时后即可完全消退至无色。TB的终止液有多种，叠氮钠和十二烷基硫酸钠(SDS)等酶抑制剂均可 使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间(12-24小时)不褪，是目视判断的良好终止剂。 此外，各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色，此时可用特定的波长(450m)测读吸光值。 4.6.2比色 比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体，然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。以软 板为载体的试验，需先将板置于标准96孔的座架中，才可进行比色。最好在加底物液显色前，先将 软板边缘剪净，这样，此板就可完全平妥坐入座架中。 比色时应先以蒸馏水校零点，测读底物孔（未经任何反应仅加底物液的孔）和空白孔（以生理盐水 或稀释液代替标本作全过程的孔)，以记录本次试验的试剂状况。其后可用空白孔以蒸馏水校零点， 以上各孔的吸光度需减去空白孔的吸光度，然后进行计算。 比色结果的表达以往通用光密度(oplical density,OD),现按规定用吸光度(absorbence,A), 两者含义相同。通常的表示方法是，将吸收波长写于A字母的右下角，如OD的吸收波长为492m, 表示方法为"A492nm"或“0D492nm”。 4.6.3酶标比色仪 酶标比色仪简称酶标仪，通常指专用于测读LSA结果吸光度的光度计。针对固相载体形式的不同， 各有特制的适用于板、珠和小试管的设计。许多试剂公司配套供应酶标仪。酶标仪的主要性能指标 有：测读速度、读数的准确性、重复性、精确度和可测范用、线性等等。优良的酶标仪的读数一般 可精确到0.001，准确性为士1%，重复性达0.5%。举例说，若某孔测得的A值为1.083，则该孔相 对于空气的真实A值应为1.083±0.01(1.0731.093)，重复测定数次，其A值均应1.083±0.05 (1.0781.088)在之间。酶标仪的可测范围视各酶标仪的性能而不同.普通的酶标仪在0.0002.000， 新型号的酶标仪上限拓宽达2.900，甚至更高。超出可测上限的A值常以“*或“ovr“或其它符号表 示。应注意可测范围与线性范围的不同，线性范围常小于可测范围，比如某一酶标仪的可测范围为 0.0002.900,而其线性范围仅0.0002.000，这在定量ELISA中制作标准曲线时应予注意。 酶标仪不应安置在阳光或强光照射下，操作时室温宜在1530℃，使用前先预热仪器 15-30分钟，测读结果更稳定。 测读A值时，要选用产物的敏感吸收峰，如0心用492m波长。有的酶标仪可用双波长式测读，即 每孔先后测读两次，第一次在最适波长(W1),第二次在不敏感波长(W2),两次测定间不移动LIS 板的位置。例如0PD用492nm为W1,630nm为2，最终测得的A值为两者之差(W1-2)。双波长式 测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。 各种醇标仪性能有所不同，使用中应详细新闻记者说明书。时后即可完全消退至无色。TMB 的终止液有多种，叠氮钠和十二烷基硫酸钠（SDS）等酶抑制剂均可 使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间（12-24 小时）不褪，是目视判断的良好终止剂。 此外，各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色，此时可用特定的波长（450nm）测读吸光值。 4.6.2 比色 比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体，然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。以软 板为载体的试验，需先将板置于标准 96 孔的座架中，才可进行比色。最好在加底物液显色前，先将 软板边缘剪净，这样，此板就可完全平妥坐入座架中。 比色时应先以蒸馏水校零点，测读底物孔（未经任何反应仅加底物液的孔）和空白孔（以生理盐水 或稀释液代替标本作全过程的孔），以记录本次试验的试剂状况。其后可用空白孔以蒸馏水校零点， 以上各孔的吸光度需减去空白孔的吸光度，然后进行计算。 比色结果的表达以往通用光密度（oplical density，OD），现按规定用吸光度（absorbence，A）， 两者含义相同。通常的表示方法是，将吸收波长写于 A 字母的右下角，如 OPD 的吸收波长为 492nm， 表示方法为"A492nm"或"OD492nm"。 4.6.3 酶标比色仪 酶标比色仪简称酶标仪，通常指专用于测读 ELISA 结果吸光度的光度计。针对固相载体形式的不同， 各有特制的适用于板、珠和小试管的设计。许多试剂公司配套供应酶标仪。酶标仪的主要性能指标 有：测读速度、读数的准确性、重复性、精确度和可测范围、线性等等。优良的酶标仪的读数一般 可精确到 0.001，准确性为±1%，重复性达 0.5%。举例说，若某孔测得的 A 值为 1.083，则该孔相 对于空气的真实 A 值应为 1.083±0.01(1.073~1.093），重复测定数次，其 A 值均应 1.083±0.05 （1.078~1.088）在之间。酶标仪的可测范围视各酶标仪的性能而不同。普通的酶标仪在 0.000~2.000， 新型号的酶标仪上限拓宽达 2.900，甚至更高。超出可测上限的 A 值常以"*"或"over"或其它符号表 示。应注意可测范围与线性范围的不同，线性范围常小于可测范围，比如某一酶标仪的可测范围为 0.000~2.900，而其线性范围仅 0.000~2.000，这在定量 ELISA 中制作标准曲线时应予注意。 酶标仪不应安置在阳光或强光照射下，操作时室温宜在 15~30℃，使用前先预热仪器 15-30 分钟，测读结果更稳定。 测读 A 值时，要选用产物的敏感吸收峰，如 OPD 用 492nm 波长。有的酶标仪可用双波长式测读，即 每孔先后测读两次，第一次在最适波长（W1），第二次在不敏感波长（W2），两次测定间不移动 ELISA 板的位置。例如 OPD 用 492nm 为 W1，630nm 为 W2，最终测得的 A 值为两者之差（W1-W2）。双波长式 测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。 各种酶标仪性能有所不同，使用中应详细新闻记者说明书