图1-17大鼠肾冷冻割断扫描电镜示肾小体 R肾小囊外表面，G血管球，T肾小管 (白求恩医科大学尹昕、朱秀雄教授供图 4、电镜X-射线显微分析术X-射线显微分析术(X-ray microanalysis)是研究细胞和组 织内元素的种类、分布和含量的新技术。它是利用高速电子束轰击电镜内生物标本的微小区 域，使该区所含的元素发射了一定波长的X-射线，通过检测器对X-射线进行波谱或能谱分 析，即可测定微区内元素的性质、含量和分布。如测定细胞内Na、K、Ca、Fe、P、C1等及某 些微量元素的含量和分布变化，探讨各种元素与细胞生理和病理的关系， (九)组织培养术 前述几种方法都是取人体或在体(in vivo)实验动物的组织，经固定等处理后，对已死亡 的组织进行观察研究的。组织培养(tissue culture)或称体外实验(in vitro)则是取活组织或活 细胞在体外适宜的环境中培养成活，进行实验研究。细胞在体外生存必须具有近似体内的生存 条件，如充足营养供应，合理的02与C0,比例，必要的电解质和适宜的渗透压，pH值、温度和 湿度等，还需防止微生物污染。组织培养的特点在于可用研究各种理化因子（温度、激素、药 物、毒物等)对活细胞的直接影响，并能观察记录（摄影、录像）。组织培养与前述方法结合 应用，可研究某种因素对细胞增殖、分化、代谢、运动、吞噬、分泌等影响和调节的动态过 程，以及细胞病变、癌变和逆转等机理，获得在体实验难达到的研究目的。 组织培养用液为平衡盐水及血清（小牛血清、胎盘血清等），羊水、腹水、组织浸出液等 天然培养基(natural medium)。天然培养基成分复杂，且不稳定。目前广泛应用人工合成培养 基(synthetic medium)现有多种商品供应，使用方便，但常仍需补充部分血清等。若仅用合 成培养基和已制备好的几种必须因子与激素，称此为无血清培养基(serum-free medium), 其成分和含量均是已知的，可精细研究某种因子对细胞的生物效应。 组织培养的方法甚多，常用容器有凹玻片、培养皿、培养瓶、培养板、流动小室等。取组 织块贴于瓶底进行培养，可观察从组织块生长迁移出的细胞。取胚胎某器官原基或器官的一部 分进行培养，称器官培养(organ culture)。更精细的方法是分离和纯化组织中的某种细胞， 使之贴附在瓶底形成单层细胞（图1-18），称此为细胞培养(cell culture)。首次培养的细 胞，称原代培养(primary cultrue;细胞增殖而密集再传代培养，称传代培养(subculture)。图1－17 大鼠肾冷冻割断扫描电镜示肾小体 R肾小囊外表面，G血管球，T肾小管 （白求恩医科大学尹昕、朱秀雄教授供图） 4、电镜X－射线显微分析术X－射线显微分析术（X-ray microanalysis）是研究细胞和组 织内元素的种类、分布和含量的新技术。它是利用高速电子束轰击电镜内生物标本的微小区 域，使该区所含的元素发射了一定波长的X－射线，通过检测器对X－射线进行波谱或能谱分 析，即可测定微区内元素的性质、含量和分布。如测定细胞内Na、K、Ca、Fe、P、Cl等及某 些微量元素的含量和分布变化，探讨各种元素与细胞生理和病理的关系。 （九）组织培养术 前述几种方法都是取人体或在体（in vivo）实验动物的组织，经固定等处理后，对已死亡 的组织进行观察研究的。组织培养(tissue culture)或称体外实验（in vitro）则是取活组织或活 细胞在体外适宜的环境中培养成活，进行实验研究。细胞在体外生存必须具有近似体内的生存 条件，如充足营养供应，合理的O2与CO2比例，必要的电解质和适宜的渗透压，pH值、温度和 湿度等，还需防止微生物污染。组织培养的特点在于可用研究各种理化因子（温度、激素、药 物、毒物等）对活细胞的直接影响，并能观察记录（摄影、录像）。组织培养与前述方法结合 应用，可研究某种因素对细胞增殖、分化、代谢、运动、吞噬、分泌等影响和调节的动态过 程，以及细胞病变、癌变和逆转等机理，获得在体实验难达到的研究目的。 组织培养用液为平衡盐水及血清（小牛血清、胎盘血清等），羊水、腹水、组织浸出液等 天然培养基(natural medium)。天然培养基成分复杂，且不稳定。目前广泛应用人工合成培养 基（synthetic medium）现有多种商品供应，使用方便，但常仍需补充部分血清等。若仅用合 成培养基和已制备好的几种必须因子与激素，称此为无血清培养基（serum-free medium）， 其成分和含量均是已知的，可精细研究某种因子对细胞的生物效应。 组织培养的方法甚多，常用容器有凹玻片、培养皿、培养瓶、培养板、流动小室等。取组 织块贴于瓶底进行培养，可观察从组织块生长迁移出的细胞。取胚胎某器官原基或器官的一部 分进行培养，称器官培养（organ culture）。更精细的方法是分离和纯化组织中的某种细胞， 使之贴附在瓶底形成单层细胞（图1－18），称此为细胞培养（cell culture）。首次培养的细 胞，称原代培养（primary cultrue；细胞增殖而密集再传代培养，称传代培养（subculture）