吉林大学基础医学院：实验教学中心《生物电镜技术》课程实验教学大纲

电子显微镜的意义 一、光学显徽镜:细菌和细胞 二、电子显微镜:病毒、噬菌体、类病毒、DNA和蛋白质大分子

第一节 免疫组织化学技术概述 一、标本的处理 二、抗原的保存与修复 三、抗体的处理与保存 四、免疫组化的结果判断 五、质量控制 第二节 免疫荧光组织化学技术 一、组织处理 二、荧光抗体的标记及染色 第三节 酶免疫组织化学技术 二、酶标记抗体免疫组化染色 三、非标记抗体免疫酶组化染色 四、酶免疫组化染色中的常用的酶及显色底物 第四节 亲合组织化学染色 一、生物素-亲合素法 二、葡萄球菌A蛋白法 三、凝集素法 四、链霉亲合素-生物素法 第五节 免疫标记电镜技术 一、 免疫标记电镜技术的原理 二、 免疫标记电镜技术的标本制备要求 三、 常用的免疫标记电镜技术 第六节 免疫组织化学技术的应用 一、 免疫组织化学技术的临床应用 二、 免疫组织化学技术的拓展 思考题 小结

第一章基本知识 透射电镜(TEM)、扫描电镜(SEM)、扫描透射电镜(stem、超高压电镜(UHVEM 第一节透射电镜 一、基本构造 (一)电子光学系统1电子抢2磁电子透镜3样品室4观察记录装置5真空系统

主要优点:放大倍数大、制样方便、分辨率高、景深 大等 目前广泛应用于材料、生物等研究领域 扫描电子显微镜的成象原理和光学显微镜、透射电子 显微镜均不同,它不是以透镜放大成象,而是以类似 电视摄影显象的方式、用细聚焦电子束在样品表面扫 描时激发产生的某些物理信号来调制成象,近年扫描 电镜多与波谱仪、能谱仪等组合构成用途广泛的多功 能仪器

第一部分 基础性实验. 5 实验 1、细胞基本形态观察及临时装片制备. 5 实验 2、参观电镜与细胞超微结构观察. 15 实验 3、细胞膜的渗透性. 20 第二部分 综合性实验. 22 实验 4、核酸(DNA 和 RNA)的细胞核定位. 22 实验 5、细胞骨架的光学显微镜观察 . 26 实验 6、细胞凝集反应 . 29 实验 7、线粒体和液泡系的超活染色与观察. 30 实验 8、细胞计数及活力测定. 34 实验 9、细胞化学成分的显示. 37 实验 10、细胞核和线粒体的分离. 45 实验 11、细胞有丝分裂标本制备及观察 . 50 实验 12、减数分裂压片标本制备与观察. 53 实验 13、动物染色体标本的制备与观察. 58 实验 14、植物染色体标本的制备与观察. 61 实验 15、动物细胞培养（录象）. 63 第三部分 设计性、研究性实验. 73 1、PCR 技术检测生物样品中的 DNA . 74 2、植物组织培养 . 74 3、质粒 DNA 的提取. 74 4、切片技术 . 75 5、MTT 法检测化学药物对体外细胞的影响. 75 6、原生质体的分离和培养 . 75 8、分组自己选题 . 75