Ⅱ.质粒DNA的电泳检测 一实验目的 学习并掌握琼脂糖凝胶电泳检测DNA的技术。 二实验材料 琼脂糖，TAE缓冲液，加样缓冲液，溴化乙锭(EB),标准分子量Marker 电泳仪、稳压电源、凝胶电泳成像仪等 三实验原理 琼脂糖电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、鉴定和纯化D八NA片段的有效方法。琼脂糖 凝胶的分辨能力要比聚丙烯酰胺凝胶低，但其分离范围较广。用各种浓度的琼脂糖凝胶可分 离长度20Obp50kb的DNA.。琼脂糖凝胶通常采用水平装置在强度和方向恒定的电场下电 泳。直接用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙锭进行染色，可确定DNA在凝胶中的位置。 四实验内容 对所提取的质粒DNA样品进行电泳检测 五实验步骤 1.制胶（见图3） ()胶模两端用胶带封严，架好梳子备用： (2)称取0,2g的琼脂糖于100ml烧杯中，加入20mTAE,加热熔化至无颗粒状琼脂糖 冷却到60℃左右加入EB(终浓度0.5μg/ml),摇匀，即倒入胶模中凝固30min以上： (3)临用前，撕去封口胶带，放入电泳槽中，倒入适量的电泳缓冲液TAE(淹过胶面)， 拔取梳子备用。 2.样品准备 取已提取好的质粒DNA5ul于500ul指管中，加入1ul的加样缓冲液，混匀： 3.电泳 ()将样品和5标准分子质量分别点样到梳孔中：Ⅱ. 质粒 DNA 的电泳检测 一 实验目的 学习并掌握琼脂糖凝胶电泳检测 DNA 的技术。 二 实验材料 琼脂糖，TAE 缓冲液，加样缓冲液，溴化乙锭（EB），标准分子量 Marker 电泳仪、稳压电源、凝胶电泳成像仪等 三 实验原理 琼脂糖电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳是分离、鉴定和纯化 DNA 片段的有效方法。琼脂糖 凝胶的分辨能力要比聚丙烯酰胺凝胶低，但其分离范围较广。用各种浓度的琼脂糖凝胶可分 离长度 200bp~50kb 的 DNA.。琼脂糖凝胶通常采用水平装置在强度和方向恒定的电场下电 泳。直接用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙锭进行染色，可确定 DNA 在凝胶中的位置。 四 实验内容 对所提取的质粒 DNA 样品进行电泳检测。 五 实验步骤 1. 制胶（见图 3） (1) 胶模两端用胶带封严，架好梳子备用； (2) 称取 0.2g 的琼脂糖于 100ml 烧杯中，加入 20mlTAE，加热熔化至无颗粒状琼脂糖， 冷却到 60℃左右加入 EB（终浓度 0.5g/ml），摇匀，即倒入胶模中凝固 30min 以上； (3) 临用前，撕去封口胶带，放入电泳槽中，倒入适量的电泳缓冲液 TAE（淹过胶面）， 拔取梳子备用。 2. 样品准备 取已提取好的质粒 DNA 5l 于 500l 指管中，加入 1l 的加样缓冲液，混匀； 3. 电泳 (1) 将样品和 5l 标准分子质量分别点样到梳孔中；