Equilibria and free energies Estimate binding site occupancy Forces driving protein-DNA interactions Lambda repressor Methods to study protein-DNA interactions

第一节 DNA作为遗传物质的证据 第二节 核酸的化学结构和复制 第三节 DNA与遗传密码 第四节 DNA与蛋白质合成

一、历史回顾 140年前, Mendel在捷克莫勒温镇一个修道院里沉醉于豌豆杂交实验,也许根本就没有想到,他提出的遗传因子在半个世纪后被 Morgan定义为基因。1944 Avery年证明了基因的物质基础是DNA50年代 WatsonCrick初和又揭示了DNA的分子结构70年代初,DNA已可在体外被随意拼接并转回到细菌体内遗传和表达

Cloning vectors: 克隆载体 to clone a gene in a vector Expression vectors: 表达载体 to express a gene from a vector Integration vectors: 整合载体 to integrate a gene in a genome through a vector Cloning vectors 1 Plasmid vecters 2 Bacteriophage vectors 3 Cosmids & BACs 4 Eukaryotic vectors Cloning vectors: allowing the exogenous DNA to be inserted, stored, and manipulated mainly at DNA level. expression vectors: allowing the exogenous DNA to be inserted, stored, and expressed

Single-Stranded Filamentous DNA Bacteriophages M13, fl and fd Distinct Properties of M13 -Infect Escherichia coli Infect only male cells through attachment to the male-specific pilus Have circular single-stranded DNA Can be used as a cloning vector and DNA sequencing vehicle in genetic engineering Infect but not kill the cells

专题七DNA与基因表达调控 7.1DN生命的秘密与基因 7.2基因表达与调控

第一章 绪论 第一节 蛋白质的一级结构 第二节 蛋白质的二级结构 第三节 超二级结构与结构域 第四节 蛋白质分子的三级结构 第五节 蛋白质的四级结构 第六节 蛋白质结构与功能的关系 第七节 蛋白质的分离、纯化与鉴定 第二章 蛋白质生物化学 第一节 DNA 的空间结构 第二节 核酸的某些理化性质及常用研究方法 第三节 DNA 的复制 第四节 DNA 的损伤与修复 第五节 RNA 的生物合成 第六节 蛋白质的生物合成 第三章 核酸生物化学 第一节 酶与底物相结合的两种假说 第二节 酶促反应的本质和机制 第三节 酶促反应动力学 第四节 变构酶与变构调节 第五节 酶工程简介 第六节 核 酶 第四章 酶的作用原理 第一节 生物膜的化学组成 第二节 生物膜的基本结构 第三节 物质的跨膜运输 第四节 信号的过膜转导 第六章 代谢调节 第五章 生物膜的结构与功能 第二节 酶活性调节 第三节 酶含量的调节 第四节 整体调节 第六章 代谢调节

核酸(Nucleic Acids)包括脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,DNA)和核糖核 酸(Ribonucleic acid,RNA)两类。 分布:DNA分布在细胞核和线粒体。 RNA分布在胞液和细胞核。 功能:DNA的主要功能是贮存遗传信息 RNA的主要功能是传递遗传信息

PCR是 Polymerase chain reaction的缩写,中文译作聚合酶链式反应。其特点是可以 在几小时内方便、快捷地将微量DNA(含由微量RNA反转录成的cDNA)扩增达10 倍,得到ug级的DNA!该技术发明于八十年代中期,到了八十年代末,由于引用了耐热 DNA聚合酶,使这一技术得以蓬勃发展,成为分子生物学中应用最为广泛的技术之一,发 挥着日益重要的作用 由于其方便快捷,在中医药实验研究和临床检测中应用十分广泛

1.鉴定。鉴定所培养的单菌落中是否含有重组质粒,或仅含有自身环化的质粒。如 前所述,前者电泳后会出现大小不等的两条DNA条带,一条为线性质粒载体的DNA,另 条为插入的目的基因;后者仅有一条载体的DNA条带。比如 DDPCR、 RACEPCR、细 胞库筛选、基因重组,等