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GB4789.10-2010 入三块Baird-Parker平板,然后用无菌L棒涂布整个平板,注意不要触及平板边缘。使用前,如Baird-Parker 平板表面有水珠,可放在25℃一50℃的培养箱里干燥,直到平板表面的水珠消失。 8.3培养 8.3.1.1在通常情况下,涂布后,将平板静置10mi,如样液不易吸收,可将平板放在培养箱36℃±1 ℃培养1h:等样品匀液吸收后翻转平皿,倒置于培养箱,36℃±1℃培养,45h~48h。 8.4典型菌落计数和确认 8.4.1金黄色葡萄球菌在Baird--Parker平板上,菌落直径为 mm 3mm,颜色呈灰色到黑色,边缘为 淡色,周用为一混浊带,在其外层有一透明圈。用接种针接触南落有似奶油至树胶样的硬度,偶然会遇 到非脂肪溶解的类似菌落:但无混浊带及透明圈。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌 落所产生的黑色较淡些,外观可能知精并干燥。 8.4.2选择有典型的金黄色葡萄球菌菌落的平板,且同一稀释度3个平板所有菌落数合计在20C℉U入 200CFU之间的平板,计数典型菌落数。如果: a)只有一个稀释度平板的菌落数在20C℉U~200C℉U之间且有典型菌落,计数该稀释度平板上的 典型茵落: b)最低稀释度平板的菌落数小于20C℉U且有典型菌落,计数该稀释度平板上的典型菌落 c)某一稀释度平板的菌落数大于200C℉U且有典型菌落,但下一稀释度平板上没有典型茵落, 应计数该稀释度平板上的典型南落: d)某一稀释度平板的菌落数大于200CFU且有典型南落,且下一稀释度平板上有典型菌落,但 其平板上的南落数不在20C℉U~200CFU之间,应计数该稀释度平板上的典型南落: 以上按公式(1)计算 e)2个连续稀释度的平板南落数均在20CFU-200CFU之间,按公式(2)计算。 8.4.3从典型菌落中任选5个菌落(小于5个全选),分别按5.3.2做血浆凝爾试验。 9结果计算: 公式(1): T=AB d 式中: 了—样品中金黄色葡萄球茵菌落数 一某一稀释度典型菌落的总数: 一某一稀释度血浆凝周酶阳性的菌落数 -某一稀释度用于血浆凝固酶试验的菌落数: d一稀释因子。 公式(2): T-AIBV/C1+42B2/C2 1.ld 式中 T- -样品中金黄色葡萄球菌菌落数: A1一第一稀释度(低稀释倍数)典型菌落的总数: 42一第二稀释度(高稀释倍数)典型菌落的总数: B1一第一稀释度(低稀释倍数)血浆凝固酶阳性的菌落数: 6GB 4789.10—2010 6 入三块Baird-Parker平板,然后用无菌L棒涂布整个平板,注意不要触及平板边缘。使用前,如Baird-Parker 平板表面有水珠,可放在 25 ℃~50 ℃的培养箱里干燥,直到平板表面的水珠消失。 8.3 培养 8.3.1.1 在通常情况下,涂布后,将平板静置 10 min,如样液不易吸收,可将平板放在培养箱 36 ℃±1 ℃培养 1 h;等样品匀液吸收后翻转平皿,倒置于培养箱,36 ℃±1 ℃培养,45 h~48 h。 8.4 典型菌落计数和确认 8.4.1 金黄色葡萄球菌在 Baird-Parker 平板上,菌落直径为 2 mm~3 mm,颜色呈灰色到黑色,边缘为 淡色,周围为一混浊带,在其外层有一透明圈。用接种针接触菌落有似奶油至树胶样的硬度,偶然会遇 到非脂肪溶解的类似菌落;但无混浊带及透明圈。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌 落所产生的黑色较淡些,外观可能粗糙并干燥。 8.4.2 选择有典型的金黄色葡萄球菌菌落的平板,且同一稀释度 3 个平板所有菌落数合计在 20 CFU~ 200 CFU 之间的平板,计数典型菌落数。如果: a)只有一个稀释度平板的菌落数在20 CFU~200 CFU之间且有典型菌落,计数该稀释度平板上的 典型菌落; b) 最低稀释度平板的菌落数小于 20 CFU 且有典型菌落,计数该稀释度平板上的典型菌落; c) 某一稀释度平板的菌落数大于 200 CFU 且有典型菌落,但下一稀释度平板上没有典型菌落, 应计数该稀释度平板上的典型菌落; d) 某一稀释度平板的菌落数大于 200 CFU 且有典型菌落,且下一稀释度平板上有典型菌落,但 其平板上的菌落数不在 20 CFU~200 CFU 之间,应计数该稀释度平板上的典型菌落; 以上按公式(1)计算。 e) 2 个连续稀释度的平板菌落数均在 20 CFU~200 CFU 之间,按公式(2)计算。 8.4.3 从典型菌落中任选 5 个菌落(小于 5 个全选),分别按 5.3.2 做血浆凝固酶试验。 9 结果计算: 公式(1): Cd AB T = ………………………………………………………………… (1) 式中: T——样品中金黄色葡萄球菌菌落数; A——某一稀释度典型菌落的总数; B——某一稀释度血浆凝固酶阳性的菌落数; C——某一稀释度用于血浆凝固酶试验的菌落数; d——稀释因子。 公式(2): ………………………(2) 式中: T ——样品中金黄色葡萄球菌菌落数; A1——第一稀释度(低稀释倍数)典型菌落的总数; A2——第二稀释度(高稀释倍数)典型菌落的总数; B1——第一稀释度(低稀释倍数)血浆凝固酶阳性的菌落数; d A B C A B C T 1.1 1 1 1+ 2 2 2 =
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