第一节 基因的表达系统与表达策略 第二节 基因在大肠杆菌中的高效表达 第三节 基因在酵母中的表达

酶是一类具有高效率、高度专一性、活性可调节的高分子生物催化剂。 1957巴斯德提出酒精发酵是酵母细胞活动的结果。 分子Gl→2分子乙醇+2分子CO2从Glc开始,经过12种酶催化,12步反应,生成乙 1897 Buchner兄弟证明发酵与细胞的活动无关,不含细胞的酵母汁也能进行乙醇发酵

3.1蛋白质表达系统 3.1.1 E. coli蛋白表达系统 3.1.2哺乳动物表达系统 3.1.3昆虫表达系统 3.1.4硒代蛋白表达 3.2蛋白纯化技术 3.2.1 AKTA使用规则及使用实例 3.2.2蛋白纯化柱子的介绍及清洁方法 3.2.3透析袋的使用 3.2.4浓缩管的使用 3.2.5 TEV蛋白酶的使用 3.2.6金属螯合层析 3.2.7分子筛 3.2.8疏水作用层析 3.2.9离子交换层析 3.2.10 Protein A/G 纯化抗体 3.2.11谷胱甘肽转移酶 (GST) 亲和层析 3.2.12 Fab的蛋白表达 3.2.13植物种子蛋白的提取方案 3.2.14包涵体复性 3.2.15 SDS-PAGE凝胶电泳 3.2.16 GraphPad Prism软件的使用 3.3筛选与蛋白互作的分子 3.3.1酵母双杂交技术从文库中筛选与蛋白X结合的蛋白 3.3.2噬菌体展示 3.3.3配体指数富集的系统进化技术筛选核酸适配体 3.4检测蛋白与互作分子的互作 3.4.1酵母双杂交 Yeast two hybrid 3.4.2双分子荧光互补Bimolecular fluorescence complementation 3.4.3 Western Blotting 3.4.4免疫共沉淀Co-Immunoprecipitation 3.4.5差示扫描荧光技术Differential Scanning Fluorimetry 3.4.6荧光偏振Fluorescence polarization 3.4.7等温滴定微量热Isothermal Titration Calorimetry 3.4.8表面等离子共振技术Biacore 3.4.9蛋白质交联Crosslink 3.4.10 Native-PAGE 3.4.11静态光散射Static light scattering 3.4.12凝胶阻滞实验EMSA-electrophoretic mobility shift assay 3.5蛋白生化实验技术 3.5.1蛋白酶活性检测 3.5.2 ATP酶活检测 3.5.3解旋酶活性检测 3.5.4体外转录实验

一、了解固定化细胞技术的方法和意义; 二、了解酵母发酵产生啤酒的过程; 三、了解基本微生物实验操作技术; 四、学习酸奶制作方法; 五、了解纯种发酵和传统发酵在无菌操作方面的差别

酶是一类具有高效率、高度专一性、活性可调节的高分子生物催化剂。 1957巴斯德提出酒精发酵是酵母细胞活动的结果。 分子Gl→2分子乙醇+2分子CO2从Gl开始,经过12种酶催化,12步反应,生成 1897 Buchner兄弟证明发酵与细胞的活动无关,不含细胞的酵母汁也能进行乙醇发酵

酶是一类具有高效率、高度专一性、活性可调节的高分子生物催化剂。 1957 巴斯德提出酒精发酵是酵母细胞活动的结果。 1 分子 Glc→2 分子乙醇+2 分子 CO2 从 Glc 开始，经过 12 种酶催化，12 步反应，生成乙醇。 1897 Buchner 兄弟证明发酵与细胞的活动无关，不含细胞的酵母汁也能进行乙醇发酵

一、实验目的 本实验以酵母 RNA 为材料，将 RNA 用碱水解成单核苷酸，再用离子交换柱层析进行分离，最后采用紫外吸收法进行鉴定。同时通过测定各单核苷酸的含量，可以计算出酵母 RNA 的碱基组成

利用分离的热带假丝酵母JM-1的培养液作破乳剂对冷轧乳化废水进行了生物破乳研究.该培养液在常温下8 h可使乳化废水的破乳率达97.1%,与化学破乳剂SYM+PAC 93.1%的破乳率相比具有更强的破乳活性,且受废水的pH值和温度影响很小.通过对全培养液、离心上清液、菌体和空白培养基的破乳效果对比表明,代谢过程中产生的生物表面活性剂是生物破乳的主要活性成分.热带假丝酵母JM-1菌株发酵液用于冷轧乳化废水破乳具有破乳率高、浮渣少及不产生二次污染等优点,可作为冷轧乳化废水的生物破乳剂

本实验为学生提供一个较全面的实践机会，学习如何提取纯化、分析鉴定一种酶， 并对这种酶的性质，尤其是动力学性质作初步的研究。 自 1860 年 Bertholet 从酒酵母 Sacchacomyces Cerevisiae 中发现了蔗糖酶以来，它已 被广泛地进行 了研究

一、填空(共20分,每格0.5分) 1.革兰氏染色法是鉴别细菌的重要方法,染色的要点如下:先用染色,再加b处 理,使菌体着色,然后用c脱色,最后用d复染,呈e为革兰氏阳性反应。 2.放线菌菌丝体分为a菌丝和b菌丝,在无性繁殖中分化为c,d和e等 3.酵母的出芽过程包括:首先在a邻近的中心体产生小的突起点,同时细胞b向外突出,冒出小芽,然后部分已增大和伸长的、e进入芽内,最后芽细胞从母细胞得到f、g、h、等,与母细胞分离并成为独立的细胞