第一节 概述 第二节 固定化酶的性质及其影响因素 第三节 固定化酶的制备 第四节 固定化细胞 第五节 固定化辅酶和原生质体 第六节 酶反应器和固定化酶（细胞）的应用

一、菌种分离与筛选工作程序 二、分离与筛选的设计要求 三、含微生物样品的采集 四、含微生物样品的富集培养 五、利用固体平板的生化反应进行分离 六、随机分离方法 七、一些生物活性物质产生菌的分离 第三节　菌种选育 一、自然选育 二、诱变育种 三、杂交育种 四、原生质体融合育种 五、基因工程育种 第四节 菌种保藏 一、菌种保藏原理 二、保藏方法 三、国内外重要菌种保藏机构

植物离体培养的概念与应用 组织与器官培养 花药和花粉培养与单倍体育种 植物细胞培养及其突变体筛选 原生质体培养与体细胞杂交

第一部分 果实性状鉴定 实验一：樱桃品种果实鉴定 实验二：杏品种果实鉴定 实验三：草莓品种果实鉴定 实验四：桃品种果实鉴定 实验五：葡萄品种果实鉴定 实验六：梨品种果实鉴定 实验七：苹果品种果实鉴定 实验八：板栗品种果实鉴定 实验九：柑桔品种果实鉴定 第二部分 植株性状鉴定 实验十：草莓品种植株性状鉴定 实验十一：葡萄品种植株性状鉴定 实验十二：桃品种植株性状鉴定 实验十三：苹果品种植株性状鉴定 第三部分 育种途径 实验十四：果树资源调查 实验十五：板栗单株选种 实验十六：果树引种 实验十七：桃育种杂交计划的制定 实验十八：桃有性杂交技术 实验十九：葡萄有性杂交技术 实验二十：苹果有性杂交技术 实验二十一：辐射诱变 实验二十二：化学诱变多倍体 第四部分 鉴定方法 实验二十三 花粉发芽及生活力鉴定 实验二十四：根皮率法预先鉴定砧木的矮化效应 实验二十五：果树抗病性鉴定 实验二十六：果树花芽抗寒性鉴定 实验二十七：多倍体鉴定 实验二十八：葡萄丰产性鉴定 实验二十九：花粉发育时期鉴定 实验三十：胚乳发育时期鉴定 第五部分 生物技术 实验三十一：组织培养中培养基的配制与接种 实验三十二：愈伤组织诱导和悬浮细胞系的建立 实验三十三：花药培养 实验三十四：胚乳培养 实验三十五：幼胚培养 实验三十六：原生质体的制备、纯化和融合 实验三十七：遗传转化实验 实验三十八：分子标记技术

第一部分 基础性实验. 5 实验 1、细胞基本形态观察及临时装片制备. 5 实验 2、参观电镜与细胞超微结构观察. 15 实验 3、细胞膜的渗透性. 20 第二部分 综合性实验. 22 实验 4、核酸(DNA 和 RNA)的细胞核定位. 22 实验 5、细胞骨架的光学显微镜观察 . 26 实验 6、细胞凝集反应 . 29 实验 7、线粒体和液泡系的超活染色与观察. 30 实验 8、细胞计数及活力测定. 34 实验 9、细胞化学成分的显示. 37 实验 10、细胞核和线粒体的分离. 45 实验 11、细胞有丝分裂标本制备及观察 . 50 实验 12、减数分裂压片标本制备与观察. 53 实验 13、动物染色体标本的制备与观察. 58 实验 14、植物染色体标本的制备与观察. 61 实验 15、动物细胞培养（录象）. 63 第三部分 设计性、研究性实验. 73 1、PCR 技术检测生物样品中的 DNA . 74 2、植物组织培养 . 74 3、质粒 DNA 的提取. 74 4、切片技术 . 75 5、MTT 法检测化学药物对体外细胞的影响. 75 6、原生质体的分离和培养 . 75 8、分组自己选题 . 75

实验一 普通光学显微镜及暗视野显微镜的使用.4 实验二 植物细胞骨架的光学显微镜观察.21 实验三 植物原生质体的分离与诱导融合.26 实验四 细胞膜的渗透性及意义.32 实验五 液泡系及线粒体的活体染色与观察.39 实验六 显微摄影原理及应用.45 实验七 无菌操作的准备.50 实验八 贴壁细胞的传代培养.60 实验九 贴壁细胞的冻存与复苏.67 实验十 植物组织培养技术.72 实验十一 石蜡切片及苏木精-伊红染色技术.79

沈阳师范大学：《细胞生物学实验》课程教学资源（教案讲义）实验六 植物原生质体的分离与诱导融合

实验一 普通光学显微镜的调试与观察 .4 实验二 暗视野显微镜的制作与使用 .20 实验三 细胞膜的渗透性及意义.24 实验四 液泡系及线粒体的活体染色与观察.32 实验五 植物细胞骨架的光学显微镜观察 .38 实验六 植物原生质体的分离与诱导融合 .43 实验七 动物细胞培养的无菌化准备 .49 实验八 动物细胞传代培养的虚拟仿真实训.59 实验九 动物贴壁细胞的复苏.64 实验十 动物贴壁细胞的传代培养.68 实验十一 动物贴壁细胞的冻存.73

沈阳师范大学：《细胞生物学实验》课程教学资源（教案讲义）实验五 植物原生质体的分离与诱导融合

《工业微生物学》课程教学课件（PPT讲稿）第十章 原生质体融合育种