3 实验二 α-氨基氮的测定（茚三酮法） 1、实验试剂 a 显色剂 100 克磷酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O） 60 克磷酸二氢钾（KH2PO4） 5.00 克水合茚三酮 3.00 克果糖 用水溶液溶解后稀释至 1 升（此溶液在低温下用棕色瓶可保存 2 周，pH 应为 6.6-6.8。操作时可以按比例配成 100ml）。 b 稀释溶液：2 克碘酸钾溶于 600ml水中，再加入 96%乙醇 400ml. c 标准溶液：溶 107.2mg 甘氨酸于 100ml 水中，0℃贮藏。用时按要求稀释。 该溶液含有 200mgα-氨基氮/升。 2、实验操作 取糖化的麦芽汁 1.00ml（或者是其他的合适量，使稀释后的浓度为 1-3mgα-氨 基氮/升），放入 100ml的容量瓶中，稀释到刻度，摇匀。 标准甘氨酸溶液稀释液：取 1.00ml 标准溶液，在 100ml 的容量瓶中稀释到刻 度。 取麦芽汁稀释溶液、水、标准的甘氨酸溶液（三个）稀释液各 2.00ml，放入比 色管中，（水用于空白对照），各比色管中分别加入 1.00ml 的显色剂，摇匀，在沸 水中加热 16min。（此时应该准备 20℃的水浴） 20℃水浴中冷却 20min。 加入 5.00ml的碘酸钾稀释溶液，摇匀，在 30min 内于 570nm处测定吸光度值。 3、计算 游离的α-氨基氮（毫克/升麦芽汁）=2×100×样品溶液吸光度值 / 标准溶液平均 吸光度