价淄流略 000 E 0 0做 熟Q零之 表在蛋白质 蛋白质 图1-15细胞单位膜从中间层劈开示意图 3、冷冻蚀刻复型术和冷冻割断术 冷冻蚀刻复型术(tfeeze etch replica):是在透射电镜下观察组织或细胞断裂面的金属复 制膜，显示细胞微细结构的立体影像。组织块先经甘油生理盐水处理（防止形成冰晶）后投入 液氮快速冷冻，在低温下用钢刀将样品劈开，形成凹凸不平的断裂面：·100℃真空下使断裂 面的冰晶升华，暴露不平整表面；在断裂面上先后喷镀一层合金膜和碳膜，用次氯酸等组织腐 蚀掉；将反差的凸凹不平的金属复型膜置于镜下观察（图1·14）。此项技术尤适用研究生物 膜的内部结构，如从单位膜的脂质分子疏水端劈开（图1~15），经蚀刻镀膜，镜下可见质膜 断裂面复型膜结构状态（图1·16），其凹凸影像恰与实物相反。 图1-16小鼠肾近曲小管微绒毛冷冻蚀刻复型电镜像×38300 MV微绒毛EE面，PP面（白求恩医科大学尹昕、朱秀雄教授供图） 冷冻割断术(freeze cracking):是将固定组织包埋在树脂内，低温下割断，断面喷镀合 金，在扫描电镜下观察断面的立体构型。该技术适于研究组织内部微细结构的相互关系，如肝 细胞与肝血窦和胆小管的关系，肾小体的肾小囊与血管球的关系等（图1-17）。 图1－15 细胞单位膜从中间层劈开示意图 3、冷冻蚀刻复型术和冷冻割断术 冷冻蚀刻复型术（tfeeze etch replica）：是在透射电镜下观察组织或细胞断裂面的金属复 制膜，显示细胞微细结构的立体影像。组织块先经甘油生理盐水处理（防止形成冰晶）后投入 液氮快速冷冻，在低温下用钢刀将样品劈开，形成凹凸不平的断裂面：－100℃真空下使断裂 面的冰晶升华，暴露不平整表面；在断裂面上先后喷镀一层合金膜和碳膜，用次氯酸等组织腐 蚀掉；将反差的凸凹不平的金属复型膜置于镜下观察（图1－14）。此项技术尤适用研究生物 膜的内部结构，如从单位膜的脂质分子疏水端劈开（图1－15），经蚀刻镀膜，镜下可见质膜 断裂面复型膜结构状态（图1－16），其凹凸影像恰与实物相反。 图1-16小鼠肾近曲小管微绒毛冷冻蚀刻复型电镜像 ×38300 MV微绒毛 E E面，P P面（白求恩医科大学尹昕、朱秀雄教授供图） 冷冻割断术（freeze cracking）：是将固定组织包埋在树脂内，低温下割断，断面喷镀合 金，在扫描电镜下观察断面的立体构型。该技术适于研究组织内部微细结构的相互关系，如肝 细胞与肝血窦和胆小管的关系，肾小体的肾小囊与血管球的关系等（图1－17）