第十章天然药物化学实验 10 四、实验步骤 1.大黄中蒽醌苷元的提取与分离 取大黄粉5g置于250ml的圆底烧瓶中，再加入20%HS0,水溶液60ml,在 水浴上回流2小时.冷却后抽滤，滤饼用水洗至近中性后抽干，然后自然干燥或70℃ 左右烘干。滤饼干燥后，加入乙醚25ml浸泡，放置室温浸泡2~3天。称取200-300 目硅胶30g采用干法装柱。过滤乙醚浸泡提取液并将滤液慢慢滴加到盛有约1g硅 胶的蒸发皿中，水浴使乙醚挥干，得到完全干燥的吸附有待分离样品的硅胶，然后 将其加入到柱色谱的顶端，再加入少量保护陆胶或脱脂棉以防洗脱时神乱顶部的拌 样硅胶)。用石油醚/乙酸乙酯(7：3)为洗脱剂进行洗脱（配制洗脱剂200ml),待最初的 有色段向下移动到距硅胶柱底端约1cm左右时开始收集洗脱液，约5~7ml为一份， 至主要成分洗脱完全为止。使用硅胶TLC检查总提取物（乙醚浸泡液）和各份洗脱收 集液，展开剂为石油醚/乙酸乙酯(7：3)。根据TLC检查结果，将相同成分洗脱液合 并并水浴回收溶剂，即可得单体化合物。（注：提前制备TLC用硅胶G板4块） 2.蒽酯类化合物的检识反应 (I)碱液试验(Borntrager's反应)：取样品洗脱接收液及I%茜草素乙醇溶液各 经清2 干燥，喷05%乙酸铁甲醇溶液，于80℃加热5min,观案斑点颜色。销图 五、"思考颗。·····00000·000000000 1,大黄中总蔥程苷元的提取、分离原理各是什么？ 2.写出本实验中慈醒苷元的提取分离流程图。 3.以石油醚/乙酸乙酯(7：3)为展开剂对大黄中5个蒽醒苷元进行硅胶TLC检 识，其R值如何顺序？为什么？ Experiment 1 Extraction,Isolation and Detection of Anthraquinones from Rheum palmatum L. 1.Objective 1.To master extraction,isolation principles and methods of anthraquinones from Rheum palmatumL. 2.To master the separation principle and method of silica gel column chromatography,and to learn dry column-packing method.第十章 天然药物化学实验 10 四、实验步骤 1. 大黄中蒽醌苷元的提取与分离 取大黄粉 5 g 置于 250 ml 的圆底烧瓶中，再加入 20%H2SO4 水溶液 60 ml，在 水浴上回流 2 小时。冷却后抽滤，滤饼用水洗至近中性后抽干，然后自然干燥或 70℃ 左右烘干。滤饼干燥后，加入乙醚 25 ml 浸泡，放置室温浸泡 2~3 天。称取 200~300 目硅胶 30 g 采用干法装柱。过滤乙醚浸泡提取液并将滤液慢慢滴加到盛有约 1 g 硅 胶的蒸发皿中，水浴使乙醚挥干，得到完全干燥的吸附有待分离样品的硅胶，然后 将其加入到柱色谱的顶端，再加入少量保护硅胶或脱脂棉(以防洗脱时冲乱顶部的拌 样硅胶)。用石油醚/乙酸乙酯(7:3)为洗脱剂进行洗脱(配制洗脱剂 200 ml)，待最初的 有色段向下移动到距硅胶柱底端约 1 cm 左右时开始收集洗脱液，约 5~7 ml 为一份， 至主要成分洗脱完全为止。使用硅胶 TLC 检查总提取物(乙醚浸泡液)和各份洗脱收 集液，展开剂为石油醚/乙酸乙酯(7:3)。根据 TLC 检查结果，将相同成分洗脱液合 并并水浴回收溶剂，即可得单体化合物。(注：提前制备 TLC 用硅胶 G 板 4 块) 2. 蒽酯类化合物的检识反应 (1) 碱液试验(Bornträger’s 反应)：取样品洗脱接收液及 1% 茜草素乙醇溶液各 2 ml，分别加入 1%NaOH 水溶液 2 ml，振摇放置分层后，观察颜色变化。 (2) 乙酸镁试验：在一小张滤纸上滴加样品溶液及 1%茜草素乙醇溶液各 1 滴， 干燥，喷 0.5%乙酸镁甲醇溶液，于 80℃加热 5 min，观察斑点颜色。 五、思考题 1. 大黄中总蒽醌苷元的提取、分离原理各是什么？ 2. 写出本实验中蒽醌苷元的提取分离流程图。 3. 以石油醚/乙酸乙酯(7:3)为展开剂对大黄中 5 个蒽醌苷元进行硅胶 TLC 检 识，其 Rf 值如何顺序？为什么？ Experiment 1 Extraction, Isolation and Detection of Anthraquinones from Rheum palmatum L. 1. Objective 1. To master extraction, isolation principles and methods of anthraquinones from Rheum palmatum L. 2. To master the separation principle and method of silica gel column chromatography, and to learn dry column-packing method