多肽结构测定工作步骤如下: 1.测定分子量 2.氨基酸的定量分析 。氢基酸析法分各种氨基酸一→各种氨基酸的含量 现代方法是将水解后的氨基酸混和液用氨基酸分析仪进行分离 和测定。 3.端基分析(测定N端和C端) (1)测定N端(有两种方法) A.24-二硝基氟苯法桑格尔 Sanger-英国人)法 2.4-二硝基氟苯与氨基酸的N端氨基反应后,再水解,分离除N 二硝基苯基氨基酸,用色谱法分析,即可知道N端为何氨基酸 O2N=_y-F+ H2N-CH-CONH-CH-CONH Naco. NO 2 R R HCI O2N HHN-CH-CONH-CH-CONH NO2 R R O2N HHN-CH-COOH+H2N-CH-CO0H N○2R R多肽结构测定工作步骤如下： 1．测定分子量 2．氨基酸的定量分析 现代方法是将水解后的氨基酸混和液用氨基酸分析仪进行分离 和测定。 HCl H2O 多肽 氨基酸 层析法分离 各种氨基酸 各种氨基酸的含量 3．端基分析（测定N端和C端） （1）测定N端（有两种方法） A. 2,4-二硝基氟苯法——桑格尔(Sanger-英国人)法 2,4- 二 硝基氟苯与氨基酸的N端氨基反应后，再水解，分离除N- 二硝基苯基氨基酸，用色谱法分析，即可知道N端为何氨基酸。 O2N F H2N CH R CONH CH R' CONH …… + … O2N HN CH R CONH CH R' CONH … NO2 NO2 Na2CO3 HCl O2N HN CH R COOH NO2 CH R' + H2N COOH +