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4、SCSA用于评估各种精子处理方法对其DNA完整性的影响 在辅助生殖技术中,精子洗涤、上游、梯度离心、玻璃毛过滤及冷冻保存是 个常规操作。SCSA可用于检测这些处理技术对DNA完整性的影响。Zinp1等 取了22个连续少精和不育患者的精液样品。每个样品分成3分(未处理精液 梯度离心精液和上游精液),用于SCSA分析。结果,用上游法处理后CoMPαt 与未处理精液相比明显减少,而用两层密度梯度离心处理的精液无显著性差异 (48%±12%和136%士36%与101%±23%相比,前者P<0.0001)。 Spano14 等也用SCSA评估了上游和冷冻处理后精子染色质的变异。他们的实验结果显示 处理后的精子代表一个亚群,形态上和动力学参数得到改善而且头不正常精子的 百分数减少,绿头精子的百分数增加。这个亚群染色质结构的特性得到改善 精子细胞具有最好的结构和功能并显示最佳的受精能力。但是常用方法冷冻保 存后整个精子质量恶化,只有在经过一次上游法处理后染色质质量才会得到改善 arson等还用SCSA比较了玻璃毛过滤和密度梯度离心对精子染色质结构的影 响,发现玻璃毛过滤能使染色质的完整性(SDDF)和活力得到改善而密度梯度 离心只是在精子的运动性形态学方面优于玻璃毛过滤。这些数据提示我们重新检 查精子处理方法,选择最佳的组合。l6 三、技术优缺点 1、SCSA的优点 sCSA快速简便,费用低。在精液样本解冻后,SCSA分析可在五分钟内完成, 比现有的其他精子DNA完整性检测流程要快很多。 SCSA的结果稳定可靠,具有可重复性,可应用于临床。在下图的SCSA检测 报告中,可以看到%DF|参数的标准方差极低(SD=0.0),表明SCSA具有很好的 精确度以及可重复性。对5000个精子进行重复的独立实验,任何其他的男科检 测都无法做到这样的精确度。 High DNA ability Non-detectable 5587s188 ed DNA DNA Fragm DNA Fragmentation Index Patient DateMeasurement DFI SD DFI%DFI%HDS 7272113#排 5637307 49 64 6.4 561.4 304.8 64972 Mean56263059649 6.8 1.2 人精液样本的SCSA检测报告( lEvenson et a!.2002) 此外,SCSA参数作为独立于常规精液参数以外的特殊检测参数,它和精液 常规一起检查可以更全面的了解男子的生育能力,预判胚胎的发育。杨建华8 等的研究中,一位患者结婚3年,女方流产2次,第1次为人工流产,第二次原 因不明。主诉平时工作压力很大,女方第二次流产后思想负担加重,害怕再流 产,甚至出现恐惧心理,不敢再怀孕。精液常规及精子形态学检查均未发现特别4、SCSA 用于评估各种精子处理方法对其 DNA 完整性的影响 在辅助生殖技术中,精子洗涤、上游、梯度离心、玻璃毛过滤及冷冻保存是 一个常规操作。SCSA 可用于检测这些处理技术对 DNA 完整性的影响。Zinp [13]等 取了 22 个连续少精和不育患者的精液样品。每个样品分成 3 分(未处理精液、 梯度离心精液和上游精液),用于 SCSA 分析。结果,用上游法处理后 COMPαt 与未处理精液相比明显减少,而用两层密度梯度离心处理的精液无显著性差异 (4.8%±1.2%和 13.6%±3.6%与 10.1%±2.3%相比,前者 P<0.0001)。Spano [14] 等也用 SCSA 评估了上游和冷冻处理后精子染色质的变异。他们的实验结果显示 处理后的精子代表一个亚群,形态上和动力学参数得到改善而且头不正常精子的 百分数减少, 绿头精子的百分数增加。这个亚群染色质结构的特性得到改善, 精子细胞具有最 好的结构和功能并显示最佳的受精能力。但是常用方法冷冻保 存后整个精子质量恶化,只有在经过一次上游法处理后染色质质量才会得到改善。 Larson [15]等还用 SCSA 比较了玻璃毛过滤和密度梯度离心对精子染色质结构的影 响,发现玻璃毛过滤能使染色质的完整性(SD DFI)和活力得到改善而密度梯度 离心只是在精子的运动性形态学方面优于玻璃毛过滤。这些数据提示我们重新检 查精子处理方法,选择最佳的组合。[6] 三、技术优缺点 1、SCSA 的优点 SCSA 快速简便,费用低。在精液样本解冻后,SCSA 分析可在五分钟内完成, 比现有的其他精子 DNA 完整性检测流程要快很多。 SCSA 的结果稳定可靠,具有可重复性,可应用于临床。在下图的 SCSA 检测 报告中,可以看到%DFI 参数的标准方差极低(SD=0.0),表明 SCSA 具有很好的 精确度以及可重复性。对 5000 个精子进行重复的独立实验,任何其他的男科检 测都无法做到这样的精确度。 此外,SCSA 参数作为独立于常规精液参数以外的特殊检测参数,它和精液 常规一起检查可以更全面的了解男子的生育能力,预判胚胎的发育。杨建华[8] 等的研究中,一位患者结婚 3 年,女方流产 2 次,第 1 次为人工流产,第二次原 因不明。主诉平时工作压力很大,女方第二次流产后思想负担加重 , 害怕再流 产,甚至出现恐惧心理,不敢再怀孕。精液常规及精子形态学检查均未发现特别 人精液样本的 SCSA 检测报告 (Evenson et al. 2002)
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