DNA浓度及纯度检测 得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素 有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯 度 DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50μg/m双链 DNA、40μg/m单链DNA。 oD260/○D280比值应为1.7-19,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用 ddH2O,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度 琼脂糖凝胶电泳 1、配置琼脂糖凝胶(1%)(以配置100m琼脂糖凝胶为例) 1)称取1g琼脂糖,倒入锥形瓶中; 2)加10om1κAE,摇晃均匀,放入微波炉中加热至琼脂糖完全溶解 (其间可取出锥形瓶摇几次,以促进琼脂糖溶解); 3)取出锥形瓶,待瓶身温度降至50度左右时(不烫手),加入1-2u 荧光染料,摇匀 4)倒入制胶板中,插上梳子,待其凝固。 2、电泳 1)从胶板上取下凝胶,在1*TAE中浸泡使胶孔中充满1*TAE(可直接在DNA浓度及纯度检测 得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素 有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯 度。 DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相当于大约50 μg/ml双链 DNA、40 μg/ml单链DNA。 OD260/OD280比值应为1.7-1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用 ddH2O，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度 低。 琼脂糖凝胶电泳 1、配置琼脂糖凝胶（1%）（以配置 100ml 琼脂糖凝胶为例） 1) 称取 1g 琼脂糖，倒入锥形瓶中； 2）加 100ml 1*TAE，摇晃均匀，放入微波炉中加热至琼脂糖完全溶解 （其间可取出锥形瓶摇几次，以促进琼脂糖溶解）； 3）取出锥形瓶，待瓶身温度降至 50 度左右时（不烫手），加入 1-2ul 荧光染料，摇匀； 4）倒入制胶板中，插上梳子，待其凝固。 2、电泳 1）从胶板上取下凝胶，在 1*TAE 中浸泡使胶孔中充满 1*TAE（可直接在