通过实验掌握电泳鉴定中药的基本理论、基本方法和基本技术。掌握常用中药电泳鉴别 的特征。 原理 电泳是一种分离和鉴定混合物中带电离子的技术。本实验是利用中药含有蛋白质带电荷 的成分，在同一电场作用下，由于各组分所带电荷的性质、电荷数目以及分子质量不同，而 泳动方向和速度不同，在一定时间内，各成分的泳动率不同，结合谱带数和染色不同达到鉴 定的目的。聚丙烯酰胺凝胶电泳是由丙烯酰胺和N,N-亚甲基双丙烯酰胺在催化剂作用下聚 合交联成三维网状结构的凝胶，并以此为支持物的电泳技术。在电泳开始阶段，由于连续 pH梯度作用，将供试品压缩成1条狭窄的区带（浓缩效应），再加上整个电泳过程中存在的 分子筛效应和电荷效应，从而提高供试品的分离效果。 仪器、材料与试剂 (1)仪器与材料 1)仪器SCR-稳压稳流电泳仪或CYYⅢ稳压稳流电泳仪，ZVS-100型垂直板电泳槽， 恒温培养箱，离心机，分析天平，扭力天平，真空干燥器，微量进样器，烧杯(100mL,500mL, 1000mL),量筒(10mL,100mL,1000mL),刻度吸管(1mL,2mL,10mL),试管，离心 管，大培养皿，玻璃注射器(5mL,10mL,20mL),剪刀，镊子，研体，滤纸，粉碎机等。 2)材料药材或粉末：苦杏仁，桃仁，蕲蛇，乌梢蛇，金钱白花蛇，小茴香，莳萝子。 (2)试剂分离胶缓冲液，分离胶贮液，浓缩胶缓冲液，浓缩胶贮液，电极缓冲液， 40%蔗糖溶液，过硫酸铵溶液，四甲基乙二胺，溴酚蓝指示剂，考马斯亮蓝染色液，脱色液 等。 操作步骤 (1)聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本方法 1)供试品液的制备取纯净的供试品约1g,加入稀释4倍的浓缩胶缓冲液（或电极缓 冲液、稀醇液等)0.5~1mL,研磨成匀浆，3500rpm离心15min,取上清液加等体积的40% 蔗糖溶液，4℃保存，供点样用。 2)电泳槽的安装垂直板电泳槽的式样很多，目前流行的是用有机玻璃做的由两个半 6⊙63 通过实验掌握电泳鉴定中药的基本理论、基本方法和基本技术。掌握常用中药电泳鉴别 的特征。 原理 电泳是一种分离和鉴定混合物中带电离子的技术。本实验是利用中药含有蛋白质带电荷 的成分，在同一电场作用下，由于各组分所带电荷的性质、电荷数目以及分子质量不同，而 泳动方向和速度不同，在一定时间内，各成分的泳动率不同，结合谱带数和染色不同达到鉴 定的目的。聚丙烯酰胺凝胶电泳是由丙烯酰胺和 N,N-亚甲基双丙烯酰胺在催化剂作用下聚 合交联成三维网状结构的凝胶，并以此为支持物的电泳技术。在电泳开始阶段，由于连续 pH 梯度作用，将供试品压缩成 1 条狭窄的区带（浓缩效应），再加上整个电泳过程中存在的 分子筛效应和电荷效应，从而提高供试品的分离效果。 仪器、材料与试剂 (1)仪器与材料 1)仪器 SCR-稳压稳流电泳仪或 CYY-Ⅲ稳压稳流电泳仪，ZVS-100 型垂直板电泳槽， 恒温培养箱，离心机，分析天平，扭力天平，真空干燥器，微量进样器，烧杯（100mL，500mL， 1000mL），量筒（10mL，100mL，1000mL），刻度吸管（1mL，2mL，10mL），试管，离心 管，大培养皿，玻璃注射器（5mL，10mL，20mL），剪刀，镊子，研钵，滤纸，粉碎机等。 2)材料 药材或粉末：苦杏仁，桃仁，蕲蛇，乌梢蛇，金钱白花蛇，小茴香，莳萝子。 （2）试剂 分离胶缓冲液，分离胶贮液，浓缩胶缓冲液，浓缩胶贮液，电极缓冲液， 40%蔗糖溶液，过硫酸铵溶液，四甲基乙二胺，溴酚蓝指示剂，考马斯亮蓝染色液，脱色液 等。 操作步骤 （1）聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本方法 1）供试品液的制备 取纯净的供试品约 1g，加入稀释 4 倍的浓缩胶缓冲液（或电极缓 冲液、稀醇液等）0.5~1mL，研磨成匀浆，3500rpm 离心 15min，取上清液加等体积的 40% 蔗糖溶液[3]，4℃保存，供点样用。 2）电泳槽的安装 垂直板电泳槽的式样很多，目前流行的是用有机玻璃做的由两个半