4 实验三 双乙酰（紫外分光光度法） 1 原理 双乙酰作为挥发性组份从啤酒样中蒸发出来，与邻苯二胺反应，生成 2，3－二 甲喹喔啉，在 335nm波长下进行测定。由于其他联二酮类都具有相同的反应特性， 再加上蒸馏过程中部分前驱体要转化成联二酮，因此上述测定结果为总联二酮含量 (以双乙酰表示)。 2 仪器 a) 带有加热套管的双乙酰蒸馏器 ； b) 具有锥形瓶(或平底蒸馏烧瓶)的蒸汽发生瓶：2000mL(或 3000mL) ； c) 容量瓶：25 mL ； d) 紫外分光光度计：备有 10mm石英比色皿或 20mm玻璃比色皿。 3 试剂和溶液 a) 4mol/L 盐酸溶液：按 GB/T 601 配制； b) l0g/L 邻苯二胺溶液：称取邻苯二胺 0.100g，溶于 4mol/L 盐酸溶液中，并定容 至 10mL，摇匀，放于暗处。此溶液须当天配制与使用；若配制出来的溶液呈红色， 应重新更换新试剂； c) 有机硅消泡剂(或甘油聚醚) 。 4 分析步骤 4.1 蒸馏 将双乙酰蒸馏器安装好，加热蒸汽发生瓶，使水至沸。通汽预热后，置 25mL 容量瓶于冷凝器出口接受馏出液，外加冰浴冷却，加 2～4 滴消泡剂于 100mL 量筒 中，再注入未经除气的预先冷至 5℃左右的酒样 100mL，迅速移入已预热的蒸馏器 内，并用少量水冲洗带塞漏斗，盖塞。然后用水封口，进行蒸馏，直至馏出液接近 25mL(蒸馏需在 3～5min 内完成)时取下容量瓶，达到室温用水定容，摇匀。 4.2 显色与测量： 分别吸取馏出液 10.0mL 于两支干燥的比色管中，并于第一支管中加入邻苯二胺 溶液 0.50mL，第二支管中不加(做空白)，充分摇匀后，同时置于暗处放置 20～ 30min，然后于第一支管中加 4mol/L 盐酸溶液 2mL，于第二支管中加入 4mol/L 盐酸 溶液 2.5mL，混匀后，于 335nm波长下，用 20mm玻璃比色皿，以空白调仪器零 点，测定其吸光度。比色测定操作须在 20min 内完成。 5 分析结果的表述 试样中双乙酰含量按式(2)计算： X = A335 1.2 .(2) 式中： X —— 试样中双乙酰的含量，mg/L ； A335 —— 试样在 335nm波长下，用 20mm比色皿测得的吸光度； 1.2—— 吸光度与双乙酰含量的换算系数