重庆医科大学2011一2012学年度上学期《检验仪器学》考试试卷 考试方式（闭卷）： 考试时间：120分钟 题号 四 五总分 得分 评卷人 签名 一名词解释（每题2分，共计20分） 是： 定情况下， 吸光度与样品的浓度呈正比 人朗光为色光。波长范用越大，单色光纯度超民偏离越大：游被中用 子的存在并不改变每一给定分子的特性，即分子间互不干扰。 2.原子化器：提供能量将液态试样中的待测元素干燥蒸发使之转变成原子态的蒸气。火 焰原子化器无火焰原子化器 3.荧光光谱：用入作激发光源，并固定强度，让物质发射的荧光通过单色器分光，测定 不同波长的荧光强度。以荧光波长为横坐标，荧光强度为纵坐标作图，便得荧光光谱。 4.特征浓度：指产生1%吸收或0.0044吸光度时所对应的被测元素的浓度或质量。 5.组合式自动生化分析仪：各个分析模块组合在一起，可以完成生化、免疫和电解质分 析检测。 6.景深：又称焦点深度，是指在成一幅清晰像的前提下，像平面不变，景物沿光轴前后 移动的距离。 7.像差：实际的光学仪器不可能使物点发出而进入系统的所有光线都是沿着高斯光学的 理想光路成像，从而导致成像在形状方面的缺陷，称之为像差， 8.色谱图：表明已被色谱柱分离的物质流过检测器的含量与时间的关系。 9.气相色谱仪：是采用气体作为流动相，利用气态样品在两相（固定相和流动相）中的 分配差异而使之得到分离的一种色谱仪器。 10.梯度洗脱：梯度洗脱是在色谱的分离过程中，把两种或更多的不同极性互溶洗脱液随 二.填空（每空0.5分，共计20分） 1.临床检验仪器常用的性能指标有：灵敏度，误差，噪音，最小检测量，精度，可靠性 重复性，分辨率，测量范围和示值范围，测量范围，响应时间，频率响应范围。 2.光的吸收定律表达式中吸光系数的大小与多种因素有关，包括：入射光波长、溶液温 度、溶剂性质及吸收物质的性质等。 3. 紫外一可见分光光度计的类型按光学系统可分为单光速，双光速，双波长三种类型
1 重庆医科大学 2011—2012 学年度上学期《检验仪器学》考试试卷 考试方式（闭卷）： 考试时间： 120 分钟 题号 一 二 三 四 五 总分 得分 评卷人 签名 一 名词解释（每题 2 分，共计 20 分） 1. 朗伯-比尔定律：表达式是：A=kbc,在一定情况下，吸光度与样品的浓度呈正比。适用 条件：入射光为单色光。波长范围越大，单色光纯度越低，偏离越大；溶液中邻近分 子的存在并不改变每一给定分子的特性，即分子间互不干扰。 2. 原子化器：提供能量将液态试样中的待测元素干燥蒸发使之转变成原子态的蒸气。火 焰原子化器无火焰原子化器 3. 荧光光谱：用λex 作激发光源，并固定强度，让物质发射的荧光通过单色器分光，测定 不同波长的荧光强度。以荧光波长为横坐标，荧光强度为纵坐标作图，便得荧光光谱。 4. 特征浓度：指产生 1％吸收或 0.0044 吸光度时所对应的被测元素的浓度或质量。 5. 组合式自动生化分析仪：各个分析模块组合在一起，可以完成生化、免疫和电解质分 析检测。 6. 景深：又称焦点深度，是指在成一幅清晰像的前提下，像平面不变，景物沿光轴前后 移动的距离。 7. 像差：实际的光学仪器不可能使物点发出而进入系统的所有光线都是沿着高斯光学的 理想光路成像，从而导致成像在形状方面的缺陷，称之为像差。 8. 色谱图：表明已被色谱柱分离的物质流过检测器的含量与时间的关系。 9. 气相色谱仪：是采用气体作为流动相，利用气态样品在两相（固定相和流动相）中的 分配差异而使之得到分离的一种色谱仪器。 10. 梯度洗脱：梯度洗脱是在色谱的分离过程中，把两种或更多的不同极性互溶洗脱液随 时间按某种变化的比例混合，使流入色谱柱的洗脱液组成作连续的改变。其目的是让 样品每一个组分都在最佳分配系数的条件下分离出来，以获得较好的峰形。 二. 填空（每空 0.5 分，共计 20 分） 1. 临床检验仪器常用的性能指标有：灵敏度，误差，噪音，最小检测量，精度，可靠性， 重复性，分辨率 ，测量范围和示值范围，测量范围，响应时间 ，频率响应范围。 2. 光的吸收定律表达式中吸光系数的大小与多种因素有关，包括：入射光波长、溶液温 度、溶剂性质及吸收物质的性质等。 3. 紫外- 可见分光光度计的类型按光学系统可分为单光束, 双光束, 双波长三种类型。 院系 班级 姓名 学号
4.与双波长分光光度计相比较，单、双光束可见光分光光度计的缺点是：不能克服非特征吸 收。 5.原子吸收光谱仪主要由光源、原子化器、分光系统及检测系统组成。 6.原子吸收分光光度计中分光系统的作用是将：将所需要的共振吸收线分离出来。 7.任何发射荧光的物质都具有邀发光遭和发射光谱这两个特征光谱。 8.荧光物质的最大激发波长和最大发射波长是鉴定物质的根据，也是定量测定中所选用的 最灵敏的波长。 9.普通光学显微镜成像系统是由物镀和且镜两组透镜组合而成，其分辨极限约为022μm, 其镜筒长度一般为160mm,最后所成放大倒立的虚像，位于人眼的明视距离处。 10.普通光学显微镜的一般使用盟视场方式观察标本。40X物镜的标记：400.65,1600.17， 表示：放大倍数为40X,数值孔径为0.65，机械筒长为160mm,盖玻片为厚度0.17mm 1L.气相色谱仪气路系统的目的是为向色谱柱提供质地洁逢和流动平稳的流动相。 12.气相和高效液相色谱仪常用柱管形状分别为“U”型和直管型。 13.在高效液相色谱仪器工作中，对于复杂样品，常规无法检出时，可采用下列措施：程序 升温、程序变流速、组合柱或梯度洗脱。 三.单选题（在每题唯一正确答案的番号上画圆圈，每小题1分，共计20 分 1.当灵敏度为定值时，检验仪器系统为： ④.线性的B.非线性的C.稳定的 D.不一定E.均不对 2.在同一介质中，红光与紫色光的折射率相比较： A.红光的折射率更大®.紫色光的折射率更大 C.两者的折射率一样大 D.根据情况而定 E均不对 3.分光光度计的核心部件是： A.放大器 ⑧.单色器 C检测器D.显示器 E.光源灯 4紫外分光光度计可见分光光度计在260m波长处测量时必须用 A.玻璃池 ⑧.石英池 C.石英、玻璃池均不可 D.石英、玻璃池均可 E.均不对 5.棱镜与光栅所产生的光谱是： A.都是非匀排光谱 B.棱镜是匀排光谱，光栅是非匀排光谱 C.都是匀排光谱 ①.棱镜是非匀排光谱，光栅是匀排光谱 E.均不对 6.721型分光光度计在校准时，厂家推荐铺钕滤光片的校正波長为： A.519nm ®.529nm C.539nm D.549nm E.5590nm 7.双波长分光光度计利用吸收点法测得的二组分混合物在两特定波长处的吸光度差△A应 为： A.大于待测组分的△A ®.等于待测组分的△AC.小于待测组分的AA D.等于干扰组分的△AE.均不对
2 4. 与双波长分光光度计相比较，单、 双光束可见光分光光度计的缺点是:不能克服非特征吸 收。 5. 原子吸收光谱仪主要由光源、原子化器、分光系统及检测系统组成。 6. 原子吸收分光光度计中分光系统的作用是将: 将所需要的共振吸收线分离出来。 7. 任何发射荧光的物质都具有激发光谱和发射光谱这两个特征光谱。 8. 荧光物质的最大激发波长和最大发射波长是鉴定物质的根据，也是定量测定中所选用的 最灵敏的波长。. 9. 普通光学显微镜成像系统是由物镜和目镜两组透镜组合而成，其分辨极限约为 0.22μm， 其镜筒长度一般为 160mm，最后所成放大倒立的虚像，位于人眼的明视距离处。 10. 普通光学显微镜的一般使用明视场方式观察标本。40X 物镜的标记：40/0.65，160/0.17, 表示：放大倍数为 40X，数值孔径为 0.65，机械筒长为 160mm，盖玻片为厚度 0.17mm。 11. 气相色谱仪气路系统的目的是为向色谱柱提供质地洁净和流动平稳的流动相。 12. 气相和高效液相色谱仪常用柱管形状分别为“U”型和直管型。 13. 在高效液相色谱仪器工作中，对于复杂样品，常规无法检出时，可采用下列措施：程序 升温、程序变流速、组合柱或梯度洗脱。 三．单选题（在每题唯一正确答案的番号上画圆圈，每小题 1 分，共计 20 分） 1. 当灵敏度为定值时，检验仪器系统为： ○A . 线性的 B. 非线性的 C. 稳定的 D.不一定 E. 均不对 2. 在同一介质中，红光与紫色光的折射率相比较： A. 红光的折射率更大 ○B . 紫色光的折射率更大 C. 两者的折射率一样大 D. 根据情况而定 E.均不对 3. 分光光度计的核心部件是： A. 放大器 ○B . 单色器 C. 检测器 D. 显示器 E. 光源灯 4 紫外分光光度计可见分光光度计在 260nm 波长处测量时必须用 A. 玻璃池 ○B . 石英池 C. 石英、玻璃池均不可 D. 石英、玻璃池均可 E. 均不对 5. 棱镜与光栅所产生的光谱是： A. 都是非匀排光谱 B. 棱镜是匀排光谱, 光栅是非匀排光谱 C. 都是匀排光谱 ○D . 棱镜是非匀排光谱, 光栅是匀排光谱 E. 均不对 6. 721 型分光光度计在校准时,厂家推荐铺钕滤光片的校正波長为： A. 519nm ○B . 529nm C. 539nm D. 549nm E. 5590nm 7. 双波长分光光度计利用吸收点法测得的二组分混合物在两特定波长处的吸光度差A 应 为： A. 大于待测组分的A ○B . 等于待测组分的A C. 小于待测组分的A D. 等于干扰组分的A E. 均不对
8.荧光光谱分析法比紫外可见光谱分析法的灵敏度： A.低 ⑧.高 C.一样 D.不一定 E均不对 9.在用紫外可见分光光度计进行样品浓度测试时，透光度读数在多少的时候，样品浓度测试 的相对误差最小。 A.26.8% .36.8% C.46.8% D.56.8% E.66.8% 10.单色器的关键元件是： A.入射狭缝B.出射狭缝⊙.色散元件D.平行透镜E汇聚透镜 11最常见的像差是： ④.球差 B.象散 C.彗差 D.场曲 E.畸变 12.显微镜的核心器件是： A.目镜 B.聚光器 C.物镜转换器 ⊙.物镜 E.调焦装置 13高档显微镜常采用的照明方式有： A.反射照明 B.临界照明 C.透射照明 D.落射照明 ©.柯拉照明 14.干涉相衬显微镜的原理是利用： A.自然光的干涉 ⑧.偏振光的干涉 C.直射光与干涉光的干涉 D.自然光与X光的干涉 E.激光和紫外光的干涉 15.不能直接观察透明标本的是： A.暗视场显微镜 B.相差显微镜 ©.倒置显微镜 D.荧光显微镜 E.激光扫描共聚焦显微镜 16.对于沸点分布比较均匀的样品，常用的程序升温方式为 A.多种升温速度 B.恒温-线性 C.线性一恒温 D.恒温一线性一恒温 回.线性程序 17.气相色谱系统的核心是 @.分析柱B.流动相 C气路 D.载气纯度 E.温度控制 18.下面那一句话对高效液相色谱仪的描述是不正确的： A.来源于对植物色素的分析 B.采用了高效固定相 C.有多种检测器 ⑤.分析速度很快 E.使用高压流动相 19.气相色谱仪恒温操作的温度一般要求比样品最高沸点 A.高40℃左右B.高10℃左右©.低40℃左右D.低10℃左右E.均不对 20.对液相色谱仪中的溶剂输送系统主要要求为： A.宽的流速范围，并能适于指定的溶剂 ®.宽的入口压力范围，并能适于所有的溶剂 C.宽的流速范围和窄的入口压力范围 D.窄的流速范围和宽的入口压力范围 E.均不对
3 8. 荧光光谱分析法比紫外-可见光谱分析法的灵敏度： A. 低 ○B . 高 C.一样 D. 不一定 E.均不对 9. 在用紫外-可见分光光度计进行样品浓度测试时，透光度读数在多少的时候，样品浓度测试 的相对误差最小。 A. 26.8% ○B . 36.8% C. 46.8% D. 56.8% E. 66.8% 10. 单色器的关键元件是： A. 入射狭缝 B.出射狭缝 ○C .色散元件 D.平行透镜 E.汇聚透镜 11 最常见的像差是： ○A . 球差 B. 象散 C. 彗差 D. 场曲 E. 畸变 12. 显微镜的核心器件是： A. 目镜 B. 聚光器 C. 物镜转换器 ○D . 物镜 E. 调焦装置 13 高档显微镜常采用的照明方式有： A. 反射照明 B. 临界照明 C. 透射照明 D. 落射照明 ○E . 柯拉照明 14. 干涉相衬显微镜的原理是利用: A. 自然光的干涉 ○B . 偏振光的干涉 C. 直射光与干涉光的干涉 D. 自然光与 X 光的干涉 E. 激光和紫外光的干涉 15. 不能直接观察透明标本的是： A. 暗视场显微镜 B. 相差显微镜 ○C . 倒置显微镜 D. 荧光显微镜 E. 激光扫描共聚焦显微镜 16. 对于沸点分布比较均匀的样品，常用的程序升温方式为 A. 多种升温速度 B. 恒温－线性 C. 线性－恒温 D. 恒温－线性－恒温 ○E . 线性程序 17. 气相色谱系统的核心是: ○A ．分析柱 B. 流动相 C. 气路 D. 载气纯度 E. 温度控制 18. 下面那一句话对高效液相色谱仪的描述是不正确的： A. 来源于对植物色素的分析 B. 采用了高效固定相 C. 有多种检测器 ○D . 分析速度很快 E. 使用高压流动相 19. 气相色谱仪恒温操作的温度一般要求比样品最高沸点 A.高 40C 左右 B. 高 10C 左右 ○C . 低 40C 左右 D.低 10C 左右 E.均不对 20. 对液相色谱仪中的溶剂输送系统主要要求为： A. 宽的流速范围, 并能适于指定的溶剂 ○B . 宽的入口压力范围, 并能适于所有的溶剂 C. 宽的流速范围和窄的入口压力范围 D. 窄的流速范围和宽的入口压力范围 E. 均不对
四.问答题（各小题4分，共计32分） 1.简述RF-540荧光分光光度计是如何实现克服光源灯的光强变化对测试结果的影响？(4 答：在激发单色器出射口增加了一个监测用光电检测元件，利用负反馈原理，克服光源灯的 光强变化对测试结果的影响 2试术原尾吸收光普仪了作原匣？(4分) 答 光源发生相应待测元素特征波长的射线穿过火焰，把试样的溶液以细粒子流的形式喷射 到火焰上，部分射线被吸收。吸收的强度与试样的浓度成正比，通过测量吸收量并将其与标 准溶液进行对比，即可确定待测物质浓度。 3。白动生化分析仪采用后分光枝术的优点？(4分) 答：光路无可移动部分 不需要移动仪器的任何部件 可同时选择双波长或多波长进行测定，大大降低噪音，有效抑制标本混浊、溶血等因素对结果 的影响。 4.详细阐述单光束单波长分光光度计（如721型分光光度计）操作使用过程中应注意的主要 问题？(4分) 答：接通电源需预热30分钟，待仪器工作稳定。未测试前打开试样室盖，避免检测元件过快 老化。调好波长需反复调零和100%。 5.简述光学显微镜的性能参数对实际操作的影响？(4分) 答：显微镜的分辨率和放大倍数是两个不同的但又互相联系的性能参数。当选用的物镜数值 孔径不够大、分辨率不够高时，显微镜不能分清物体的微细结构，此时即使过度增大放大倍 数，得到的也只能是一个轮廓虽大但不够清晰的图像。随着放大倍数的增加，标本调焦、找 观察对象越来越闲难。这时的放大率称为无效放大倍数。反之如果分辨率很高而放大倍数不 足时，显微镜虽已具备分辨的能力，但因图像太小仍然不能被人眼清晰地观察。所以，为了 充分发辉显微镜的作用，应使显微镜物镜的数值孔径与显微镜的总放大倍数合理兀配。同时. 放大倍数与视野、景深和工作距离成反比，也会影响景象亮度。 6.简述安装普通光学显微镜光学系统的原则及其注意事项？(4分) 学部件的要按自上而下的顺序进行。即先目镜、物镜再聚光镜、反射镜。物镜按 照顺时针方向从低倍镜到 倍镜 到高1 油浸物镜。在安装过程中必须牢记部件之间的 组装关系，避免错漏。注意保护光学元件不受损受污。 7.气相色谱仪为什么必须进行稳定的温度控制？(4分) 答：在气相鱼谱仪的使用时程中，必须使用气杰样品（如果是液态样品需要经村气化处理） 这就决定了在大多数情况下气相色谱仪的温度操作。而温度控制的稳定与否直接与气相色谱 仪的正常工作及其测量结果的可靠性有着密切的关系。首先，温度对于固定相是十分重要的 操作时一定要知道所用固定相温度的极限，把全部操作保持在临界温度以下100C~150℃进 行。这将有助于延长柱子的使用寿命和避免检测器与其他装置受固定相“流失”所造成的污 染。其次，在气相色谱仪中，温度不仅对样品在色谱柱上的分离过程有很大影响，对许多检 测器（如热导、电子捕获、示差折光等）的检测结果也有很大的影响。因此必须对色谱柱箱、 检测器和气化室等实行稳定的温度控制：
4 四.问答题(各小题 4 分，共计 32 分) 1. 简述 RF-540 荧光分光光度计是如何实现克服光源灯的光强变化对测试结果的影响？（4 分） 答：在激发单色器出射口增加了一个监测用光电检测元件，利用负反馈原理，克服光源灯的 光强变化对测试结果的影响 2．试述原子吸收光谱仪工作原理?（4 分） 答：光源发生相应待测元素特征波长的射线穿过火焰，把试样的溶液以细粒子流的形式喷射 到火焰上，部分射线被吸收。吸收的强度与试样的浓度成正比，通过测量吸收量并将其与标 准溶液进行对比，即可确定待测物质浓度。 3．自动生化分析仪采用后分光技术的优点？（4 分） 答：光路无可移动部分，不需要移动仪器的任何部件。 可同时选择双波长或多波长进行测定，大大降低噪音,有效抑制标本混浊、溶血等因素对结果 的影响。 4．详细阐述单光束单波长分光光度计（如 721 型分光光度计）操作使用过程中应注意的主要 问题？（4 分） 答：接通电源需预热 30 分钟，待仪器工作稳定。未测试前打开试样室盖，避免检测元件过快 老化。调好波长需反复调零和 100%。 5．简述光学显微镜的性能参数对实际操作的影响？（4 分） 答：显微镜的分辨率和放大倍数是两个不同的但又互相联系的性能参数。当选用的物镜数值 孔径不够大、分辨率不够高时，显微镜不能分清物体的微细结构，此时即使过度增大放大倍 数，得到的也只能是一个轮廓虽大但不够清晰的图像。随着放大倍数的增加，标本调焦、找 观察对象越来越困难。这时的放大率称为无效放大倍数。反之如果分辨率很高而放大倍数不 足时，显微镜虽已具备分辨的能力，但因图像太小仍然不能被人眼清晰地观察。所以，为了 充分发挥显微镜的作用，应使显微镜物镜的数值孔径与显微镜的总放大倍数合理匹配。同时， 放大倍数与视野、景深和工作距离成反比，也会影响景象亮度。 6．简述安装普通光学显微镜光学系统的原则及其注意事项？（4 分） 答：安装光学部件的要按自上而下的顺序进行。即先目镜、物镜再聚光镜、反射镜。物镜按 照顺时针方向从低倍镜到中倍镜再到高倍镜、油浸物镜。在安装过程中必须牢记部件之间的 组装关系，避免错漏。注意保护光学元件不受损受污。 7．气相色谱仪为什么必须进行稳定的温度控制？（4 分） 答：在气相色谱仪的使用过程中，必须使用气态样品（如果是液态样品需要经过气化处理）， 这就决定了在大多数情况下气相色谱仪的温度操作。而温度控制的稳定与否直接与气相色谱 仪的正常工作及其测量结果的可靠性有着密切的关系。首先，温度对于固定相是十分重要的。 操作时一定要知道所用固定相温度的极限，把全部操作保持在临界温度以下 100C～150℃进 行。这将有助于延长柱子的使用寿命和避免检测器与其他装置受固定相“流失”所造成的污 染。其次，在气相色谱仪中，温度不仅对样品在色谱柱上的分离过程有很大影响，对许多检 测器（如热导、电子捕获、示差折光等）的检测结果也有很大的影响。因此必须对色谱柱箱、 检测器和气化室等实行稳定的温度控制
8.液固吸附色谱法中溶剂对分离结果有何影响，选择溶剂的基本原则是什么？(4分) 答：流动相的改变会影响样品在两相中的分配的差异，其流速的变化会影响保留时间和峰形 选择流动相的基本原则①稳定性。主要是指柱效率或柱子的保留性质要长期不变。②适应所 采用的检测器。③能溶解待分离样品。④清洗方便。⑤粘度要小一些。 五.绘出仪器结构框图，并注明各部分的名称（每小题4分，共计8分） 1.原子吸收光谱仪的结构框图 答： 光源灯一 原子化器 份光系纫 一险测器 高效液相色谱仪 储液槽 脱气转置 高压泵 流量控制 梯度装置 温度控制 进样装置 记录仪数据处理十 检测器 分离柱 十废液
5 8．液固吸附色谱法中溶剂对分离结果有何影响，选择溶剂的基本原则是什么?（4 分） 答：流动相的改变会影响样品在两相中的分配的差异，其流速的变化会影响保留时间和峰形。 选择流动相的基本原则①稳定性。主要是指柱效率或柱子的保留性质要长期不变。②适应所 采用的检测器。③能溶解待分离样品。④清洗方便。⑤粘度要小一些。 五.绘出仪器结构框图, 并注明各部分的名称(每小题 4 分,共计 8 分) 1. 原子吸收光谱仪的结构框图 答： 光源灯 原子化器 分光系统 检测器 2. 高效液相色谱仪 答： 废液 数据处理 检测器 分离柱 温度控制 进样装置 流量控制 梯度装置 高压泵 记录仪 储液槽 脱气装置