Q(反应物的消耗量或生成物的生成量) t^°V恒定 toV×to一反应初速度时间 结论:酶催化反应必须在反应初速度时间内,选择最适温度、最适PH,饱合底物浓度的 条件下才能达到最大反应速度,即此时酶的活力最大。对于测定酶活力时,只有这样才能消 除诸多因素的影响,比较各种酶活力的大小。(最大活力、可比性)。 3.什么是酶的活力 酶催化底物进行反应的本领。酶催化底物反应在一定时间内生成物越多或消耗的反应物 量越大,则催化速度越快,活力越高。 蛋白酶的活力定义:在一定温度、PH值条件下,1g酶粉或lm酶液,每分钟催化水解 酪蛋白(或血红蛋白)所产生的酪氨酸的微克数,称为酶的活力。 表示为:单位/或单位/ml。通常人们爱讲多少个单位。如一般出厂酶活力为5万单位, 即:50000gg=005g酪氨酸/lg酶粉。 4.测定意义 制革生产中,蛋白酶主要用于酶脱毛,利用酶催化作用,促使生皮毛囊及周围的蛋白质 水解而使毛脱落。目前酶法脱毛所用的酶制剂种类也比较多。根据每种酶作用的条件不同, 主要是最适PH不同而分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶 其中酸性蛋白酶可用于毛皮的软化。在制革上则主要选用中性和碱性蛋白酶来脱毛。而 这些酶在出厂后的长途运输及存放过程中,由于条件的变化、振荡、阳光等的作用,其活力 要有所改变,故在使用之前必须测定其活力,作为计算酶制剂用量的依据,以达到预期的脱 毛效果。即现测现用 二、测定原理 酶催化 1.酪蛋白 酪氨酸 条件 稳定有关条件,使酶作用底物一定时间,测定底物酪蛋白水能所产生的酪氨酸的量,在 相同条件下,所生成酪氨酸的量越多,说明酶催化水解能力越强,活力越大。 有关条件:底物浓度C反应温度T反应PH值反应时间t 措施:饱合浓度 最适温度 最适PH初速度时间内 对酶而饱合的浓度恒温水浴 缓冲溶液 在此区间 例:5370.5%酪蛋白 PH=30 10min 27090.5%酪蛋白 40℃ PH=10 10min 13980.5%酪蛋白 PH=7.5 10min 那么水解产物酪氨酸的量如何测定呢?采用分光光度法测定。福林一酚法 2.显色 福林试剂+酪氨酸 蓝色物质 福林试剂在碱性条件下,易被还原性物质还原生成蓝色络合物质(钼蓝、钨蓝的混合物) 而酪氨酸所含的酚羟基具有还原性,可在碱性条件下将福林试剂还原成蓝色物质。蓝色的深 浅与酪氨酸的多少成正比。那么蓝色的深浅如何确定呢?通常是通过比色测其消光度来确 HO<○>-CH2-CH-COOH (酪氨酸) NH2 3.朗伯-比尔定律及其应用Q（反应物的消耗量或生成物的生成量） t↗ to V 恒定 to↗ V ↙ to—反应初速度时间 t to 结论：酶催化反应必须在反应初速度时间内，选择最适温度、最适 PH，饱合底物浓度的 条件下才能达到最大反应速度，即此时酶的活力最大。对于测定酶活力时，只有这样才能消 除诸多因素的影响，比较各种酶活力的大小。（最大活力、可比性）。 3．什么是酶的活力? 酶催化底物进行反应的本领。酶催化底物反应在一定时间内生成物越多或消耗的反应物 量越大，则催化速度越快，活力越高。 蛋白酶的活力定义：在一定温度、PH 值条件下，1g 酶粉或 1ml 酶液，每分钟催化水解 酪蛋白（或血红蛋白）所产生的酪氨酸的微克数，称为酶的活力。 表示为：单位/g 或单位/ml。通常人们爱讲多少个单位。如一般出厂酶活力为 5 万单位， 即：50000μg/g =0.05g 酪氨酸/1g 酶粉。 4．测定意义 制革生产中，蛋白酶主要用于酶脱毛，利用酶催化作用，促使生皮毛囊及周围的蛋白质 水解而使毛脱落。目前酶法脱毛所用的酶制剂种类也比较多。根据每种酶作用的条件不同， 主要是最适 PH 不同而分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶。 其中酸性蛋白酶可用于毛皮的软化。在制革上则主要选用中性和碱性蛋白酶来脱毛。而 这些酶在出厂后的长途运输及存放过程中，由于条件的变化、振荡、阳光等的作用，其活力 要有所改变，故在使用之前必须测定其活力，作为计算酶制剂用量的依据，以达到预期的脱 毛效果。即现测现用。 二、测定原理 酶催化 1．酪蛋白 酪氨酸 条件 稳定有关条件，使酶作用底物一定时间，测定底物酪蛋白水能所产生的酪氨酸的量，在 相同条件下，所生成酪氨酸的量越多，说明酶催化水解能力越强，活力越大。 有关条件：底物浓度 C 反应温度 T 反应 PH 值 反应时间 t 措施： 饱合浓度 最适温度 最适 PH 初速度时间内 对酶而饱合的浓度 恒温水浴 缓冲溶液 在此区间 例：537 0.5%酪蛋白 40℃ PH=3.0 10min 2709 0.5%酪蛋白 40℃ PH=10 10min 1398 0.5%酪蛋白 40℃ PH=7.5 10min 那么水解产物酪氨酸的量如何测定呢？采用分光光度法测定。福林—酚法。 2．显色 福林试剂 + 酪氨酸 → 蓝色物质 福林试剂在碱性条件下，易被还原性物质还原生成蓝色络合物质（钼蓝、钨蓝的混合物）。 而酪氨酸所含的酚羟基具有还原性，可在碱性条件下将福林试剂还原成蓝色物质。蓝色的深 浅与酪氨酸的多少成正比。那么蓝色的深浅如何确定呢？通常是通过比色测其消光度来确 定。 HO— —CH2—CH—COOH ∣ （酪氨酸） NH2 3．朗伯-比尔定律及其应用