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1.共同点 结构的相似性:无论是ZFN、TALEN还是CRISPR/,Cas9,都是由DNM识别域和核酸内切酶 两部分组成。其中ZFN技术具有锌指结构域能够识别靶点DNM,而TALENE的DNA识别区域 是重复可变双残基的重复,DA剪切区域都是一种名为FokI的核酸内切酶结构域。 CRISPR的DNA识别区域是crRNAT或向导RNM,Cas9蛋白负责DNA的剪切。当DNA结合域识 别靶点DNA序列后,核酸内切酶或Cas9蛋白将DA剪切,靶DNA双链断裂,再启动DNA损 伤修复机制,实现基因敲除、插入等。 作用过程的相似性:通过DNA识别模块对特异性的DNA位点识别并结合,然后在 相关核酸内切酶的作用下完成特定位点的剪切,从而借助于细胞内固有的HD(同源 定向修复)或NHEJ(非同源末端连接)途径修复过程完成特定序列的插入、删除及基 因融合。1.共同点 结构的相似性:无论是ZFN、TALEN还是CRISPR/Cas9,都是由DNA识别域和核酸内切酶 两部分组成。其中ZFN技术具有锌指结构域能够识别靶点DNA,而TALEN的DNA识别区域 是重复可变双残基的重复,DNA剪切区域都是一种名为Fokl的核酸内切酶结构域。 CRISPR的DNA识别区域是crRNA或向导RNA,Cas9蛋白负责DNA的剪切。当DNA结合域识 别靶点DNA序列后,核酸内切酶或Cas9蛋白将DNA剪切,靶DNA双链断裂,再启动DNA损 伤修复机制,实现基因敲除、插入等。 作用过程的相似性:通过DNA识别模块对特异性的DNA位点识别并结合,然后在 相关核酸内切酶的作用下完成特定位点的剪切,从而借助于细胞内固有的HDR(同源 定向修复)或NHEJ(非同源末端连接)途径修复过程完成特定序列的插入、删除及基 因融合
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