cDNA微阵列是在1995年由斯坦福大学率先研制成功并应用于基因表达分析的。首先 将细胞内的mRNA逆转录成cDNA并分离,然后将分离得到的所有或部分cDNA(其 长度通常大于200bp)作为探针,用机器手按照阵列的形式点到玻璃片上。玻璃片上的每 一个点只包含一种cDNA分子,这样就制成了cDNA微阵列。固定在玻片上的cDNA探 针可以通过测序得到序列或者其来源是已知的。在使用cDNA微阵列时,首先提取组织或 细胞系中的mRNA样本,逆转录成cDNA并用荧光素标记:然后把标记混合物加到 cDNA微阵列上,与探针杂交,杂交过程完成后,清洗微阵列:最后用激光扫描仪扫描并 获取荧光图像,对图像进行分析,得到cDNA芯片上每一个点的荧光强度值。荧光强度值 定量反映了样本中存在的与探针互补的mRNA丰度,也就是反映了探针所对应基因的表达 水平 原理—通过杂交检测信息 组寡核苷酸探针 由杂交位置确定的一组 TACGTTAG ATACGTTA 核酸探针序列 「 ATACGTTA TACGTTAG ACGTTAGA 杂交探针组 CGTTAGAT 日日 I GTTAGATCI ACGTTAGA CGTTAGAT GTTAGATC A TACGTTAGATC 重组的互补序列 ○- -TATGCAATCTAG TATGCAATCTAG 靶序列cDNA 微阵列是在 1995 年由斯坦福大学率先研制成功并应用于基因表达分析的。首先 将细胞内的 mRNA 逆转录成 cDNA 并分离，然后将分离得到的所有或部分 cDNA （其 长度通常大于 200bp ）作为探针，用机器手按照阵列的形式点到玻璃片上。玻璃片上的每 一个点只包含一种 cDNA 分子，这样就制成了 cDNA 微阵列。固定在玻片上的 cDNA 探 针可以通过测序得到序列或者其来源是已知的。在使用 cDNA 微阵列时，首先提取组织或 细胞系中的 mRNA 样本，逆转录成 cDNA 并用荧光素标记；然后把标记混合物加到 cDNA 微阵列上，与探针杂交，杂交过程完成后，清洗微阵列；最后用激光扫描仪扫描并 获取荧光图像，对图像进行分析，得到 cDNA 芯片上每一个点的荧光强度值。荧光强度值 定量反映了样本中存在的与探针互补的 mRNA 丰度，也就是反映了探针所对应基因的表达 水平