2.质粒DNA的限制性内切酶的双酶切 注意 Buffer 4 2 pl 1.加样顺序 EcoR I(16 U/pl) 2.保证每样试剂加入反应体系 Cla I(10 U/ pl) 3.乙酰化BSA可不加 dd h o 6ul 4.加样完成后需混匀,短暂离心质粒DNA 10u 5.反应结束后需短暂离心后加凝 20l 胶加样缓冲液 混匀后短暂离心,37℃水浴1小时 6.及时将酶放回20℃冰箱以保 证酶的活力 17