生化大实验是一门综合性的实验课程，教学的目的在于通过对生命物质的分离制备，纯化，分析等综合性实验，在已掌握的基础生物化学理论知识和生化实验常用方法的基本原理、基本操作技术（如滴定、比色、层析、电泳等）的基础上，训练学生的综合实践动手能力，掌握蛋白质、酶、核酸等重要物质的分离、纯化等的测定技术。实验一蛋白质含量的测定实验二离子交换法血清纯化IgG实验三离子交换层析法分离血清白蛋白实验四SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定分子量实验五等电聚焦法测定样品的等电点实验六质粒的分离与纯化实验七PCR扩增目的基因片段实验八酶联免疫吸附实验

第一章蛋白质的结构与功能 第二章核酸的结构与功能 第三章酶 第四章糖代谢 第五章脂类代谢 第六章生物氧化 第七章氨基酸代谢 第八章核苷酸代谢 第九章物质代谢的联系与调节 第十章DNA生物合成（复制） 第十二章蛋白质的生物合成（翻译） 第十三章基因表达调控 第十四章基因重组与基因工程 第十五章细胞信息转导 第十六章肝的生物化学 第十七章维生素与微量元素 第十八章常用分子生物学技术的原理及其应用 第十九章水和电解质代谢 第二十章酸碱平衡

第一章生物化学实验基本知识与操作 第一节生物化学实验基本知识 第二节 第二章分光光度技术 实验一双缩脲法测定蛋白质浓度 实验二 Folin-酚试剂法(Lowry 法)测定蛋白质浓度 实验三紫外分光光度法测定蛋白质浓度 实验四考马斯(Comessie)亮兰结合法测定蛋白质浓度 实验五BCA 法测定蛋白质浓度 实验六激素对血糖浓度的影响及血糖的测定 第三章生物大分子的提取、沉淀和离心分离技术 第一节生物材料的选取与预处理 第二节生物大分子的沉淀分离技术 第三节生物大分子离心分离技术 实验七鸡血SOD的提取、分离及活力测定 实验八碱性磷酸酶的制备及活力测定 实验九酪蛋白的制备 实验十动物肝脏中提取DNA 实验十一猪心肌细胞线粒体可溶性ATP合酶的提 第四章电泳技术 实验十二DNA 琼脂糖凝胶电泳 实验十三血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 实验十四聚丙烯酰胺凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶 实验十五蛋白质分子量的测定——SDS-聚丙烯凝胶电泳 实验十六聚丙烯酰胺等电聚焦电泳 第五章层析技术 第一节 层析技术概述 吸附层析 第三节 分配层析 第四节 离子交换层析 第五节 凝胶层析 第六节亲和层析 第七节 高效液相层析 实验十七氨基酸的纸上层析与氨基酸的转氨基作用 实验十八血清-球蛋白的分离纯化与鉴定 实验十九 亲和层析纯化胰蛋白酶 实验十二离子交换层析分离氨基酸 实验二十一蛋白质分子量测定——凝胶过滤层析法 第六章 分子生物学基本技术 核酸分子杂交 聚合酶链反应 第三节分子克隆 实验二十二Southern杂交分析 实验二十三 Northern 杂交分析 实验二十四 PCR 基因扩增 验二十五质粒DNA的提取及酶切 实验二十六 DNA重组实验 实验二十七大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 附录一常用缓冲液的配制方法 附录二易变质及需要特殊方法保存的试剂 附录三一般化学试剂的分级 附录四 English words in the lab

科学领域正经历一次根本性变革,即将来临的生命科学革命的影响将远远胜 过信息学科。当代化学的一个特点就是化学研究越来越与生命现象挂钩,化学与 生命科学的交叉和互相渗透是化学发展的大趋势。本课程为化学专业本科生的必 修基础课。本课程将以蛋白质、酶、核酸、生物膜和糖的结构与功能以及代谢和 调控为主线介绍生物化学的基本概念、基础知识和基本理论,同时介绍生命科学 中的一些最新发展,为学生今后进行与生命科学有关的研究和进一步学习打下基 础。使学生了解到生命运动的基础是生物体内物质分子的化学运动,生命科学的 发展需要更多的化学家的参与,化学的发展与生命科学紧密相关

一、判断题:(请用\√\或\×”表示,共15分) 1、百日咳毒素可使Gia的精氨酸ADP核糖基化。(） 2、磷酸肌醇系统是不经过腺昔酸环化酶的另一第二信使系统。(） 3、人体可以合成各种类型的饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸。(） 4、氨是有毒物质,在体内主要是以谷氨酰胺的形式进行转运的。(） 5、当二分子甘油异生为一分子葡萄糖时需要消耗二个高能磷酸键。(） 6、肾上腺皮质激素和肾上腺髓质激素都是首先通过与其膜受体结合而产生生 日效应的。(） 7、据推测细胞内的DNA主要以B型结构存在。(） 8、生物体内核酸的碱基配对方式都是 watson-Crick-配对。(） 9、导致RNA化学性质更活泼的关键是RNA中的核糖含有2-H。(）

第二章蛋白质化学 第一节蛋白质概述 一、蛋白质生物功能蛋白质是生物体内最重要的物质之一,英文名称叫做 Protein,是“最原初的”、“第一重要的”意思,不论是动物、植物,还是简单的细菌、病毒等都有蛋白质存在。它是细胞原生质的主要成分,与核酸一起共同构成了生命的物质基础。蛋白质的重要性很早就被认识,1838年,当 Mulder提出蛋白质这个名词时,他就明 确指出:在植物和动物中存在这样一种物质,毫不怀疑它是生物体中已知的最重要的物质,如果没有它,在我 们这个星球上生命则是不可能存在的

第一章蛋白质结构与功能 第二章核酸结构与功能 第三章酶 第四章糖代谢核 第五章脂代谢苷酸代谢 第六章生物氧化 第七章氨基酸代谢 第八章核苷酸代谢 第九章物质代谢的联系与调节 第十章DNA的生物合成 第十一章RNA的生物合成 第十二章蛋白质的生物合成 第十三章基因表达调空 第十四章基因重组与基因工程 第十五章细胞信息传导 第十六章血液的生物化学 第十七章肝的生物化学 第十八章维生素与微量元素 第十九章糖蛋白、蛋白聚糖和细胞外基因 第二十章基因与生长基因 第二十一章基因诊断与基因治疗 第二十二章常用分子生物学技术的原理及其应用 第二十三章基因组学与医学