档案保护实验技术之 常见霉菌培养和形态观察
档案保护实验技术之—— 常见霉菌培养和形态观察
背景知识： 档案制成材料纸张、油墨、印泥、胶片、 磁带以及装订线、浆糊等都内含有机大分子 化合物。空气尘埃中降落下来的霉菌孢子 旦温湿度适合，就有可能在材料上孳生菌体。 霉菌代谢过程中分泌胞外酶降解大分子有机 物为溶于水的小分子化合物，菌体细胞将其 吸收到体内作营养物，导致材料结构不可逆 劣化、耐久性下降。了解霉菌形态构造、生 理特性和所需生长环境条件，对库房防霉杀 菌十分重要
背景知识： 档案制成材料纸张、油墨、印泥、胶片、 磁带以及装订线、浆糊等都内含有机大分子 化合物。空气尘埃中降落下来的霉菌孢子一 旦温湿度适合，就有可能在材料上孳生菌体。 霉菌代谢过程中分泌胞外酶降解大分子有机 物为溶于水的小分子化合物，菌体细胞将其 吸收到体内作营养物，导致材料结构不可逆 劣化、耐久性下降。了解霉菌形态构造、生 理特性和所需生长环境条件，对库房防霉杀 菌十分重要
、 实验目的 1.掌握霉菌在人工培养条件下的一个完整生活 史，观察固体培养基上根霉、 曲霉和青霉的菌落形态。 2.掌握光学生物显微镜的简单构造和工作原理。 3.在显微镜下观察根霉、曲霉和青霉的菌丝和 孢子的形态特征。 4.了解人工培养霉菌的操作方法。 二、实验仪器和材料 光学显微镜、放大镜；高压灭菌锅、恒温恒湿培 养箱：，培养皿、马铃薯琼脂培养基（去皮马铃薯200g 葡萄糖10g, 琼脂18g,水1000ml);载玻片、盖玻 片、接种针、 消毒棉、滤纸、酒精灯、电炉等
一、实验目的 1．掌握霉菌在人工培养条件下的一个完整生活 史，观察固体培养基上根霉、曲霉和青霉的菌落形态。 2．掌握光学生物显微镜的简单构造和工作原理。 3．在显微镜下观察根霉、曲霉和青霉的菌丝和 孢子的形态特征。 4．了解人工培养霉菌的操作方法。 二、实验仪器和材料 光学显微镜、放大镜；高压灭菌锅、恒温恒湿培 养箱；培养皿、马铃薯琼脂培养基（去皮马铃薯200g， 葡萄糖10g，琼脂18g，水1000ml）；载玻片、盖玻 片、接种针、消毒棉、滤纸、酒精灯、电炉等
三、实验仪器主要构造 和工作原理 1.高压蒸气灭菌锅 培养基和培养器皿灭菌机 理 一水的沸点随水蒸气压力 增大而上升，湿热蒸气灭菌。 机理有三个：一是菌体吸收水 分，体内蛋白质容易凝固；二 是湿热穿透力大， 热量易进入 细胞内；三是湿热蒸气有潜热 1一压力表？一安全阀3一放气阀4一软管 5一繁围螺栓6一灭曹桶7一筛架8一水 能，迅速提高温度，增加灭菌 手提式灭曹锅 效力。在1.05kg/cm2压力和 121.3℃的蒸气作用条件下处 理15-30分钟，一般达到无菌 状态
三、实验仪器主要构造 和工作原理 1．高压蒸气灭菌锅 培养基和培养器皿灭菌机 理——水的沸点随水蒸气压力 增大而上升，湿热蒸气灭菌。 机理有三个：一是菌体吸收水 分，体内蛋白质容易凝固；二 是湿热穿透力大，热量易进入 细胞内；三是湿热蒸气有潜热 能，迅速提高温度，增加灭菌 效力。在1.05kg/cm2压力和 121.3℃的蒸气作用条件下处 理15-30分钟，一般达到无菌 状态
2.生物显微镜 放大成像原理 利用光线聚光原理，物 镜将标本第一次放大成 实像，目镜将物镜 放大的实像再次放 大成倒像。放大倍数是 1甘镜2一领筒3一物换转换器4物领 5一镜台6一聚光器7一可安光阑8一反光覆 目镜和物镜放大倍数的 9一镜座10一相调节螺旋11一细调节城旋12一使所 光学显微镜的构透 乘积
2．生物显微镜 放大成像原理—— 利用光线聚光原理，物 镜将标本第一次放大成 实像，目镜将物镜 放大的实像再次放 大成倒像。放大倍数是 目镜和物镜放大倍数的 乘积
四、实验方法和观察结果 1、仔细阅读高压蒸气灭菌锅和生物显微镜的说明书。 掌握仪器的主要构造、操作方法和使用注意事项。 2、马铃薯培养基配制和灭菌：将马铃薯小块煮沸半 分时趁避怨秀髮乳草养华其套大留秀奔。 3、,菌种分离：刮下档案制成材料上的杂菌，分散、 稀释、接种在培养基上，在恒温恒湿培养箱(t28一30°℃、 φ80%)中人工培养2一3天，霉菌完成一个完整生活史。 再接种、培养、分离直至形成单个菌体繁殖的纯种单菌 落，根据菌落特征鉴定出根霉、曲霉、菁霉兰类，备用。 4、用放大镜观察根霉、曲霉、青霉的菌落特征，进 行比较。 5、挑出极少量霉菌，装在载玻片上，轻轻盖上盖玻 在生物显微镜下观察根霉、 岸的形态结构特征，进行龙较 曲霉、青霉的菌丝和孢
四、实验方法和观察结果 1、仔细阅读高压蒸气灭菌锅和生物显微镜的说明书。 掌握仪器的主要构造、操作方法和使用注意事项。 2、马铃薯培养基配制和灭菌：将马铃薯小块煮沸半 小时，过滤，加定量葡萄糖和琼脂使其全溶，加定量水 分，趁热过滤并分装在若干培养皿中，高压灭菌30分钟。 3、菌种分离：刮下档案制成材料上的杂菌，分散、 稀释、接种在培养基上，在恒温恒湿培养箱（t28－30℃、 φ80%）中人工培养2－3天，霉菌完成一个完整生活史。 再接种、培养、分离直至形成单个菌体繁殖的纯种单菌 落，根据菌落特征鉴定出根霉、曲霉、青霉三类，备用。 4、用放大镜观察根霉、曲霉、青霉的菌落特征，进 行比较。 5、挑出极少量霉菌，装在载玻片上，轻轻盖上盖玻 片，在生物显微镜下观察根霉、曲霉、青霉的菌丝和孢 子的形态结构特征，进行比较
1一孢子囊 2一散放出来的孢子 3-一菌丝 4-假根 根霉的孢子生殖
1一足经能 2一分生花子把 3一顶 4一初生小梗 5一次生小梗 6一小梗 7一分生宛子 曲霉各部示意图 1一分生孢子 2一小梗 3一梗基 4一明枝 5一分生孢子樱 青霉的形态 元元元
6、画出三种霉菌在显微镜放大倍率下的菌丝 和孢子形态特征的视野图。 7、画出档案制成材料上孳生霉菌的一个完整 生活史图，注明各阶段的生理特征。 五、实验思考和讨论 1、在同样人工条件下培养根霉、曲霉和青霉， 三者菌落形态和生长发育速度有什么区别？ 2、根据霉菌的一个完整生活史，分析如何进 行档案库房防霉工作？ 3、使用光学显微镜观察霉菌形态，操作时要 注意哪三个基本要点才能确保视野清晰？ 4、分析在档案库房环境条件下霉菌生长发育特 点？
6、画出三种霉菌在显微镜放大倍率下的菌丝 和孢子形态特征的视野图。 7、画出档案制成材料上孳生霉菌的一个完整 生活史图，注明各阶段的生理特征。 五、实验思考和讨论 1、在同样人工条件下培养根霉、曲霉和青霉， 三者菌落形态和生长发育速度有什么区别？ 2、根据霉菌的一个完整生活史，分析如何进 行档案库房防霉工作？ 3、使用光学显微镜观察霉菌形态，操作时要 注意哪三个基本要点才能确保视野清晰？ 4、分析在档案库房环境条件下霉菌生长发育特 点？