是工业生产核糖核酸的关键。 菌种的活化及扩大培养 (一)菌种与材料: l.菌种:丹麦啤酒酵母菌、产朊假丝酵母菌等 2.培养基:麦芽汁培养基 麦芽琼脂培养基 3.器材:水浴锅、烧杯、比色盘、碘液、纱布、灭菌锅、漏斗、试管等。 (二)方珐与步骤: 1.流程:液体石蜡保藏菌种 麦芽汁培养基活化(三天) 麦芽琼脂固体培养基(一天) 2.步骤 (Ⅰ)麦芽汁的制备:干麦芽首先进行压碎。加3~4倍水,浸泡1小时,然后升温至63℃糖 化4~6小时,用1/50N碘液测定为黄色至无色。用纱布过滤,可以反夏回流,直到滤液透 明澄清为止,即为麦芽汁。分装后1公斤/厘米蒸汽灭菌15分钟备用。 2)固体斜面麦芽培养基的制备:用12巴林的麦芽汁加2%琼脂加热使溶解,然后分装于 试管中(约装四分之一),放在灭菌釜中用1公斤/厘米,121℃灭菌15分钟。灭菌后倾 斜摆斜面,然后放在30℃恒温箱中使培养基上蒸汽水逐渐干燥,再置冰箱中保存待用。 要求 (1)麦芽汁浓度应为11~12巴林,pH5以上,制成的麦芽汁应为淡黄色透明,无其它悬浮 2)斜面培养基需待表面蒸汽水干燥后,才能接种 (3)制备培养基所用水份,应用自来水较好 、摇瓶发酵条件试验 摇瓶培养的目的有二:一是寻求发酵培养基的合适配方,二是寻找最佳发酵条件。微生 物发酵法是一个受多种因素影响的工艺过程,应用一般的简单比较法很难得到满意的结果, 实验室中往往采用正交设计方法,对所研究的菌种进行试验 正交试验法是一种安排和分析试验的方法,这种方法可以通过较少的试验次数和比较简便的是工业生产核糖核酸的关键。 一、菌种的活化及扩大培养 （一）菌种与材料： ｌ．菌种：丹麦啤酒酵母菌、产朊假丝酵母菌等 ２．培养基：麦芽汁培养基 麦芽琼脂培养基 ３．器材：水浴锅、烧杯、比色盘、碘液、纱布、灭菌锅、漏斗、试管等。 （二）方珐与步骤： １．流程：液体石蜡保藏菌种 ↓ 麦芽汁培养基活化（三天） ↓ 麦芽琼脂固体培养基（一天） ２．步骤： （ｌ）麦芽汁的制备：干麦芽首先进行压碎。加3～4倍水，浸泡1小时，然后升温至63℃糖 化4～6小时，用1／50Ｎ碘液测定为黄色至无色。用纱布过滤，可以反夏回流，直到滤液透 明澄清为止，即为麦芽汁。分装后1公斤／厘米2蒸汽灭菌15分钟备用。 （２）固体斜面麦芽培养基的制备：用12巴林的麦芽汁加2％琼脂加热使溶解，然后分装于 试管中（约装四分之一），放在灭菌釜中用1公斤／厘米2，121℃灭菌１５分钟。灭菌后倾 斜摆斜面，然后放在30℃恒温箱中使培养基上蒸汽水逐渐干燥，再置冰箱中保存待用。 ３．要求： （ｌ）麦芽汁浓度应为11～12巴林，pＨ5以上，制成的麦芽汁应为淡黄色透明，无其它悬浮 物质。 （２）斜面培养基需待表面蒸汽水干燥后，才能接种。 （３）制备培养基所用水份，应用自来水较好。 二、摇瓶发酵条件试验 摇瓶培养的目的有二：一是寻求发酵培养基的合适配方，二是寻找最佳发酵条件。微生 物发酵法是一个受多种因素影响的工艺过程，应用一般的简单比较法很难得到满意的结果， 实验室中往往采用正交设计方法，对所研究的菌种进行试验。 正交试验法是一种安排和分析试验的方法，这种方法可以通过较少的试验次数和比较简便的