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6向吸附柱CR2中加入500μ缓冲液GD(使用前请先检查是否已加入无水乙 醇),12,000rpm(-13400×g)离心30sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CR2 放回收集管中。 7.向吸附柱CR2中加入600山漂洗液PW使用前请先检查是否已加入无水 乙醇),12,000rpm(-13400×g)离心30sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CR 放回收集管 8.重复操作步骤7。 9.12000rpm(-13400×g)离心2min,倒掉废液。将吸附柱CR2室温放置数 分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。 注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的残留 会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。 10.将吸附柱CR2转入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加 20-50山洗脱缓冲液TB,室温放置2-5min,12000pm(-13400×g)离心2mn。 注意:洗脱缓冲液体积不应少于20以,体积过小影响回收效率。为增加基因 组DNA的得率,可将离心得到的溶液再加入吸附柱CR2中,室温放置2min, 12,000rpm(-13,400×g)离心2min。洗脱液的pH对于洗脱效率有很大影响。若 用dH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-85范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效 率;且DNA产物应保存在-20°C,以防DNA降解。6.向吸附柱CR2中加入500 μl缓冲液GD(使用前请先检查是否已加入无水乙 醇),12,000 rpm (~13,400×g)离心30 sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CR2 放回收集管中。 7. 向吸附柱CR2中加入600 μl 漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水 乙醇),12,000 rpm (~13,400×g)离心30 sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱CR2 放回收集管。 8. 重复操作步骤7。 9. 12,000 rpm (~13,400×g)离心2 min,倒掉废液。将吸附柱CR2室温放置数 分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。 注意: 这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的残留 会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。 10. 将吸附柱CR2转入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加 20-50 μl 洗脱缓冲液TB,室温放置2-5 min,12,000 rpm (~13,400×g)离心2 min。 注意:洗脱缓冲液体积不应少于20 μl,体积过小影响回收效率。为增加基因 组DNA的得率,可将离心得到的溶液再加入吸附柱CR2中,室温放置2 min, 12,000 rpm (~13,400×g)离心2 min。洗脱液的pH对于洗脱效率有很大影响。若 用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效 率;且DNA产物应保存 在-20°C,以防DNA降解
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