其内容主要有两个方面：根据需要合成具有特定氨基酸行列和空间结构的蛋白质：鹅定 蛋白质化学组成、空结构与4物功施之的关系。本此基激之上。实厘从氨基酸字预器 蛋白质的空间结构和生物功能，设计合成具有特定生物功能的全新的蛋白质，这也是蛋白质 工程最根本的目你之 目丽，蛋质工程尚未有统一的定义， 般认为蛋白质工程就是通过基因重组技术改变或设计合成具有特定生物功能的蛋白 质。实际上蛋白质工程包括蛋白质的分离纯化，蛋白质结构和功能的分析、设计和预测，通 过基因重组或其它手段改造或创造蛋白质。从广义上来说，蛋白质工程是通过物理、化学 生物和基因重组等技术改造蛋白质或设计合成具有特定功能的新蛋白质 2、研究的核心内容 蛋白质结构分析蛋白质工程的核心内容之一就是收集大量的蛋白质分子结构的信息， 以便建立结构与功能之间创关系的效据年，为蛋白质结构与功能之间关系的理论研究典定基 品丛学的技术核磁共振持术 结构、功能的设计和预测 根缗对天然蛋白质结构与功能分析建立起来的数据库角 的数露，可以预测一定氨基酸序列链空结构和生物功能：反.之也可以根据特定的生物 能，设计萤日质的氨基酸子列和空间结构。 甚因组等实验分子动力学学 分子热力学 创造和改造蛋白质的改造，从荷单的物理、化学法到复杂的基因重组等等有多种方 物理、化学法：过蛋白质进行变性、复性处理，修饰蛋白质侧链官能团，分划财缝， 改变表面电荷分布促进蛋白质形成一定的立体构像等等：尘物化学法，使用蛋白选样性地 分蛋白质， 利用转甘、脂隙、酰等士除或连接不同化学基团， 利 转联 酶使蛋 质发生胶连等等.以上方法以能对阴同成似的基团成化学越发生作用，缺乏特异性，不能 针对特定的部位起作用。采用基因距组技术或人工合成DNA,不但可以改造蛋白质而具可 以实现从头合成全新的蛋白质。 3、实际成用举例 提高蛋白质的稳定性 前萄异构 G)在工业上应用广泛，为提高其热稳定性 米国萨等人布确定第138位甘氨G138为目标氨基酸后，用双引物法对G1基因进行从 外定点诱变，以刚氨酸(P和138)替代Gr138,含宽变体的匝组质数在大杆菌中表达 结果突变型G1比野生型的热半衰猢长一倍：最适反应温度提高10~12℃：悴比活相同。据 分折，Pm梦代G弘138后，可能加于引入了一个略坏，该☒挂妆好能感草充于Gv138路 近的空剂， 使蛋白质空间结构史具性，从而提高了的热稳定性 融合蛋白 啡EkN带5线形结构是与6型受 结合的基本功能区域， 扰素(FN)是一种广谱抗病毒抗肿抽的钢胞因子。黎盂枫等人化学合成了EkN端5耿编 码区，通过一连接3队编码区与人1型V基因连接，在大脂杆菌中表达了这一融合蛋白。 以体外人结脂腺绵绑胞和多形胶质痛钢胞为棋型，采用3H一胸隙酷硬核甘惨入法证明该融 合蛋白柳制肿胞生长的活性量著高于单纯的FN,通过Naloxone竞争阻实验证明， 抑制活性的 山Ek导向区介导 蛋白质活性的改变 通常饭后30一60min,人血液中岛素的含量达到高峰，120一 80mn内恢复到基础水半。而目心箭休上使用的陵岛制定时后120mn后才出现高峰月 持续180~240min,与人生理状况不符。实验表明，陵岛素在高浓度（大于10-5molL)时 以二聚体形式存在，低浓度时（小于10一m和L)时主要以道体形式存在，设计速放随岛 素原则就是避免陵岛素形成聚合体。类陵岛素生长因子一 1GF一)的结柏和性质与陵岛素 有高度的同源性和二维结构的似性，但1G下一1个形成 聚体。1GF-1的B结构 (与 素B链用对应)中B28一B29氨基酸列与顾岛素B链的B28一B29阴比，发生藏两。齿 此，将陵岛素B链改为B28Ls一B29P加，状得单体速效陕岛素。该速效胰岛素已通过临休