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实验性质:验证性实验 实验内容:(1)制作蛋白质浓度一吸光度值(A595m)标准曲线 (2)测定样品A595m.并在标准曲线上杏找对应浓 实验目的与要求:掌握考马斯亮蓝显色法测定蛋白质浓度的方法:熟练应用分光光度计,并学习绘 制标准曲线 注意点:(1)使用分光光度计应做到两个到位和两个调零:比色皿架到位和拉杆到位:调节零位电 位器指针到“0”以及旋转光亮调节器使光密度为“0”(2)实验中所有试剂的添加按照定量分析的 要求严格操作:(3)溶液比色前必须充分混匀:(4)同一组的所有测定必须在同一台分光光度计上 进行。 实验二、氨基酸蛋白质的主要化学性质 实验性质:验证性实验 实验内容:(1)茚三酮反应 (2)双缩脲反应 (3)黄蛋白反应 (4)蛋白质中硫的鉴定 (⑤)蛋白质的盐析作用 (6)有机溶剂、生物碱以及重金属离子的沉淀作用 实验目的与要求:用实验方法验证氨基酸、蛋白质的主要化学性质,增强感性认识 注意点:(1)使用电炉加热时注意安全,远离易燃物,并防止烫伤:(2)滴加浓硝酸时注意安全。 实验三、蛋白质的两性反应及等电点测定 实验性质:验证性实验 实验内容:(1)蛋白质的两性反应 (2)愍蛋白等电点的测定 实验目的与要求:了解蛋白质的两性性质,初步学会测定蛋白质等电点的方法 注意点:(1)观察蛋白质的两性反应时应用酪蛋白的NáOH溶液:(2)酪蛋白等电点的测定使用的是 酪蛋白的醋酸钠溶液,不能对调使用。 实验四、葡聚糖凝胶色谱 实验性质:验证性实验 实验内容:应用SephadexG-50分离兰色葡聚糖2000和黄色铬酸钾 实验目的与要求:掌握葡聚糖凝胶的特性及凝胶色谱的原理和方法 注意点:()装柱要求没有纹路、没有节痕、没有气泡、柱顶平整而均匀:(2)装柱时水和胶的比 例适中,最好一次成功,如几次加胶应搅动柱表面,使凝胶颗粒悬浮后再加:(3)洗脱时时刻注意 柱床表面洗脱剂不能流干。 实验五、盘状聚丙烯胺凝胶电泳分离血清蛋白质 实验性质:综合性实验 实验内容:不连续盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白 实验目的与要求:学习聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理和操作方法,并应用于血清蛋白质的分离14 实验性质:验证性实验 实验内容:(1)制作蛋白质浓度—吸光度值(A595nm)标准曲线 (2)测定样品 A595nm,并在标准曲线上查找对应浓度 实验目的与要求:掌握考马斯亮蓝显色法测定蛋白质浓度的方法;熟练应用分光光度计,并学习绘 制标准曲线 注意点:(1)使用分光光度计应做到两个到位和两个调零:比色皿架到位和拉杆到位;调节零位电 位器指针到“0”以及旋转光亮调节器使光密度为“0”;(2)实验中所有试剂的添加按照定量分析的 要求严格操作;(3)溶液比色前必须充分混匀;(4)同一组的所有测定必须在同一台分光光度计上 进行。 实验二、氨基酸蛋白质的主要化学性质 实验性质:验证性实验 实验内容:(1)茚三酮反应 (2) 双缩脲反应 (3)黄蛋白反应 (4)蛋白质中硫的鉴定 (5)蛋白质的盐析作用 (6)有机溶剂、生物碱以及重金属离子的沉淀作用 实验目的与要求:用实验方法验证氨基酸、蛋白质的主要化学性质,增强感性认识 注意点:(1)使用电炉加热时注意安全,远离易燃物,并防止烫伤;(2)滴加浓硝酸时注意安全。 实验三、蛋白质的两性反应及等电点测定 实验性质:验证性实验 实验内容:(1)蛋白质的两性反应 (2)酪蛋白等电点的测定 实验目的与要求:了解蛋白质的两性性质,初步学会测定蛋白质等电点的方法 注意点:(1)观察蛋白质的两性反应时应用酪蛋白的 NaOH 溶液;(2)酪蛋白等电点的测定使用的是 酪蛋白的醋酸钠溶液,不能对调使用。 实验四、葡聚糖凝胶色谱 实验性质:验证性实验 实验内容:应用 SephadexG-50 分离兰色葡聚糖 2000 和黄色铬酸钾 实验目的与要求:掌握葡聚糖凝胶的特性及凝胶色谱的原理和方法 注意点:(1)装柱要求没有纹路、没有节痕、没有气泡、柱顶平整而均匀;(2)装柱时水和胶的比 例适中,最好一次成功,如几次加胶应搅动柱表面,使凝胶颗粒悬浮后再加;(3)洗脱时时刻注意 柱床表面洗脱剂不能流干。 实验五、盘状聚丙烯胺凝胶电泳分离血清蛋白质 实验性质:综合性实验 实验内容:不连续盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白 实验目的与要求:学习聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理和操作方法,并应用于血清蛋白质的分离
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