Km和Vmax是重要的酶学特征 酶的Km值差异很大（表8.4)。大多数酶的Km值在10l至10M之间。酶的Km值取 决于特定底物和环境条件（如pH值，温度，离子强度)。米氏常数K值有两重意义：(1) Km值显示速度达到最大反应速度一半时的底物浓度，因此Km值能够评估明显催化需要的 底物浓度。实验证据提示，Km值可以用来估计活体内的底物浓度。(2)Km值与起始步骤 的速度常数有关。根据Km=(k+k2)/k1的定义，如果k1>>k2,则Km≈k/k,即 Ks=[E][S]/ES]=k/k1。换句话说，Km值就是ES的解离常数（如果k1>>k2)。如 果满足这个条件，Km就能评估ES复合物(Km值高表示ES复合物的结合弱，Km数值低 便是复合物结合强)。必须指出，只有如果k1>>k才可以这样评估。 TABLE 8.4 Ky values of some enzymes Enzyme Substrate KM(μM) Chymotrypsin Acetyl-L-tryptophanamide 5000 Lysozyme Hexa-N-acetylglucosamine 6 B-Galactosidase Lactose 4000 Threonine deaminase Threonine 5000 Carbonic anhydrase C0, 8000 Penicillinase Benzylpenicillin 50 Pyruvate carboxylase Pyruvate 400 HCO3 1000 ATP 60 Arginine-tRNA synthetase Arginine 3 tRNA 0.4 ATP 300 Ta他e 最大反应速率Vmax指出酶的转化数值，即在酶分子完全为底物分子饱和的情况下，一 个酶分子在单位时间内将底物转化成产物的数量。这个数值等于速度常数k2,通常将这个常 数称为kcat。最大反应速度Vmax显示一个酶分子在单位时间内转化底物分子的数目（如果 酶活性位点的数目[E]r已知)。因为Vmax=k[E]r那么k2=Vmax/E]r 例如，10M的碳酸脱水酶在酶为底物完全饱和时催化碳酸形成的速度是每秒0.6M,因 此k2是6X10舻s。这是目前所知的最大转化数。因此碳酸脱水酶催化碳酸形成所需时间是 1.7μs。大多数没转化生理底物的数量是1~10s1（表8.5)。 Km和Vmax能够测定fEs,即结合底物的活性位点所占的比例。f正S与Km和Vmax之 间的关系如下：fs=VNmx=[S]/(S]+Km) TABLE 8.5 Turnover numbers of some enzymes Turnover number Enzyme (per second) Carbonic anhydrase 600,000 3-Ketosteroid 280,000 isomerase Acetylcholinesterase 25,000 Penicillinase 2,000 Lactate 1,000 dehydrogenase Chymotrypsin 100 DNA polymerase I 15 Tryptophan synthetase 3 Lysozyme 0.5Km 和 Vmax 是重要的酶学特征 酶的 Km 值差异很大（表 8.4）。大多数酶的 Km 值在 10 -1至 10 -7M 之间。酶的 Km 值取 决于特定底物和环境条件（如 pH 值，温度，离子强度）。米氏常数 Km 值有两重意义：（1） Km 值显示速度达到最大反应速度一半时的底物浓度，因此 Km 值能够评估明显催化需要的 底物浓度。实验证据提示，Km 值可以用来估计活体内的底物浓度。（2）Km 值与起始步骤 的速度常数有关。根据 Km = (k-1 + k2)/k1的定义，如果 k-1 ＞＞k2, 则 Km ≈k-1/ k1, 即 KES = [E][S]/[ES] = k-1/ k1。换句话说，Km 值就是 ES 的解离常数（如果 k-1 ＞＞k2）。如 果满足这个条件，Km 就能评估 ES 复合物（Km 值高表示 ES 复合物的结合弱，Km 数值低 便是复合物结合强）。必须指出，只有如果 k-1 ＞＞k2才可以这样评估。 最大反应速率 Vmax 指出酶的转化数值，即在酶分子完全为底物分子饱和的情况下，一 个酶分子在单位时间内将底物转化成产物的数量。这个数值等于速度常数 k2, 通常将这个常 数称为 kcat。最大反应速度 Vmax 显示一个酶分子在单位时间内转化底物分子的数目（如果 酶活性位点的数目[E]T已知）。因为 Vmax = k2 [E]T 那么 k2 = Vmax / [E]T 例如，10 -6M 的碳酸脱水酶在酶为底物完全饱和时催化碳酸形成的速度是每秒 0.6M，因 此 k2 是 6 x 10 5 s -1。这是目前所知的最大转化数。因此碳酸脱水酶催化碳酸形成所需时间是 1.7 s。大多数没转化生理底物的数量是 1 ~ 10 4 s -1 （表 8.5）。 Km 和 Vmax 能够测定 fES，即结合底物的活性位点所占的比例。fES 与 Km 和 Vmax 之 间的关系如下：fES = V/Vmax = [S] / ([S] + Km)