分光光度法测定甲基红电离常数 页码，2/4 =520nm与入2=430nm处出峰。此处测得的吸光度对该物质十分灵敏，其他物质的干扰吸收则 很小。 根据朗白一比耳(Lambert--Beer)定律，溶液对某单色光的吸光度A、溶液浓度c、吸收池厚度b 等服从如下关系 A=lg /=kcb=Kc 式中，与分别为该波长单色光的入射强度与透射强度，1，称为透光度，以T表示。当吸收池厚度 b一定时吸光度与溶液浓度成正比。K称为吸光系数，它与光波波长、吸光物质有关。吸光度有加和 性，当溶液中含有多种组分时，总吸光度等于各组分吸光度之和。现溶液中HMR和MR~的浓度分 别为CHR和Csm,A,和A2为在波长和入2下测得的总吸光度，则 A=K1MMIRCIR +KAC A2=K,nnCR+K2rCR CA A.K.IR-AK 解联立方程得： Cma AK:r A K u 解出CR并测得pH值，可得pK。· 吸光系数K的确定。因K与吸光物质和光的波长有关，故确定吸光系数应固定波长（通常选择出 现吸收峰时的波长)和采用纯净的被测物质。例如测HMR的吸光系数，溶液的酸度应为pH=2,此 时几乎全是HMR:而pH=8时溶液中几平全是MR。具体测定方法是配制不同浓度的被测物质溶 液，在确定的波长下测吸光度，作吸光度一浓度曲线，所得直线斜率即为吸光系数。 因pK。随温度变化很小，故本实验可在室温下进行 三.仪器与试剂 722型分光光度计(1台)：pHS-3C酸度计(1台)：100ml容最瓶(7支)；50ml烧杯(6支)： 10ml移液管(4支)：50ml量筒(4台)：甲基红溶液（公用）。 (1)贮备溶液一1g甲基红品体溶于300ml95%乙醇中，过滤，用纯水稀释至500ml. (2)标准溶液 一取4ml贮备溶液加50ml95%乙醇，用纯水稀释至100ml。 NaAc溶液0.04molL(公用)：NaAc溶液0.01molL(公用)：HAc溶液0.02molL(公用)： HC1溶液0.01moL(公用)：HCI溶液0.1 mol/L(公用)。 以上溶液都不必准确配制，取液可用量筒。 四.实验步骤 1.722型分光光度计的调节和使用 fi】 //E:\whsy\whsy09.htm 2008-4-22＝520nm与 430nm处出峰。此处测得的吸光度对该物质十分灵敏，其他物质的干扰吸收则 很小。 根据朗白－比耳（Lambert-Beer）定律，溶液对某单色光的吸光度A、溶液浓度c、吸收池厚度b 等服从如下关系： A=lg =kcb=Kc 式中，I 0与I分别为该波长单色光的入射强度与透射强度， 称为透光度，以T表示。当吸收池厚度 b一定时吸光度与溶液浓度成正比。K称为吸光系数，它与光波波长、吸光物质有关。吸光度有加和 性，当溶液中含有多种组分时，总吸光度等于各组分吸光度之和。现溶液中HMR和M 的浓度分 别为 和 ，A1和A2为在波长 和 下测得的总吸光度，则 A1＝ A2＝ 解联立方程得: 解出 并测得pH值，可得 。 吸光系数K的确定。因K与吸光物质和光的波长有关，故确定吸光系数应固定波长（通常选择出 现吸收峰时的波长）和采用纯净的被测物质。例如测HMR的吸光系数，溶液的酸度应为pH=2，此 时几乎全是HMR；而pH=8时溶液中几乎全是M 。具体测定方法是配制不同浓度的被测物质溶 液，在确定的波长下测吸光度，作吸光度－浓度曲线，所得直线斜率即为吸光系数。 因 随温度变化很小，故本实验可在室温下进行。 三．仪器与试剂 722型分光光度计（1台）；pHS-3C酸度计（1台）；100ml容量瓶（7支）；50ml烧杯（6支）； 10ml移液管（4支）；50ml量筒（4台）；甲基红溶液（公用）。 （1）贮备溶液——1g甲基红晶体溶于300ml95％乙醇中，过滤，用纯水稀释至500ml。 （2）标准溶液——取4ml贮备溶液加50ml95％乙醇，用纯水稀释至100ml。 NaAc溶液0.04mol/L（公用）；NaAc溶液0.01mol/L（公用）；HAc溶液0.02mol/L（公用）； HCl溶液0.01mol/L（公用）；HCl溶液0.1mol/L（公用）。 以上溶液都不必准确配制，取液可用量筒。 四．实验步骤 1．722型分光光度计的调节和使用 λ2 = I I 0 0 I I − R HMR c − MR c λ1 λ2 + − − HMR HMR MR MR K c K c 1, 1, + − − HMR HMR MR MR K c K c 2, 2, − − − − − = MR MR HMR HMR HMR MR A K A K A K A K c c 1 2, 2 1, 2 1, 1 2, HMR MR c c − pKc − R pKc 分光光度法测定甲基红电离常数 页码，2/4 file://E:\whsy\whsy09.htm 2008-4-22