苏州大学医学部药学院：《细胞与分子生物学 Cellular and Molecular Biology》课程教学资源（教学大纲）

苏州大学医学部药学院：大类基础课程《细胞与分子生物学实验 Cellular and Molecular Biology Experiment》课程教学资源（电子教案）

苏州大学医学部药学院：大类基础课程《细胞与分子生物学实验 Cellular and Molecular Biology Experiment》课程教学资源（教学大纲）

上海中医药大学：《实验中医学》课程教学资源（PPT课件讲稿）分子生物学方法及其在中医研究中应用

PCR是 Polymerase chain reaction的缩写,中文译作聚合酶链式反应。其特点是可以 在几小时内方便、快捷地将微量DNA(含由微量RNA反转录成的cDNA)扩增达10 倍,得到ug级的DNA!该技术发明于八十年代中期,到了八十年代末,由于引用了耐热 DNA聚合酶,使这一技术得以蓬勃发展,成为分子生物学中应用最为广泛的技术之一,发 挥着日益重要的作用 由于其方便快捷,在中医药实验研究和临床检测中应用十分广泛

1.放大某一基因片段,用于探针、基因功能检测、报道基因研究等。方法是:把某 DNA片段插入到相应的载体(比如质粒、噬菌体、哺乳类细胞表达载体等),给予扩 增,用以标记探针、测序、cDNA库建立、基因功能检测等多种分子生物学实验

一、中医药实验研究为什么要采用分子生物学技术 1.一些不同的认识 (1)中医是宏观的,讲整体的,讲辨证的,讲阴阳平衡的。微观的分子生物学是没 有办法来研究中医的,不能研究中医的 (2)担心采用现代技术研究中医,中医会被西医吃掉 (3)中医的灵魂在临床 于是一些人对此技术格格不入,学不进去。 这里就有这样一些疑问,持这些观点的人是否真正了解中医药的发展历史,是否了 解分子生物学及其技术,是否了解当今医学研究发展的现状?回答大多是否定的

1.鉴定。鉴定所培养的单菌落中是否含有重组质粒,或仅含有自身环化的质粒。如 前所述,前者电泳后会出现大小不等的两条DNA条带,一条为线性质粒载体的DNA,另 条为插入的目的基因;后者仅有一条载体的DNA条带。比如 DDPCR、 RACEPCR、细 胞库筛选、基因重组,等

1.了解某一特定组织或细胞某一特定mRNA转录量的变化,如 RT-PCR、 Northernblot等 2.了解某一特定组织或细胞全部mRNA转录量的变化,如 DD-PCR、基因芯片等。 3.获得某一特定组织或细胞全部mRNA,以便建立cDNA库等

1.重组质粒的鉴定。当质粒的重组或其它载体重组后,通常会发生质粒的重组失 败,包括质粒的自身环化。因而要求进行筛选,把重组成功的质粒找出来。在目前常用的 质粒和其它载体中含有相应的抗生素抗性基因,一旦重组成功,质粒环化(包括自身环 化),抗生素抗性基因表达,被转化的大肠杆菌便具备抗相应抗生素的能力,可以含该抗生 素的培养基中生长传代,不然,重组失败,大肠杆菌便不能抵抗该抗生素而死亡