第34卷第4期 甘肃中医药大学学报 Vol 34 No 4 2017年8月 J GANSU UNIVERSITY OF CHINESE MEDICINE Aug.2017 胀,具有明显的镇痛和抗炎作用 0.2%的甲醇乙腈溶液-0.1%三乙胺和0.1%磷酸溶 2.4抗氧化 液(1.5:98.5)为流动相检测地稔根中没食子酸的含 张超等2往体外反应产生的O,-和·OH体系量结果地稔根中没食子酸含量为0.22mg/g。彭玲 中加入不同质量浓度的地稔多糖MD,检测对氧自等)采用 Diamonsil C,色谱柱,以甲醇-0.1%磷酸 由基的抑制作用,结果表明,地稔多糖MD1在低浓溶液(3:97)为流动相,测得地稔中没食子酸含量 度(<250mg/L)时具有清除自由基O2-和·OH的为0.4526mg/g。该法快速简单,稳定可靠,专属性 作用,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。强。随着研究者对地稔化学成分和药理作用的不断 李丽等{将地稔乙酸乙酯提取部位给糖尿病(DM)研究,其活性成分不断被发现,因此,该药材的内在 模型小鼠按高、中、低(60,40,20g/kg)剂量依次连质量检测成分不再单一。麻秀萍等1以没食子酸 续给药,观察小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)的活和芦丁为指标性成分,刘敏等冽以没食子酸和槲皮 性,实验结果显示小鼠血清SOD活性明显上升(P<素为指标性成分,采用HPC法对其含量进行测定, 0.01),提示地稔乙酸乙酯提取部位具有抗氧化作作为地稔药材质量控制的指标 用 3.5指纹图谱及其他 3质量标准 黄仕清等∞采用毛细管GC法,以氢焰离子化 3.1性状 检测器(FID)测定13个不同批次的地稔样品。结 本品根细小而弯曲,表面灰白色或黄白色,光滑果表明,地稔药材挥发油的C特征指纹图谱由13 或有皱纹,质坚硬。枝近无毛或被疏粗毛。叶对生,个特征峰构成,不同产地药材的GC特征指纹图谱 卵形、倒卵形或椭圆形,长1-3cm,宽0. 相似度较好。本方法简便,专属性强,重复性好,为 2.0cm,表面黄绿色或暗黄绿色。气微味微甘、酸、地稔药材的质量控制提供了科学依据。刘敏等 涩 对26批地稔样品进行检测,水分、酸不溶性灰分、浸 3.2显微形态 出物含量测定结果范围分别为:6.70%~13.90%, 根横切面特征:木栓层由10~14列细胞组成 1.05%~6.20%,18.00%~40.80%。根据试验结 多成扁圆形,排列整齐;偶见石细胞,类方形梭形;果,结合大工业生产的实际情况,建议其水分应不得 簇晶单个散在或数个排列成行。茎横切面特征:超过140%,酸不溶性灰分应不得超过8.0%,浸出 表皮细胞单层,排列紧密,细胞近长方形;木纤维排物含量应不得低于18.0%。 列紧密整齐木射线呈放射状2。叶横切面:上、下4结语 表皮细胞均1列,类长方形,偶见单细胞非腺毛;叶 地稔含多类活性成分,具有广泛的药理作用。 肉组织内含众多草酸钙簇晶,主脉3~5条,排列不 随着地稔药用价值的开发,难免会出现伪品,而地方 规则。粉末特征:黄棕色薄壁细胞无色或淡黄标准中只有性状、薄层色谱等鉴别项目,没有含量测 色、卵圆形或不规则形,以网纹导管为主,草酸钙簇定的控制指标。在现有的质量标准中,增加酸不溶 晶多,石细胞淡黄色、梭形或类方形[2 性灰分、浸出物含量和指纹图谱等项目的检查,有利 3.3薄层色谱 于综合控制药材的质量。而且传统的中药鉴定均为 范带叫取地稔对照药材、没食子酸槲皮素遗传表现型,生物体的生长不仅受遗传因素的影响, 对照品分别制成对照药材和对照品溶液,以甲苯一而且受环境条件等因素影响,具有很大的可变性和 乙酸乙酯-甲酸(5:2:1)为展开剂,置紫外灯可塑性。随着分子生物学技术在中药学领域的渗透 (254m)下检视,在与对照药材及对照品色谱相应 与发展,将地稔DNA分子特征作为遗传标记的研究 位置上显相同颜色的斑点。杨建冬等以没食子 具有重要的意义。 酸为对照品,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(5:4 参考文献: 1)为展开剂置紫外灯(254m)下检视,再喷以1%[1]国家中医药管理局《中华本草》编委会中华本草(第5 氯化铁乙醇溶液,在与对照品色谱相应位置上显 册)[M].上海:上海科学技术出版社,1999678-680 相同颜色的斑点。 [2]张超,姚惠珍,徐兰琴,等.地稔多糖MD1清除活性氧自 3.4含量测定 由基及对人红细胞膜脂质过氧化作用影响的研究[J] 地稔中没食子酸含量较高,可作为其质量控制 广州医学院学报,2002,30(4):18. 的指标。曾彩芳等采用 Hypersil ODS色谱柱,以[3]邓郑东,程爱芳,李秀丽地稔凝集素的提取及凝血活性胀,具有明显的镇痛和抗炎作用。 2. 4 抗氧化 张超等[21]往体外反应产生的 O2 -和·OH 体系 中加入不同质量浓度的地稔多糖 MD1 ,检测对氧自 由基的抑制作用,结果表明,地稔多糖 MD1 在低浓 度(<250 mg / L)时具有清除自由基 O2 -和·OH 的 作用,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0. 01)。 李丽等[22]将地稔乙酸乙酯提取部位给糖尿病(DM) 模型小鼠按高、中、低(60,40,20 g / kg)剂量依次连 续给药,观察小鼠血清超氧化物歧化酶( SOD)的活 性,实验结果显示小鼠血清 SOD 活性明显上升(P< 0. 01),提示地稔乙酸乙酯提取部位具有抗氧化作 用。 3 质量标准 3. 1 性状 本品根细小而弯曲,表面灰白色或黄白色,光滑 或有皱纹,质坚硬。 枝近无毛或被疏粗毛。 叶对生, 卵形、 倒 卵 形 或 椭 圆 形, 长 1 ~ 3 cm, 宽 0. 8 ~ 2. 0 cm,表面黄绿色或暗黄绿色。 气微,味微甘、酸、 涩。 3. 2 显微形态 根横切面特征:木栓层由 10 ~ 14 列细胞组成, 多成扁圆形,排列整齐;偶见石细胞,类方形、梭形; 簇晶单个散在或数个排列成行[23] 。 茎横切面特征: 表皮细胞单层,排列紧密,细胞近长方形;木纤维排 列紧密整齐,木射线呈放射状[24] 。 叶横切面:上、下 表皮细胞均 1 列,类长方形,偶见单细胞非腺毛;叶 肉组织内含众多草酸钙簇晶,主脉 3 ~ 5 条,排列不 规则[23] 。 粉末特征:黄棕色,薄壁细胞无色或淡黄 色、卵圆形或不规则形,以网纹导管为主,草酸钙簇 晶多,石细胞淡黄色、梭形或类方形[23] 。 3. 3 薄层色谱 范蕾等[23]取地稔对照药材、没食子酸、槲皮素 对照品分别制成对照药材和对照品溶液,以甲苯- 乙酸乙酯 -甲酸(5 ∶ 2 ∶ 1 ) 为展开剂,置紫外灯 (254 nm)下检视,在与对照药材及对照品色谱相应 位置上显相同颜色的斑点。 杨建冬等[25] 以没食子 酸为对照品,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(5 ∶ 4 ∶ 1)为展开剂,置紫外灯(254 nm)下检视,再喷以 1% 三氯化铁乙醇溶液,在与对照品色谱相应位置上显 相同颜色的斑点。 3. 4 含量测定 地稔中没食子酸含量较高,可作为其质量控制 的指标。 曾彩芳等[26]采用 Hypersil ODS 色谱柱,以 0. 2%的甲醇乙腈溶液-0. 1% 三乙胺和 0. 1% 磷酸溶 液(1. 5 ∶ 98. 5)为流动相检测地稔根中没食子酸的含 量,结果地稔根中没食子酸含量为0. 222 mg / g。 彭玲 等[27]采用 Diamonsil C18 色谱柱,以甲醇-0. 1% 磷酸 溶液(3 ∶ 97)为流动相,测得地稔中没食子酸含量 为 0. 452 6 mg / g。 该法快速简单,稳定可靠,专属性 强。 随着研究者对地稔化学成分和药理作用的不断 研究,其活性成分不断被发现,因此,该药材的内在 质量检测成分不再单一。 麻秀萍等[28] 以没食子酸 和芦丁为指标性成分,刘敏等[29] 以没食子酸和槲皮 素为指标性成分,采用 HPLC 法对其含量进行测定, 作为地稔药材质量控制的指标。 3. 5 指纹图谱及其他 黄仕清等[30]采用毛细管 GC 法,以氢焰离子化 检测器(FID)测定 13 个不同批次的地稔样品。 结 果表明,地稔药材挥发油的 GC 特征指纹图谱由 13 个特征峰构成,不同产地药材的 GC 特征指纹图谱 相似度较好。 本方法简便,专属性强,重复性好,为 地稔药材的质量控制提供了科学依据。 刘敏等[31] 对 26 批地稔样品进行检测,水分、酸不溶性灰分、浸 出物含量测定结果范围分别为:6. 70% ~ 13. 90% , 1. 05% ~ 6. 20% ,18. 00% ~ 40. 80% 。 根据试验结 果,结合大工业生产的实际情况,建议其水分应不得 超过 14. 0% ,酸不溶性灰分应不得超过 8. 0% ,浸出 物含量应不得低于 18. 0% 。 4 结语 地稔含多类活性成分,具有广泛的药理作用。 随着地稔药用价值的开发,难免会出现伪品,而地方 标准中只有性状、薄层色谱等鉴别项目,没有含量测 定的控制指标。 在现有的质量标准中,增加酸不溶 性灰分、浸出物含量和指纹图谱等项目的检查,有利 于综合控制药材的质量。 而且传统的中药鉴定均为 遗传表现型,生物体的生长不仅受遗传因素的影响, 而且受环境条件等因素影响,具有很大的可变性和 可塑性。 随着分子生物学技术在中药学领域的渗透 与发展,将地稔 DNA 分子特征作为遗传标记的研究 具有重要的意义。 参考文献: [1]国家中医药管理局《中华本草》编委会. 中华本草(第 5 册)[M]. 上海:上海科学技术出版社,1999:678-680. [2]张超,姚惠珍,徐兰琴,等. 地稔多糖 MD1 清除活性氧自 由基及对人红细胞膜脂质过氧化作用影响的研究[ J]. 广州医学院学报,2002,30(4):18. [3]邓郑东,程爱芳,李秀丽. 地稔凝集素的提取及凝血活性 — 95 — 第 34 卷 第 4 期 2017 年 8 月 甘 肃中医药大学学报 J． GANSU UNIVERSITY OF CHINESE MEDICINE Vol． 34 No． 4 Aug. 2017