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步骤 总活力(U) 总蛋白质(mg)20 422 比活力(U/mg)6/204/103/5 酶的提纯过程中,总蛋白减少,总活力减少,比活力增高。 酶的纯化倍数 每一步比活力 第一步总活力 每一步比活力 酶的回收率: 第一步总活力×100%0 4、酶的转换数和催化周期 分子活性定义:每mol的 enzyme在1秒内转化 substrate的mol数 亚基或催化中心活性定义:每mol的 active subunit或 active center在一秒内转化的 substrate的 mol数,称为转换数Kcat P244图表4-4 转换数的倒数即为催化周期:一个酶分子每催化一个底物分子所需的时间 如:乳糖脱氢酶转换数为1000/秒,则它的催化周期为103秒 二、底物浓度对酶促反应速度的影响 单底物酶促反应,包括异构酶、水解酶及大部分裂合催化的反应。 1913 Michaelis和 Menten提出米一曼方程。 (一)底物浓度对离促反应速度的影响—米式学说的提出 1903 Henri研究蔗糖水解反应。 sucrose +H2O glucose +fructose sucrase 酸水解9 步骤 1 2 3 4 总活力(U) 6 4 3 2 总蛋白质(mg) 20 10 5 2 比活力(U/mg) 6/20 4/10 3/5 2/2 酶的提纯过程中,总蛋白减少,总活力减少,比活力增高。 酶的纯化倍数: 酶的回收率: ×100% 4、 酶的转换数和催化周期 分子活性定义:每 mol 的 enzyme 在 1 秒内转化 substrate 的 mol 数。 亚基或催化中心活性定义:每 mol 的 active subunit 或 active center 在一秒内转化的 substrate 的 mol 数,称为转换数 Kcat P244 图表 4—4 转换数的倒数即为催化周期:一个酶分子每催化一个底物分子所需的时间。 如:乳糖脱氢酶转换数为 1000/秒,则它的催化周期为 10-3秒。 二、 底物浓度对酶促反应速度的影响 单底物酶促反应,包括异构酶、水解酶及大部分裂合催化的反应。 1913 Michaelis 和 Menten 提出米—曼方程。 (一) 底物浓度对酶促反应速度的影响——米式学说的提出 1903 Henri 研究蔗糖水解反应。 sucrose +H2O acid glucose +fructose sucrase 酸水解 V V 第一步总活力 每一步比活力 第一步总活力 每一步比活力
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