(3)在一定的条件下,将一定量的酶液和底物溶液混合均匀,适时记下反应开始的时间。 (4)反应到一定的时间,取出适量的反应液,运用各种生化检测技术,测定产物的生成量或 底物的减少量。 注意:若不能即时测出结果的,则要及时终止反应,然后再测定 ◆终止酶反应的方法: (1)反应时间到,立即取出适量反应液,置于沸水浴中,加热使酶失活 (2)加入适宜的酶变性剂,如三氯醋酸等,使酶变性失活 (3)加入酸或碱溶液,使反应液的pH值迅谏远离催化反应的最适pH,而使反应终止 (4)将取出的反应液立即置于低温冰箱、冰粒堆或冰盐溶液中,使反应液的温度迅速降低 至10°以下,而终止反应 62酶活力单位 ◆酶活力的高低,是以酶活力的单位数来表示的 ◆酶活力单位的定义:在特定条件下(温度可采用25°C,pH等条件均采用最适条件), 每1min催化1mol的底物转化为产物的酶量定义为1个酶活力单位。这个单位称为 国际单位(U)(1961年国际生物化学与分子生物学联合会规定 国际上另一个常用的酶活力单位是卡特(Kat)在特定条件下,每秒催化1mol底物 转化为产物的酶量定义为1卡特(Kath ◆两种酶活力单位之间可以互相换算。即 1 Kat=I mol/s= 60 mol/min=60x 106 H mol/min=6X107 IU ◆比活力:为了比较酶制剂的纯度和活力的高低。 酶的比活力是酶纯度的一个指标,是指在特定条件下,单位重量(mg)蛋白质或RNA 所具有的酶活力单位数。 鹌比活力=酶活力(单位)/mg(蛋白或RNA)(3)在一定的条件下，将一定量的酶液和底物溶液混合均匀，适时记下反应开始的时间。 (4) 反应到一定的时间，取出适量的反应液，运用各种生化检测技术，测定产物的生成量或 底物的减少量。 注意：若不能即时测出结果的，则要及时终止反应，然后再测定。 ◆终止酶反应的方法： （1）反应时间一到，立即取出适量反应液，置于沸水浴中，加热使酶失活； （2）加入适宜的酶变性剂，如三氯醋酸等，使酶变性失活； （3）加入酸或碱溶液，使反应液的 pH 值迅速远离催化反应的最适 pH，而使反应终止； （4）将取出的反应液立即置于低温冰箱、冰粒堆或冰盐溶液中，使反应液的温度迅速降低 至 10℃以下，而终止反应。 6.2 酶活力单位 ◆酶活力的高低，是以酶活力的单位数来表示的。 ◆酶活力单位的定义：在特定条件下（温度可采用 25℃，pH 等条件均采用最适条件）， 每 1 min 催化 1 μmol 的底物转化为产物的酶量定义为 1 个酶活力单位。这个单位称为 国际单位（IU）。（1961 年国际生物化学与分子生物学联合会规定） ◆国际上另一个常用的酶活力单位是卡特（Kat）。在特定条件下，每秒催化 1 mol 底物 转化为产物的酶量定义为 1 卡特（Kat）。 ◆两种酶活力单位之间可以互相换算。即： 1 Kat = 1 mol/s = 60 mol/min = 60×106 μmol/min = 6×10 7 IU ◆比活力：为了比较酶制剂的纯度和活力的高低。 酶的比活力是酶纯度的一个指标，是指在特定条件下，单位重量（mg）蛋白质或 RNA 所具有的酶活力单位数。 酶比活力＝酶活力（单位）/ mg （蛋白或 RNA）