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注意点:(1)聚丙烯酰胺在未聚合之前对人体有皮肤毒和神经毒性,注意安全,避免直接接触:(2)使 用电泳仪和电泳槽时注意用电安全:(3)上下槽电泳缓冲液单独放置,切勿混合。 实验六、酵母RNA的提取和鉴定 实验性质:综合性实验 实验内容:(1)酵母RNA的提取 (2)RNA的鉴定 实验目的与要求:掌握提取RNA的方法和RNA组成成分的鉴定方法,学习和掌握离心机的使用方法 注意点:(1)从酵母中提取NA时注意避免温度在20℃-70C间停留时间太长:(2)RNA提取时用无 水乙醚,所用量取的量筒必须干燥:(3)使用离心机时注意严格对称平衡,缓慢调节转速,待完全 静止后方可取出样品。 实验七、核酸的定量测定 实验性质:综合性实验 实验内容:(1)消化炉的使用 (2)定磷法测定RNA的含量 实验目的与要求:掌握A含量的定磷法测定,学习和掌握消化炉的使用方法 注意点:(1)NA样品消化时注意通风,并注意消化炉的使用安全:(2)分光光度法测定总磷与无 机磷时注意各空白对照不可混淆 实验八、液化型淀粉酶活性测定 实验性质:哈证性实哈 实验内容: 以单位时间内底物的减少测定液化型淀粉酶的活力 实验日的与要求:熟悉并竿握测定液化型淀粉酶活力的原理和方法 注意点:(1)控制酶促反应的时间在2-2.5分钟之内:(2)所有试剂的量取均按照定量分析的要求 操作:(3)记时必须准确。 实验九、糖酵解中间产物磷酸丙糖的鉴定 实验性质:验证性实验 实验内容:通过碘乙酸对3一磷酸甘油醛脱氢酶抑制作用,鉴定累积的糖酵解中间产物磷酸丙糖 实验目的与要求:了解利用抑制剂来研究中间代谢的方法,进一步明确酶必需基团的概念 注意点:(1)饱和NaF溶液对机体有毒,注意避免直接接触,严禁吸入:(2)反应液应过滤直至澄 清,再进行成腙反应、对比颜色 实验教材: 1、扬州大学生物化学教研室主编《生物化学实验》,2002年 执笔:朱素娟、杨生妹、陈云、叶满红 15 注意点:(1)聚丙烯酰胺在未聚合之前对人体有皮肤毒和神经毒性,注意安全,避免直接接触;(2)使 用电泳仪和电泳槽时注意用电安全;(3)上下槽电泳缓冲液单独放置,切勿混合。 实验六、酵母 RNA 的提取和鉴定 实验性质:综合性实验 实验内容:(1)酵母 RNA 的提取 (2)RNA 的鉴定 实验目的与要求:掌握提取 RNA 的方法和 RNA 组成成分的鉴定方法,学习和掌握离心机的使用方法。 注意点:(1)从酵母中提取 RNA 时注意避免温度在 20℃-70℃间停留时间太长;(2)RNA 提取时用无 水乙醚,所用量取的量筒必须干燥;(3)使用离心机时注意严格对称平衡,缓慢调节转速,待完全 静止后方可取出样品。 实验七、核酸的定量测定 实验性质:综合性实验 实验内容:(1)消化炉的使用 (2)定磷法测定 RNA 的含量 实验目的与要求:掌握 RNA 含量的定磷法测定,学习和掌握消化炉的使用方法 注意点:(1)RNA 样品消化时注意通风,并注意消化炉的使用安全;(2)分光光度法测定总磷与无 机磷时注意各空白对照不可混淆。 实验八、液化型淀粉酶活性测定 实验性质:验证性实验 实验内容:以单位时间内底物的减少测定液化型淀粉酶的活力 实验目的与要求:熟悉并掌握测定液化型淀粉酶活力的原理和方法 注意点:(1)控制酶促反应的时间在 2-2.5 分钟之内;(2)所有试剂的量取均按照定量分析的要求 操作;(3)记时必须准确。 实验九、糖酵解中间产物磷酸丙糖的鉴定 实验性质:验证性实验 实验内容:通过碘乙酸对 3-磷酸甘油醛脱氢酶抑制作用,鉴定累积的糖酵解中间产物磷酸丙糖 实验目的与要求:了解利用抑制剂来研究中间代谢的方法,进一步明确酶必需基团的概念 注意点:(1)饱和 NaF 溶液对机体有毒,注意避免直接接触,严禁吸入;(2)反应液应过滤直至澄 清,再进行成腙反应、对比颜色。 实验教材: 1、 扬州大学生物化学教研室主编《生物化学实验》,2002 年 执笔:朱素娟、杨生妹、陈云、叶满红
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