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雌性菌株,细胞中不含F因子,细菌表面也无性菌毛的菌株。这种雌性菌株 比较少见。 (3)F菌株 当H菌株细胞内的F因子因不正常的切离而脱离核染色体组时,可重新形 成游离的、但携带整合位点临近一小段核染色体基因的特殊F因子的菌株。 可以看出,除了F-菌株以外,其余三种菌株都以不同的方式携带着F因子, 因此都是雄性菌株。他们分别于雌性菌株接合会产生以下不同的结果。 下+与F-菌株的接合 Hfr与F-菌株的接合 F与F-菌株的接合 (四)原生质体融合 上面讲的三种遗传学技术和原生质体融合都叫做体内基因重组。它是指重组 过程发生在细胞内。这是相对于体外D八A重组技术(或基因工程技术)而言。体内 基因重组育种是指采用接合、转化、转导和原生质体融合等遗传学方法和技术使 微生物细胞内发生基因重组,以增加优良性状的组合,或者导致多倍体的出现, 从而获得优良菌株的一种育种方法。该方法在微生物育种中占有重要地位。尤其 是70年代以米发展起米的原生质体融合技术为微生物育种开辟了一条新的途 径,成为重要的育种手段之一。 原生质体融合技术是将遗传性状不同的两种菌(包括种间、种内及属间)融合 为一个新细胞的技术。主要包括原生质体的制备、原生质体的融合、原生质体再 生和融合子选择等步骤。 (1)原生质体制备 将两亲株分别用酶处理,使细胞壁全部消化或使薄弱部分破裂,原生质体即 可从细胞内逸出。为了防止原生质体的破裂,要把原生质体释放到高渗缓冲液或 培养基中。各种微生物的原生质体制备过程中,所用来破壁的酶也不同,细菌主 要用溶菌酶,酵母菌和霉菌一般用蜗牛酶或纤维素酶。 (②)原生质体融合和再生 制备好的二亲本原生质体可通过化学因子诱导或电场诱导进行融合。化学因 子诱导的原生质体融合,最成功并且至今为人们所经常使用的是以
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