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Alchohol CHCH OH +NAD dchydrogenCH CHO+H+NADH 乙醛浓度高会产生疾病症状。因此正常状态下,乙醛脱氢酶能够将乙醛转化成乙酸。 Acetaldehyde dehydrogenase CH CHO+NAD CHCOO +NADH+2H 大多数人有两种乙醛脱氢酶,即Km低的线粒体乙醛脱氢酶和K值高的细胞质乙醛脱 氢酶。乙醇敏感的人群,线粒体乙醛脱氢酶没有活性(因一个氨基酸替代),只能用细胞质 乙醛脱氢酶进行乙醛脱氢。而这个酶的K值高,只有当乙醛达到相当高的水平才会启动乙 醛脱氢反应。结果,乙醛转化成乙酸的量少,乙醛进入血液,导致一些生理症状。 可以用几种方案确定Km和Vmax 如果酶的动力学行为遵循米氏方程,米氏常数Km和最大反应速度Vmax可以用不同底 物浓度的起始催化速率Vo推测出来。通常用curve-fitting程序推测Km和Vmax。然而,更 古老的方法也能用来推测Km和Vmax。不过这种方法因高浓度和低浓度数据,点的权重有差 异,因此对错误很敏感,现在不大使用。 在没有计算机时,推测Km和Vmax需要对米氏方程进行代数操作。由于Vmax是逐渐 逼近(图8.12),因此从米氏曲线没法球的精确的数据。由于Km是速度达到最大速度一半 时的底物浓度,因此也不可能直接从米氏曲线直接获得精确的K值。但是将米氏方程转换 成直线,就能够求出Vmaxd的精确数据。将米氏方程变成双倒数代数式 11 Ky 1 用l/No对l/S]作图,称为Lineweaver-Brk或双倒数作图,产生一条直线,其Y轴的截 距是l/Vmax,斜率是Km/Vmax,x轴截距是-l/Km。 1/Vo Slope KM/Vmax Intercept =-1/KM Intercept =1/Vmax 0 1/[s] 图8.13双倒数作图法。用l/V0对1/S]作图。斜率是Km/Vmax,纵轴截距是1/Vmax, 横轴截距是-l/Km。乙醛浓度高会产生疾病症状。因此正常状态下,乙醛脱氢酶能够将乙醛转化成乙酸。 大多数人有两种乙醛脱氢酶,即 Km 低的线粒体乙醛脱氢酶和 Km 值高的细胞质乙醛脱 氢酶。乙醇敏感的人群,线粒体乙醛脱氢酶没有活性(因一个氨基酸替代),只能用细胞质 乙醛脱氢酶进行乙醛脱氢。而这个酶的 Km 值高,只有当乙醛达到相当高的水平才会启动乙 醛脱氢反应。结果,乙醛转化成乙酸的量少,乙醛进入血液,导致一些生理症状。 可以用几种方案确定 Km 和 Vmax 如果酶的动力学行为遵循米氏方程,米氏常数 Km 和最大反应速度 Vmax 可以用不同底 物浓度的起始催化速率 V0推测出来。通常用 curve-fitting 程序推测 Km 和 Vmax。然而,更 古老的方法也能用来推测 Km 和 Vmax。不过这种方法因高浓度和低浓度数据点的权重有差 异,因此对错误很敏感,现在不大使用。 在没有计算机时,推测 Km 和 Vmax 需要对米氏方程进行代数操作。由于 Vmax 是逐渐 逼近(图 8.12),因此从米氏曲线没法球的精确的数据。由于 Km 是速度达到最大速度一半 时的底物浓度,因此也不可能直接从米氏曲线直接获得精确的 Km 值。但是将米氏方程转换 成直线,就能够求出 Vmaxd 的精确数据。将米氏方程变成双倒数代数式 用 1/V0对 1/[S]作图,称为 Lineweaver-Burk 或双倒数作图,产生一条直线,其 Y 轴的截 距是 1//Vmax,斜率是 Km/Vmax,x 轴截距是-1/Km。 图 8.13 双倒数作图法。用 1/V0 对 1/[S]作图。斜率是 Km/Vmax,纵轴截距是 1/Vmax, 横轴截距是 -1/Km
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