水产学报 14卷 不同器官组织的感染试验:用人工感染发病鱼各器官组织匀浆液感染健康草鱼的结果见附表。从 袭中可以看出健康草鱼内脏混合液无感染性,人工感染病死鱼内脏混合液感染死亡率为85%,相同浓 的不同器官组织导致的死亡率不同,死亡率大小的顺序是:肠、肾、肝、脾、心脏、鳃、肌肉。病死鱼内脏 混合液感染死亡率大于各个内脏器官单独感染的平均死亡率(71%) 附表病鱼主要器官组织液人工感染结果 Attached table Infected result of major organs's tissues of grass carp 器官心肝蜴肌肉牌肾6鑫齿重 感块尾数 17 病死尾数 羽 病死率( 56 L1 78 早期在制备组织疫时考虑到肠道内含物较复杂,可能含有多种致病菌而舍弃。我们的试验表明, 经双抗处理后健康草鱼内脏组织匀浆液(包括肠组织)并无感染性,而病死鱼肠道组织感染力亮于其它 组织,因此制备组织疫苗时可以将病鱼肠道组织作为疫苗的材料。我们曾按常规方法从病死鱼肌肉组 织中分离病毒,未获成功,但感染实验表明肌肉组织仍具有一定的感染性,其相对含病毒量较低作为普 通组织疫苗,考虑到肌肉组织在鱼体中占有很大的比例,可以将肌肉作为材科,但要制备高效价的组织 疫苗或从病鱼中分离提纯钢老,则应放弃肌肉组织。 以前的研究已证实鱼呼肠孤病毒是草鱼出血病的病原"。其它感染动物和人的呼肠孤病毒一般 在宿主的呼吸道和肠道中都存在口。我们首次在病鱼肠道中观察到病毒颗粒,并经感染试验证实其感 染力高于其它组织。超薄切片观察与感染结果相吻言。这表明,不仅肾脏是鱼呼肠孤病毒侵袭的靶器 官、肠道同样是侵袭的重要器官,这符合呼肠孤病毒对宿主组织的嗜性。但在鱼呼吸器官的鳃组织切片 中未观察到病毒粒子,鳃组织匀浆液的感染力较低,由此可以认为肠道和肾脏是鱼呼肠孤病毒的主要增 殖场所。 早期在病死鱼肾组织细胞核内观察到未成熟病毒颗粒,在细胞质内观察到成熟病毒粒子【3但在 以后的人工感染鱼肾单层纪胞的超薄切片中,仅在细胞质内观察到病毒颗粒,而在细胞按内没有袋 Joklik认为:呼肠孤病毒增殖的最主要特证是在细胞质中进行复制、生物合成及装配等全过程,与 DNA病毒不同,这类ENA病毒增殖的任一阶段都不在细胞核内进行n。在我们的超薄切片中.在肟 道和肾脏组织的细胞核中没有发现病毒。如果在细胞核中观察到病毒,那么就有理由怀疑该病毒是百 是呼肠孤病毒;如果该病毒是呼肠孤病毒推测在细胞核内看到的病毒可能是细胞核膜破裂或溶解后从 细胞质进入核内。草鱼出血病病李在宿主细胞内的活动还有待于进一步研究 本次实验观察到的病毒颗粒大小与中国科学院水生生物研究所报道的结果相近,而比我所原分离 到的病毒颗粒(直径55±3m)要大我们认为,不同地区分离到的草鱼出血病病毒在形态大小及 基因结构上存在差异,这一点,还需进一步证实。 考文敵 [1]中国医学科学院流行病防治研究所,1978。常见病毒病实验技木,88-841。科学出版社,北京。 2]中国科学院水生生物研究所,1978。草鱼出血病病原的研究,水生生物学集刊,6(9):821-380 8]中国科学院水生生物研究所,1980。草鱼出血病病原的研究I,电镜观察。水生生物学樂刊7(1):75-84 4]中国科学院武汉病毒研究所、中国水产科学院长江水产研究所沙市分所草鱼出血病协作组,198。草鱼出血 病病毒的电子显微镜观察初报。淡水渔业,(8):8940水 产 学 报 14卷 不 同器官组织的感染试验：用人工感染发病鱼各器官组织匀浆液感染健康草鱼的结 果 见 附表。从 蓑 中可 以看出 c健康 草 鱼 内脏 混 合液 无 感染 性 ，人 工 感 染病 死鱼 内脏 混 合蔽 感染 死亡 率为 85 ，相 同浓 度的不问器官组织导致的死亡率不同，死亡率大小的顺序是：肠、肾、肝、脾、心脏 、鳃、肌肉。病死鱼内脏 馄台碾感染死亡率大于各个内脏器官单独感染的平均死亡率(71石)． 附 表 病 鱼主 要 器官 组织 液人 工感 染结 果 Attachedt~ble Infectedresultofmajororgansstissuesofgrassearp w ithhemorrhage 器 官 { 心 肝 鳃 肌肉 脾 肾 晒 菁 嵩 病 死 尾数 10 15 8 3 10 21 24 28 0 病 死 率 (巧 ) 56 65 85 11 59 78 96 85 0 早期在制备组织疫苗时考虑到肠道 内含物较复杂，可能含有多种致病菌而舍弃。我们的试验表明 经 双抗处理后 健康草鱼内脏组织匀浆浓(包括肠组织)并无感染性 ，而病死鱼肠遭组织感染力高于其它 组 织 ， 瞳此制 备组织 疫苗 时可 将 病鱼 肠 道组 织作 为疫苗 的材 料 。我 们 曾按常 规 方法从 病 死鱼 肌肉 组 织中分离病毒 ，未获成功 ，但感染实验表明肌肉组织仍具有一定的感染性 ，其相对台病毒量较低。作为普 通组织疫苗 ，考虑到肌肉组织在鱼体 中占有很大的比例，可以将肌肉作为材料 ，但要制备高效价的组织 疫 苗或 从病 鱼 中分 离 提纯病 毒 ，则应放 弃 肌肉 组织 。 以前的研 究已证 实鱼呼 肠 孤病毒 是草 鱼出 血病 的病原 “ 。其 它 感染动 物 和人 的呼 肠 孤病毒 一 般 在 宿主 的 呼吸 道耗 肠道 中都 存在 C11~我 们 首次在 病 鱼肠 道中观 察到 病毒 颗 粒 ，并经 感 染试验证 实 其 感 荣 力 高于其 它组 织 。超薄 切片 蹰察 与 感染结 果 相吻 古。 这表 明，不仅 肾脏 是 鱼呼 肠孤 病毒 侵袅 的 靶 器 官 ，肠道同样是侵 袭的重要器官，这符台呼肠孤病毒对宿主组织的嗜性。但在鱼呼吸器官的鳃组织切片 中未观察到病毒粒子 ，鳃组织匀浆液的感染力较低 ，由此可 以认为肠道和肾脏是鱼呼肠孤病毒的主要增 殖 场所 。 早 期在 病死 鱼肾 组织 细胞 核 内观察 到未成 熟 病毒 颗粒 ，在 细胞 质 内观 察到成 熟 病毒粒 子 。 。怛在 以后的人工感染鱼肾单层绍胞的超薄切片中，仅在细胞质 内观察到病毒颗粒 ，而在细胞核内没有发现 - Jokllk认为 ：呼 肠 孤病毒 增殖 的最 主要 特征 是在 细胞 质 中进 行 复制 、生 物台成 及 装 配 等 垒 过 程 ，与 DNA病毒不同 这类 I A 病毒蜡殖的任一阶段都不在细胞桉 内进行 c81~在我们的超薄切片中．在骑 遭和 肾脏组织的细胞 棱中没有发现病毒。如果在细胞桉中观察到病毒 ，那么就有理由怀疑谖病毒 是 否 是呼肠孤病毒；如 果该病毒 是呼肠孤腐毒 ，推测在细胞棱 内看到的病毒可能是细胞棱膜破裂或溶解后从 细胞质进入棱内．草鱼出血病病毒在宿主细胞 内的活动还有待于进一步研究。 本次实验观察到的病毒颗粒大小与中国科学院水生生物研究所报道的结果相近”，而比我所原分离 到 的病毒 颗粒 (直 径 55．5±3rim )要大 。 我们 认为 ，不 同地 区分 离到的 草鱼 出 血病病 毒在 形态 大小 及 基 因结构 上存在 差 异 ，这一 点 ，还 需进 一 步证 实 。 参 考 文 蘸 【1】 啐国 医 学科学 院 流行 病防治 研究所 ，1978。常 见病 毒病 实验技 术 ，888- 841。科 学出 版社 ，北京 ￡2 中国科学院水生生物研究所 ，1978。草鱼出血病宿原的研究 ，水生生物学巢干u．8(8)：52；-~o。 【8】 中 国科学 院永生 生 物研 究所 ，1980。 草鱼 出血病 病原 的研 究II，电镜疆 寨。水 生生物 学集 刊 ，7(1)：75一 。 【4] 中 国科学 院武 汉 宿毒研 究所 、中一国水产 科学 院长讧 水产 研 究所抄 市特 所草 鱼 出血 病1办作 组 ，19黯 。草鱼 出血 病病毒的电子显截镜观察初报。淡水渔业，(8)：89—4o。 维普资讯 http://www.cqvip.com