CH, OH H,C-Si-CI -0一 -+(CH,):SiCl -S-+HCI 担体表面DMCS 相体表面 在这种情况下，硅氯键（一S一C)的存在有可能形成氢键而具有活性：或者水解后又生成S 一O健，硅醇结构仍未能除去。此时留用甲醇洗涤，硅氯结构可能会与甲醇反应生成甲氧 基衍生物而稳定存在。担体表面尚可用六甲基二硅胺试剂处理。 担体硅烷化处理过程中，切忌存在水。水的存在会降低硅烷化的效果。有时用HMDS 处理过后，仍残留一些吸附作用点，若在DS中加入0.1%的聚乙二醇一400，这样处理 效果就更佳。 (五)色语柱的制备 要制备一根分离效能较高的色谱柱，必须在担体上涂上一层薄而均匀的液膜，再把涂好 的固定相均匀而紧密地装填到色谱柱管内。因此，固定液的涂渍和色谱柱的装填是色谱分析 重要操作技术之一。这里主要介绍填东柱 1.色谱挂管的试漏和清洗由于存放、运输等过程可能特色谱柱管沾污或损坏，使用 前应将色谱柱进行试漏与清洗。 试漏的操作方法很简单，只要将柱管全部浸入水中，将其出口堵死，人口通人氮气() 在高于使用的操作压力下，以管壁没有气泡骨出为合格。 清洗的方法，因柱管的材料不同而异： (玻璃柱管：可注入洗液浸泡两次（必要时使用温热的清洗液，效果更，然后用自米 水冲至中性 再 蒸馏水清洗。清洁的玻璃管内壁不应挂有水珠，否则还要用温热的洗液洗 涤，洗后用自来水冲至中性，再用蒸馏水清洗，烘干后备用。 (2不锈钢柱管：可用5%一10%的热碱NaOH或KOH水溶液抽洗45次，以除去内 壁的油污，然后用自来水冲至中性，再用蒸馏水清洗，烘干后备用。 。(3)已经用过的色谱柱：需要重换其固定相时，柱管也应当用相应的溶剂如乙醚、乙醇、 自来水冲至中性，然后用蒸馏水清洗，以除去柱管中的担体粉末及粘附 在管壁上的固定液膜，烘干后备用。 2.固定液的涂渍技术为在担体上涂渍一层薄膜，首先，要选好能溶解固定液的溶剂， 确保固定液完全溶解，不能有悬浮物，溶剂的本身不应造成检测器的污染：其次，由于载体 强度不高，需避免在涂渍中因搅拌或过筛损坏液膜：第三，如果载体表面或其孔中存有空气 影响固定液渗入时， 可以采用减压法，使周定液均匀涂敷在载体表面上 下面介绍几种常用的涂渍方法 (1)“常规”涂渍法：对配比大于5%以上（所谓配比，即周定液与担体的重量比）的周定 液，可用“常规”法涂渍。其方法是：将一定量的固定液放置在一蒸发皿中，加入适量的溶 剂，待固定液溶解后，再加入定量的载体。在一般实脸室的条件下，固定液可借助溶剂作用 涂敷在载体表面上。例如，10%角鲨烷固定相的制备即可采用“常规”涂渍法。在粗天平上 称取3g的角鳌烷放在蒸发皿 在通风柜中加入能保证完 浸没担体的乙醚溶剂，使3 的角鲨烷完全溶解后，再徐徐加入30g60一80目的6201载体，固定液在溶剂的作用下涂 敷在载体表面上。最后把涂渍上固定液的载体放在红外灯下轻轻搅拌，烘干并赶走溶剂。 般要求，烘干后的固定相基本上不应有溶剂气味，这样才可装入色谱柱老化后使用。 在这种情况下，硅氯键(一 Si—Cl)的存在有可能形成氢键而具有活性；或者水解后又生成 Si 一 OH 键，硅醇结构仍未能除去。此时留用甲醇洗涤，硅氯结构可能会与甲醇反应生成甲氧 基衍生物而稳定存在。担体表面尚可用六甲基二硅胺试剂处理。 担体硅烷化处理过程中，切忌存在水。水的存在会降低硅烷化的效果。有时用 HMDS 处理过后，仍残留一些吸附作用点，若在 HMDS 中加入 0.1％的聚乙二醇一 400，这样处理 效果就更佳。 (五)色谱柱的制备 要制备一根分离效能较高的色谱柱，必须在担体上涂上一层薄而均匀的液膜，再把涂好 的固定相均匀而紧密地装填到色谱柱管内。因此，固定液的涂渍和色谱柱的装填是色谱分析 重要操作技术之一。这里主要介绍填充柱。 1．色谱挂管的试漏和清洗 由于存放、运输等过程可能特色谱柱管沾污或损坏，使用 前应将色谱柱进行试漏与清洗。 试漏的操作方法很简单，只要将柱管全部浸入水中，将其出口堵死，人口通人氮气(N2) 在高于使用的操作压力下，以管壁没有气泡冒出为合格。 清洗的方法，因柱管的材料不同而异： (1)玻璃柱管；可注入洗液浸泡两次(必要时使用温热的清洗液，效果更好)，然后用自来 水冲至中性，再用蒸馏水清洗。清洁的玻璃管内壁不应挂有水珠，否则还要用温热的洗液洗 涤，洗后用自来水冲至中性，再用蒸馏水清洗，烘干后备用。 (2)不锈钢柱管：可用 5％一 10％的热碱(NaOH 或 KOH)水溶液抽洗 4—5 次，以除去内 壁的油污，然后用自来水冲至中性，再用蒸馏水清洗，烘干后备用。 (3)已经用过的色谱柱：需要重换其固定相时，柱管也应当用相应的溶剂(如乙醚、乙醇、 热碱液)依次洗涤，自来水冲至中性，然后用蒸馏水清洗，以除去柱管中的担体粉末及粘附 在管壁上的固定液膜，烘干后备用。 2．固定液的涂渍技术 为在担体上涂渍一层薄膜，首先，要选好能溶解固定液的溶剂， 确保固定液完全溶解，不能有悬浮物，溶剂的本身不应造成检测器的污染；其次，由于载体 强度不高，需避免在涂渍中因搅拌或过筛损坏液膜；第三，如果载体表面或其孔中存有空气， 影响固定液渗入时，可以采用减压法，使固定液均匀涂敷在载体表面上。 下面介绍几种常用的涂渍方法： (1)“常规”涂渍法：对配比大于 5％以上(所谓配比，即固定液与担体的重量比)的固定 液，可用“常规”法涂渍。其方法是：将一定量的固定液放置在一蒸发皿中，加入适量的溶 剂，待固定液溶解后，再加入定量的载体。在一般实验室的条件下，固定液可借助溶剂作用 涂敷在载体表面上。例如，10％角鲨烷固定相的制备即可采用“常规”涂渍法。在粗天平上 称取 3g 的角鳖烷放在蒸发皿中，在通风柜中加入能保证完全浸没担体的乙醚溶剂，使 3g 的角鲨烷完全溶解后，再徐徐加入 30 g 60 一 80 目的 6201 载体，固定液在溶剂的作用下涂 敷在载体表面上。最后把涂渍上固定液的载体放在红外灯下轻轻搅拌，烘干并赶走溶剂。一 般要求，烘干后的固定相基本上不应有溶剂气味，这样才可装入色谱柱老化后使用