色 ①加染色液:加5%孔雀绿水溶液于涂片处(染料以铺满涂片为度),然后用酒精灯火 焰加热玻片至染液冒蒸汽时开始计算时间,约维持5min。加热过程中要随时添加染色液, 切勿让标本干涸。(加热时温度不能太高)。 ②水洗:待玻片冷却后,用水轻轻地冲洗,直至流出的水中无染色液为止 ③复染:用蕃红液染色5min 4.水洗、晾干或吸干。 5镜检:先低倍,再高倍,最后在油镜下观察芽胞和菌体的形态。 【结果】芽胞呈绿色,菌体为红色。 三、细菌的荚膜染色 【目的】了解细菌的荚膜染色法 【原理】:由于荚膜与染料间的亲和力弱,不易着色,通常采用负染色法染荚膜,即设 法使菌体和背景着色而荚膜不着色,从而使荚膜在菌体周围呈一透明圈。由于荚膜的含水量 在90%以上,故染色时一般不加热固定,以免荚膜皱缩变形。 【材料】 1肺炎球菌 2.染色液和试剂:结晶紫、20%CuSO4水溶液、香柏油、二甲苯 3.器材:载玻片、玻片搁架,擦镜纸、显微镜等。 【方法】 1.制片:提前数日于小白鼠腹腔注射肺炎链球菌0.2ml,小鼠死亡后解剖,取腹腔液印 片。印片自然干燥,无需加热固定。 2.染色: ①滴加结晶紫染液,于火焰上加温染色,使冒蒸气,勿水洗。 ②以20%CuSO4溶液冲洗染液,勿水洗,干后镜检 【结果】菌体呈现紫色,荚膜呈淡紫色。 四、细菌的鞭毛染色 【目的】了解细菌的鞭毛染色法 【实验原理】细菌的鞭毛极细,直径一般为10—20mm,只有用电子显微镜才能观察到。 但是,如采用特殊的染色法,则在普通光学显微镜下也能看到。鞭毛染色方法很多,但其基8 【材料】 1. 材料 培养的枯草杆菌（Bacillus subtilis）。 2. 染色液和试剂 5%孔雀绿水溶液、0.5%蕃红水溶液。 3. 器材 小试管、接种环、擦镜纸、镊子、显微镜等。 【方法】Schaeffer 与 Fulton 氏染色法 1. 涂片：按常规方法将待检细菌制成一薄的涂片。 2. 晾干固定：待涂片晾干后在酒精灯火焰上通过 2—3 次。 3. 染色： ①加染色液：加 5%孔雀绿水溶液于涂片处（染料以铺满涂片为度），然后用酒精灯火 焰加热玻片至染液冒蒸汽时开始计算时间，约维持 5min。加热过程中要随时添加染色液， 切勿让标本干涸。（加热时温度不能太高）。 ②水洗：待玻片冷却后 ，用水轻轻地冲洗，直至流出的水中无染色液为止。 ③复染：用蕃红液染色 5min。 4.水洗、晾干或吸干。 5.镜检：先低倍，再高倍，最后在油镜下观察芽胞和菌体的形态。。 【结果】芽胞呈绿色，菌体为红色。 三、细菌的荚膜染色 【目的】了解细菌的荚膜染色法 【原理】：由于荚膜与染料间的亲和力弱，不易着色，通常采用负染色法染荚膜，即设 法使菌体和背景着色而荚膜不着色，从而使荚膜在菌体周围呈一透明圈。由于荚膜的含水量 在 90%以上，故染色时一般不加热固定，以免荚膜皱缩变形。 【材料】 1.肺炎球菌 2.染色液和试剂 ：结晶紫、20 % CuSO4 水溶液、香柏油、二甲苯。 3.器材： 载玻片、玻片搁架，擦镜纸、显微镜等。 【方法】 1．制片：提前数日于小白鼠腹腔注射肺炎链球菌 0.2ml，小鼠死亡后解剖，取腹腔液印 片。印片自然干燥，无需加热固定。 2．染色： ① 滴加结晶紫染液，于火焰上加温染色，使冒蒸气，勿水洗。 ② 以 20%CuSO4 溶液冲洗染液，勿水洗，干后镜检。 【结果】菌体呈现紫色，荚膜呈淡紫色。 四、细菌的鞭毛染色 【目的】 了解细菌的鞭毛染色法 【实验原理】细菌的鞭毛极细，直径一般为 10—20nm，只有用电子显微镜才能观察到。 但是，如采用特殊的染色法，则在普通光学显微镜下也能看到。鞭毛染色方法很多，但其基