DNA(大部分) 22 Sw60碱性10-40550005 5 *Beckman离心机的转头型号，以SW50.1为例，SW是水平式转头，50表示最高转速为5000， 最后数字1是型号.SW40/41是二种水平转头，最高转速分别为40000rmin和41000rmim (二)等比重技术等比重技术是按粒子浮力密度分离的方法。选择介质的密度梯度， 要使其梯度的密度范围包括所有待分离粒子的密度。样品可以铺在密度梯度液柱上面或均匀 分布于密度梯度介质中。离心过程中粒子移至与它本身相同密度的地方形成区带。因此平衡 时，它们的分离完全是由于它们之间密度的差异，和时间无关（图4）。 等比重梯度实验中最常用的介质是碱金属的盐溶液，如铯盐或物盐。实验开始时往往 是一个密度均一的溶液，在离心过程中自动形成梯度。这个过程称作“自生梯度”。形成梯 度过程中，原先均匀分布的样品粒子也下沉或上浮至其等比重位置。这种“自生梯度”技 术需要长时间离心，例如，DNA在氯化艳梯度中形成等比重区带需要36到48小时。特别 要指出的是，离心时间不会因转速增加而减少，提高转速只能使梯度物质重新分布，区带 位置有所改变。 许多密度梯度实验常常把速率区带方法和等比重法合并应用。例如选择一个密度梯度使 得样品中一部分组分沉降到离心管底部，而另一部分组分停留在它的等比重区 5 2 图4“自生”梯度等比重分离 1.样品与梯度物质混合物的均匀溶液 2离心力作用下，梯度物质重新分布，样品区带保留在等 比重处 §5电泳原理 一、电泳的基本原理 带电荷的粒子在一定条件的电场作用下，可向一极移动，如带正电荷的粒子移向负极， 带负电荷的粒子移向正极，这种现象称为电泳。许多生物分子都带有电荷（如蛋白质、核酸 DNA（大部分） 22 SW60 碱性 10~40 55 000 5 5 *Beckman离心机的转头型号，以SW50 .1为例，SW是水平式转头，50表示最高转速为5 000， 最后数字 1 是型号。SW40/41 是二种水平转头，最高转速分别为 40 000 r/min 和 41 000 r/min。 （二）等比重技术 等比重技术是按粒子浮力密度分离的方法。选择介质的密度梯度， 要使其梯度的密度范围包括所有待分离粒子的密度。样品可以铺在密度梯度液柱上面或均匀 分布于密度梯度介质中。离心过程中粒子移至与它本身相同密度的地方形成区带。因此平衡 时，它们的分离完全是由于它们之间密度的差异，和时间无关（图 4）。 等比重梯度实验中最常用的介质是碱金属的盐溶液，如铯盐或铷盐。实验开始时往往 是一个密度均一的溶液，在离心过程中自动形成梯度。这个过程称作“自生梯度”。形成梯 度过程中，原先均匀分布的样品粒子也下沉或上浮至其等比重位置。这种“自生梯度”技 术需要长时间离心，例如，DNA 在氯化铯梯度中形成等比重区带需要 36 到 48 小时。特别 要指出的是，离心时间不会因转速增加而减少，提高转速只能使梯度物质重新分布，区带 位置有所改变。 许多密度梯度实验常常把速率区带方法和等比重法合并应用。例如选择一个密度梯度使 得样品中一部分组分沉降到离心管底部，而另一部分组分停留在它的等比重区。 §5 电泳原理 一、电泳的基本原理 带电荷的粒子在一定条件的电场作用下，可向一极移动，如带正电荷的粒子移向负极， 带负电荷的粒子移向正极，这种现象称为电泳。许多生物分子都带有电荷（如蛋白质、核酸 1 2 图 4 “自生”梯度等比重分离 1.样品与梯度物质混合物的均匀溶液 2.离心力作用下，梯度物质重新分布，样品区带保留在等 比重处