• 重组DNA（分子克隆） • 分子杂交

吉林大学基础医学院：实验教学中心（教案讲义）分子克隆技术

载体必备条件: 1.是一个复制子; 2.载体在受体细胞中能大量繁殖,其携带的外源基因才能在受体细胞中得到大量扩增; 3.有1到几个限制内切酶的单一识别与切割位点,便于外源基因的插入; 4.具有选择性的遗传标记(如抗生素抗性标记等)以此知道它是否已进入受体细胞,并据此标记将受体细胞从其他细胞中分离出来

• 基础知识 • 克隆载体及基因克隆 • cDNA文库/Genomic DNA文库 • 表达载体 • 重组DNA技术的应用

第一节 分子杂交与印迹技术 Molecular Hybridization & Blotting Technology 第二节 聚合酶链反应 Polymerase Chain Reaction 第三节 核酸序列分析 Nucleic Acid Sequence Analysis 第四节 基因文库 Gene Library 第五节 疾病相关基因的克隆与鉴定 Cloning and Identification of Disease Relative Genes 第六节 遗传修饰动物模型的建立及应用 The Establishment and Application of Heredity Modified Animal Model 第七节 生物芯片技术 Biological Chip Technology 第八节 蛋白质相互作用研究技术 Research Technology of Interaction of Protein

5.1 重组DNA技术发展史 5.2 DNA操作技术 5.3 基因克隆技术 5.4 基因表达研究技术 5.5 蛋白质组学及研究技术

一、重组DNA技术发展史上的重大事件 二、基因操作的主要技术原理 三、分子克隆技术 四、DNA的 Microarray

DNA克隆(DNA cloning)：应用酶学的方法，在 体外将目的基因与载体DNA结合成一具有自我复 制能力的DNA分子—复制子，继而通过转化或转 染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子细胞， 再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子的过程。 DNA克隆又称基因克隆（gene cloning）。 基因工程（genetic engineering）：实现基因克 隆所采用的方法及相关的工作

DNA克隆(DNA cloning)：应用酶学的方法，在 体外将目的基因与载体DNA结合成一具有自我复 制能力的DNA分子—复制子，继而通过转化或转 染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子细胞， 再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子的过程。 DNA克隆又称基因克隆（gene cloning）

第一节 概述 第二节 DNA克隆的基本过程 第三节 重组DNA技术与分子医学的关系