前tRNA的加工包括切除和碱基修饰,有些则需剪接 前tRNA的碱基约有10%需要酶促修饰,修饰有如下类型:①前tRNA3’端的U由CCA取 代:②嘌呤碱或核糖C2’的甲基化:③尿苷被还原成双氢尿苷(DH)或核苷内的转位反应 成为假尿嘧啶核苷(Tψ);④某些腺苷酸脱氨成为次黄嘌呤核苷酸(AMP→IMP)。 白mRNA转录后的加工 真核生物mRNA由RNA聚合酶II催化转录,初始产物为核不均一RNA( heterogene nuclear rna, hnrNA),新生的 hnrNA从开始形成到转录终止,就逐步与蛋白质结合形成不均 核糖核蛋白( hnRNP)颗粒,前mRNA加工的顺序是形成5’帽子结构:内切酶去除3’端的 一段序列: poly a聚合酶催化形成3’ poly A尾;最后是剪接去除内含子转变为成熟的mRNA 1.5′帽的形成: hnRNA5'端的第一个核苷酸通常为三磷酸鸟苷(5- pppGpP-),在磷酸酶 催化下去除γ-磷酸基团形成5pGpN…,经鸟苷酰转移酶催化与另一个GTP(ppG)作用生 成 Gpppgpn·,在鸟嘌呤-7-甲基转移酶作用下,以S-腺苷蛋氨酸为甲基来源,生成 m GpppgpN…再经2’甲基转移酶催化,使5’端原来的第一位,甚至第二位核苷酸的2’-0 位甲基化,形成 m gpppG n…,或 m gpppgpn 可见5’帽结构有三种形式; m Pppgpp…为帽0, m GpppG"pN…为帽1,m7Gpp"pN…为 帽2。不同真核生物的mRNA或同一生物的不同mRNA有不同的5’帽结构 2.前mRN3’端切除及加 poly A尾:除组蛋白的mNA外,真核生物的 所有mRNA都有3’ poly a尾。研究表明,由于结构基因中编码链的3’端没有 poly a序列 mRNA的 poly a尾是转录后加工形成的,其过程是:加 poly a位点上游10~35核苷酸处有 AAUAAA序列,下游约50核苷酸处有富含CU序列,这两处序列是剪切和加 poly a所需的信号。 首先由剪切和聚腺苷化特异因子( cleavage and pol yadeny lation specific factor,CPSF) 结合到上游富 AAUAAA序列,剪除刺激因子( cleavage stimulation factor,CSF)与下游富 含ωU序列作用,剪除因子Ⅰ、Ⅱ( cleavage factor,CF)相继与之结合,使其更趋稳定。 在剪除之前, poly a聚合酶结合到复合物上,使剪切后游离的3’端能迅速腺苷酸化。 poly a 的生成分二个阶段,如图13-14 3. mRNA的剪接:真核生物编码mRNA的基因是断裂基因,有外显子和内含子并共同转录 于初始转录产物中,须将转录产物中的内含子去除,并把外显子连接为成熟的mRNA分子,这8 前 tRNA 的加工包括切除和碱基修饰，有些则需剪接。 前 tRNA 的碱基约有 10%需要酶促修饰，修饰有如下类型：①前 tRNA3’端的 U 由 CCA 取 代；②嘌呤碱或核糖 C2’的甲基化；③尿苷被还原成双氢尿苷（DH）或核苷内的转位反应， 成为假尿嘧啶核苷（Tψ）；④某些腺苷酸脱氨成为次黄嘌呤核苷酸（AMP→IMP）。 ㈢ mRNA 转录后的加工 真核生物 mRNA 由 RNA 聚合酶II催化转录，初始产物为核不均一 RNA（heterogeneous nuclear RNA，hnRNA），新生的 hnRNA 从开始形成到转录终止，就逐步与蛋白质结合形成不均 一核糖核蛋白（hnRNP）颗粒，前 mRNA 加工的顺序是形成 5’帽子结构；内切酶去除 3’端的 一段序列；poly A 聚合酶催化形成 3’poly A 尾；最后是剪接去除内含子转变为成熟的 mRNA。 1．5’帽的形成：hnRNA 5’端的第一个核苷酸通常为三磷酸鸟苷（5’-pppGpN-），在磷酸酶 催化下去除γ-磷酸基团形成 5’-ppGpN···，经鸟苷酰转移酶催化与另一个 GTP（pppG）作用生 成 GpppGpN···，在鸟嘌呤-7-甲基转移酶作用下，以 S-腺苷蛋氨酸为甲基来源，生成 m 7 GpppGpN···，再经 2’甲基转移酶催化，使 5’端原来的第一位，甚至第二位核苷酸的 2’-O 位甲基化，形成 m 7 GpppGm N···，或 m 7 GpppGpm N m···。 可见 5’帽结构有三种形式；m 7 GpppGpN···为帽 0，m 7 GpppGm pN···为帽 1，m7GpppGm pNm···为 帽 2。不同真核生物的 mRNA 或同一生物的不同 mRNA 有不同的 5’帽结构。 2．前 mRNA 3’端切除及加 poly A 尾： 除组蛋白的 mRNA 外，真核生物的 所有 mRNA 都有 3’poly A 尾。研究表明，由于结构基因中编码链的 3’端没有 poly A 序列， mRNA 的 poly A 尾是转录后加工形成的，其过程是：加 poly A 位点上游 10～35 核苷酸处有 AAUAAA 序列，下游约 50 核苷酸处有富含 GU 序列，这两处序列是剪切和加 poly A 所需的信号。 首先由剪切和聚腺苷化特异因子（cleavage and polyadenylation specific factor，CPSF） 结合到上游富 AAUAAA 序列，剪除刺激因子（cleavage stimulation factor，CSF）与下游富 含 GU 序列作用，剪除因子Ⅰ、Ⅱ（cleavage factor，CF）相继与之结合，使其更趋稳定。 在剪除之前，poly A 聚合酶结合到复合物上，使剪切后游离的 3’端能迅速腺苷酸化。poly A 的生成分二个阶段，如图 13-14。 3．mRNA 的剪接： 真核生物编码 mRNA 的基因是断裂基因，有外显子和内含子并共同转录 于初始转录产物中，须将转录产物中的内含子去除，并把外显子连接为成熟的 mRNA 分子，这