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分子生物学实验报告一 实验名称二、基因DNA提取及电泳检测 专业班级: 姓名 学号: Email: 实验日期 同组者 一,实验名称:CTAB法提取条浒苔基因DNA 二,实验目的和要求 1学习和掌握CTAB方法提取基因组DNA的原理、方法和技术 2.为PCR扩增提供模板 三,实验仪器设备与材料 10叫移液枪、100叫移液枪、镊子、离心机、条浒苔、CTAB 四实验原理 CIAB法是一种快速简便的提取植物总DNA的方法,其原理是:采用机械破碎植物细 胞,然后加入CIAB分离缓冲液将DNA溶解出来,再经氯仿一异戊醇抽提除去蛋白质,最 后得到DNA 五,实验步骤 ①取新鲜条浒苔适量,用液氮快速磨成粉末 ②将粉末转移到 eppendorf管中,加入0.5 ml Lysis buffer,5℃消化过夜 ③加入82.55 NAcL及825叫CTAB56℃恒温20分钟 ④加入等体积试剂(试剂成分为酚:氯仿:异丙醇=25:24:1)12000pm离心10分钟, 取上清,转移到新的 eppendorf管中 ⑤加入等体积氯仿,12000pm离心10分钟,取上清,转移到新的 eppendorf管中 ⑥加入等体积异丙醇,轻柔地摇晃,直到看见絮状沉淀 ⑦1200pm离心15分钟,去除上清; ⑧加入0.5ml75%乙醇洗涤沉淀,6000pm离心2分钟,除去上清,小心的将管壁上残留 的液体去除 ⑨晾晒DNA5-10分钟; ⑩0用30-50uL无菌水溶解DNA 制备0.8%琼脂糖凝胶电泳检测DNA产物,取8μIDNA溶液并与1.5μ上样缓冲液混合, 用移液枪加入凝胶孔。电泳缓冲液为θ.5×TBE溶液,电泳结朿后用凝胶呈像系统观察, 并拍照记录。 六实验数据结果分析 七讨论、心得与体会,分子生物学实验报告一 实验名称:一、基因 DNA 提取及电泳检测 专业班级: 姓名: 学号: Email: 实验日期: 同组者: 一,实验名称:CTAB 法提取条浒苔基因 DNA 二,实验目的和要求: 1.学习和掌握 CTAB 方法提取基因组 DNA 的原理、方法和技术 2.为 PCR 扩增提供模板 三,实验仪器,设备与材料 10µl 移液枪、100µl 移液枪、镊子、离心机、条浒苔、CTAB 四,实验原理 CTAB 法是一种快速简便的提取植物总 DNA 的方法,其原理是:采用机械破碎植物细 胞,然后加入 CTAB 分离缓冲液将 DNA 溶解出来,再经氯仿-异戊醇抽提除去蛋白质,最 后得到 DNA。 五,实验步骤 ①取新鲜条浒苔适量,用液氮快速磨成粉末 ②将粉末转移到 eppendorf 管中,加入 0.5ml Lysis buffer,55℃消化过夜; ③加入 82.5µL 5M NaCl 及 82.5µL CTAB 56℃恒温 20 分钟 ④加入等体积试剂(试剂成分为酚:氯仿:异丙醇=25:24:1)12000rpm 离心 10 分钟, 取上清,转移到新的 eppendorf 管中 ⑤加入等体积氯仿,12000rpm 离心 10 分钟,取上清,转移到新的 eppendorf 管中 ⑥加入等体积异丙醇,轻柔地摇晃,直到看见絮状沉淀; ⑦12000rpm 离心 15 分钟,去除上清; ⑧加入 0.5ml 75%乙醇洗涤沉淀,6000rpm 离心 2 分钟,除去上清,小心的将管壁上残留 的液体去除. ⑨晾晒 DNA 5-10 分钟; ⑩用 30-50µL 无菌水溶解 DNA; 制备 0.8%琼脂糖凝胶电泳检测 DNA 产物,取 8µlDNA 溶液并与 1.5µl 上样缓冲液混合, 用移液枪加入凝胶孔。电泳缓冲液为 0.5×TBE 溶液,电泳结束后用凝胶呈像系统观察, 并拍照记录。 六,实验数据,结果分析 七,讨论、心得与体会;
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